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CTQ2011-29299-C02-02

Financiado

EVALUACION BIOLOGICA DE NUEVOS AGENTES DE TRANSFECCION ESPECIFICOS BASADOS EN VI...

EVALUACION BIOLOGICA DE NUEVOS AGENTES DE TRANSFECCION ESPECIFICOS BASADOS EN VINIL SULFONAS PARA QUE UN COMPUESTO SEA CAPAZ DE MEDIAR LA TRANSFECCION DE CELULAS EUCARIOTAS, DEBE FORMAR COMPLEJOS CON ACIDOS NUCLEICOS, ENTRAR AL INTERIOR CELULAR Y SER TRANSPORTADO EFICIENTEMENTE AL NUCLEO. ESTE SUBPROYECTO DE INVESTIGACION... ver más

01/01/2011

UGR

42K€

Presupuesto del proyecto: 42K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE GRANADA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 5507

Ver Participantes

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2011-01-01

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Participantes

UGR

Lider

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE GRANADA

Total investigadores 5507

Presupuesto del proyecto 42K€

Descripción del proyecto PARA QUE UN COMPUESTO SEA CAPAZ DE MEDIAR LA TRANSFECCION DE CELULAS EUCARIOTAS, DEBE FORMAR COMPLEJOS CON ACIDOS NUCLEICOS, ENTRAR AL INTERIOR CELULAR Y SER TRANSPORTADO EFICIENTEMENTE AL NUCLEO. ESTE SUBPROYECTO DE INVESTIGACION PROPONE LA EVALUACION BIOLOGICA DE AGENTES DE TRANSFECCION SINTETIZADOS A PARTIR DE ESQUELETOS DE PAMAM, PEI O SILICA COMO MOLECULAS BASE. A PARTIR DE ELLOS Y UTILIZANDO LA QUIMICA DE VINIL SULFONAS, SE INTRODUCIRAN FUNCIONALIDADES QUE INCREMENTEN LA EFICIENCIA DE TRANSFECCION Y/O LA ESPECIFICIDAD PARA TIPOS CELULARES CONCRETOS. ESTOS COMPUESTOS SERAN SINTETIZADOS POR EL GRUPO DEL DR. SANTOYO (INVESTIGADOR PRINCIPAL DEL SUBPROYECTO CON EL QUE NOS COORDINAMOS). RECIENTEMENTE, HEMOS DESCRITO LA SINTESIS Y PROPIEDADES BIOLOGICAS DE AGENTES DE TRANSFECCION DE ALTA EFICIENCIA AL AÑADIR CADENAS ALQUILICAS A PAMAM-G2 UTILIZANDO LA QUIMICA DE VINIL SULFONAS (ORGANIC & BIOMOLECULAR CHEMISTRY, (2011) 9(3), 851 - 864). EL PROYECTO ACTUAL PRETENDE EXTENDER LA QUIMICA DE VINIL SULFONAS A OTRAS MOLECULAS BASE Y ASI, EN ESTE SUBPROYECTO SE LLEVARA A CABO LA CARACTERIZACION BIOLOGICA DE LOS AGENTES DE TRANSFECCION SINTETIZADOS MEDIANTE LA DETERMINACION DE LA CAPACIDAD DE UNION A DNA DE LOS MISMOS, PROTECCION DE LA DIGESTION POR DNASAS, TAMAÑO DE PARTICULA Y POTENCIAL "ZETA", EFICIENCIA DE TRANSFECCION DE LINEAS EUCARIOTAS UTILIZANDO DNA PLASMIDICO Y SIRNA Y LOCALIZACION SUBCELULAR DE LOS COMPLEJOS DE TRANSFECCION Y DNA MEDIANTE MICROSCOPIA CONFOCAL DE FLUORESCENCIA. A PARTIR DE AQUELLOS COMPUESTOS QUE SEAN MAS EFICIENTES EN LA TRANSFECCION DE CELULAS, SE AÑADIRAN FUNCIONALIDADES QUE DIRIJAN ESTOS AGENTES DE TRANSFECCION HACIA RECEPTORES DE MEMBRANA: GALACTOSA PARA HEPATOCITOS, MANOSA EN EL CASO DE RECEPTORES DE SUPERFICIE DE MONOCITOS/MACROFAGOS Y PRODUCTOS AVANZADOS DE GLICACION EN AQUELLAS CELULAS DE ENDOTELIO O DE SISTEMA NERVIOSO QUE SOBRE-EXPRESAN EL RECEPTOR DE PRODUCTOS AVANZADOS DE GLICACION. ADICIONALMENTE, SE DISEÑARAN MODIFICACIONES PARA INCREMENTAR LA INTERACCION DE LOS COMPLEJOS DE TRANSFECCION CON RECEPTORES INTRACELULARES, FACILITANDO LA TRANSLOCACION DEL DNA AL NUCLEO. ASI, SE PROPONE LA INCORPORACION DE LACTOSA QUE LES PERMITIRIA UNIRSE A LA GALECTINA-3, SOBRE-EXPRESADA EN EL CASO DE LINEAS CELULARES DE CANCER DE COLON, O BIEN PROGESTERONA Y DEXAMETASONA QUE INTERACCIONAN CON RECEPTORES DE ESTEROIDES SOBRE-EXPRESADOS EN LINEAS CELULARES DE CANCER DE MAMA. PARA TODOS ESTOS AGENTES DE TRANSFECCION SE ANALIZARA PRIMERO LA INTERACCION CON SUS DIANAS MOLECULARES IN VITRO Y A CONTINUACION, SE REALIZARAN EXPERIMENTOS DE TRANSFECCION EN LAS LINEAS CELULARES EN CULTIVO QUE SOBRE-EXPRESAN ESTAS DIANAS MOLECULARES. POR ULTIMO, SE DETERMINARA LA CO-LOCALIZACION SUBCELULAR DE ESTOS AGENTES DE TRANSFECCION MARCADOS FLUORESCENTEMENTE MEDIANTE MICROSCOPIA CONFOCAL DE FLUORESCENCIA EN CELULAS CHO-K1 QUE SOBRE-EXPRESEN ESTAS DIANAS MOLECULARES FUSIONADAS A LA PROTEINA FLUORESCENTE VERDE. DE LA INTERACCION DE ESTA NUEVA GENERACION DE AGENTES DE TRANSFECCION CON SUS DIANAS MOLECULARES CABE ESPERAR UNA MAYOR ESPECIFICIDAD AL MISMO TIEMPO QUE SE FACILITE LA TRANSLOCACION AL NUCLEO CELULAR DEL COMPLEJO DE TRANSFECCION INCREMENTANDO LA EFICIENCIA DEL PROCESO. CONFIAMOS QUE ESTOS REACTIVOS DE TRANSFECCION CONSTITUYAN UNA HERRAMIENTA UTIL EN BIOTECNOLOGIA, Y AMPLIEN LA BASE DEL CONOCIMIENTO PARA EL DISEÑO FUTURO DE AGENTES DE TRANSFECCION UTILES EN TERAPIA GENICA. RANSFECCION EUCARIOTA\RECEPTOR DE ESTEROIDES\GALECTINA-3\RECEPTOR DE MANOSAS\RECEPTORES DE GALACTOSA\RECEPTOR DE PRODUCTOS AVANZADOS DE GLICA\SILICA\PEI\PAMAM\VINIL SULFONAS

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