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BFU2015-69874-R

Financiado
FISIOLOGIA Y FISIOPATOLOGIA CARDIACA IN VIVO CON SONDAS DE CALCIO LUMINISCENTES...
FISIOLOGIA Y FISIOPATOLOGIA CARDIACA IN VIVO CON SONDAS DE CALCIO LUMINISCENTES EN PEZ CEBRA EN LOS ULTIMOS AÑOS HEMOS GENERADO Y MEJORADO SONDAS FLUORESCENTES Y LUMINISCENTES CODIFICADAS GENETICAMENTE PARA MONITORIZAR LA DINAMICA ESPACIO-TEMPORAL DEL ION CALCIO, ESTAS CONSISTEN EN LA FUSION MOLECULAR DE PROTEINAS FLUORES... EN LOS ULTIMOS AÑOS HEMOS GENERADO Y MEJORADO SONDAS FLUORESCENTES Y LUMINISCENTES CODIFICADAS GENETICAMENTE PARA MONITORIZAR LA DINAMICA ESPACIO-TEMPORAL DEL ION CALCIO, ESTAS CONSISTEN EN LA FUSION MOLECULAR DE PROTEINAS FLUORESCENTES (FP) Y UNA FOTOPROTEINA SENSIBLE AL CA2+ (AEQUORIN, AEQ), TRAS LA UNION DEL CA2+, HAY TRANSFERENCIA DE ENERGIA RESONANTE (BRET) ENTRE LA AEQ (EN SU ESTADO EXCITADO) Y LA FP, LO QUE RESULTA EN UN CAMBIO EN EL COLOR DE LA LUZ EMITIDA, DE ESTA FORMA, SE CREARON SONDAS CON EMISION EN LAS BANDAS AMARILLA Y ROJA DEL ESPECTRO (PLOS ONE 6: E19520, 2011; PFLUGERS ARCH, 2014 OCT 31 EPUB), EN ESTA PROPUESTA, INTRODUCIREMOS ALGUNAS MEJORAS EN LOS INDICADORES CITADOS MEDIANTE MUTAGENESIS, Y SE ESTUDIARA LA DINAMICA DEL CA2+ SIMULTANEAMENTE EN DOS COMPARTIMENTOS DE LA MISMA CELULA, UTILIZANDO COMBINACIONES DE SONDAS SEPARADAS ESPECTRALMENTE (MANJARRES, PFLUGERS ARCH 455, 961, 2007), POR OTRA PARTE, HEMOS DEMOSTRADO QUE ALGUNAS DE LAS VARIANTES GENERADAS CON EMISION ROJA SON ADECUADAS PARA SU USO EN EXPERIMENTOS DE IMAGING IN VIVO, YA QUE PRESENTAN MINIMA ABSORCION Y DISPERSION POR LOS TEJIDOS ANIMALES,EL POTENCIAL DE ACCION CARDIACO Y LOS CAMBIOS TRANSITORIOS DE CA2+ SON INDICADORES CLAVE DE LA FUNCION CARDIACA, MUCHOS FARMACOS CAUSAN ARRITMIAS ENTRE SUS EFECTOS ADVERSOS, POR OTRA PARTE, LAS PATOLOGIAS DEL RITMO CARDIACO, ASI COMO LOS MISMOS PROCESOS DEL DESARROLLO EMBRIONARIO, CAMBIAN LA FORMA DE LAS OSCILACIONES DE CA2+, SU FRECUENCIA O SU PROPAGACION EN REGIONES DEL CORAZON, PROPONEMOS UTILIZAR LOS INDICADORES BIOLUMINISCENTES CITADOS PARA ESTUDIAR LA DINAMICA DEL CA2+ EN EL CORAZON DEL PEZ CEBRA (DANIO RERIO) IN VIVO EN LOS PRIMEROS DIAS DEL DESARROLLO, PARA ELLO, SE EXPRESARAN LAS SONDAS DE FORMA TRANSITORIA MEDIANTE LA INYECCION DE MRNA Y SE HARAN TRANSGENICOS DE ALGUNAS DE LAS SONDAS, CON ESTOS ULTIMOS SE PODRA ABORDAR EL ESTUDIO DE LA FISIOPATOLOGIA DE LA EXCITACION Y CONTRACCION DEL MIOCARDIO MEDIANTE CRUCES CON LINEAS MUTANTES SELECCIONADAS, EL MODELO ELEGIDO, EL PEZ CEBRA, ES IDONEO PARA CARACTERIZAR ESTOS NUEVOS BIOSENSORES POR SU TRANSPARENCIA Y EXPOSICION DEL CORAZON AL MEDIO, RAPIDO DESARROLLO EX UTERO, Y PORQUE OFRECE LA POSIBILIDAD DE REALIZACION DE CRIBADO FARMACOLOGICO EN UN ORGANISMO VIVO INTACTO, CORAZÓN\AEQUORIN\CALCIO\PEZ CEBRA\DANIO RERIO\FISIOPATOLOGÍA\ARRITMIA\BIOLUMINISCENCIA\BRET\FLUORESCENCIA ver más
01/01/2015
UCLM
109K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2015-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 109K€
Líder del proyecto
UNIVERSIDAD DE CASTILLA-LA MANCHA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.
Total investigadores 2583