Descripción del proyecto
EL VIRUS DE LA GRIPE ES RESPONSABLE DE EPIDEMIAS ANUALES Y PANDEMIAS OCASIONALES QUE REPRESENTAN UN GRAN PROBLEMA EN LA SANIDAD PUBLICA SIENDO, ADEMAS, UNO DE LOS PATOGENOS QUE MAYOR MORTALIDAD HA CAUSADO A LO LARGO DE LA HISTORIA DE LA HUMANIDAD. A PESAR DE SU IMPORTANCIA COMO PATOGENO EL CONOCIMIENTO QUE SE TIENE SOBRE LA ESTRUCTURA GENERAL DEL VIRUS ES LIMITADO. CIERTAMENTE EXISTE UN CONOCIMIENTO DETALLADO SOBRE LA ESTRUCTURA DE ALGUNAS DE LAS PROTEINAS QUE LO COMPONEN PERO, DEBIDO A LA INTRINSECA VARIABILIDAD DE LOS VIRIONES (PLEOMORFISMO), LA INFORMACION DISPONIBLE DE LA ORGANIZACION GENERAL DEL VIRUS ES MUY LIMITADA. ESTA FALTA DE INFORMACION ES ESPECIALMENTE RELEVANTE EN LA ESTRUCTURA DEL CORAZON DEL VIRUS, LA NUCLEOCAPSIDA, DONDE EL VIRUS TIENE SU MATERIAL GENETICO. DICHA NUCLEOCAPSIDA ESTA COMPUESTA POR 8 SEGMENTOS DE RNA DE CADENA SENCILLA, ENCAPSIDADOS CADA UNO DE ELLOS POR MULTIPLES COPIAS DE UNA NUCLEOPROTEINA Y UNA COPIA DE LA POLIMERASA VIRAL. ESTOS 8 COMPLEJOS MACROMOLECULARES, CONOCIDOS COMO RIBONUCLEOPROTEINAS O RNPS, SON AUTENTICAS MAQUINAS MOLECULARES CAPACES DE REPLICARSE Y TRANSCRIBIR DE FORMA AUTONOMA DENTRO DE LA CELULA SIENDO, POR TANTO, CRUCIALES EN EL CICLO DE VIDA DEL VIRUS. OTRO COMPONENTE DE LA ESTRUCTURA INTERNA DEL VIRUS ES LA PROTEINA DE LA MATRIZ M1, QUE ACTUA A MODO DE CUBIERTA INTERNA DE LA MEMBRANA VIRAL SOBRE LA QUE INTERACCIONAN LAS RNPS Y QUE MANTIENE LA INTEGRIDAD DEL VIRION. TAMPOCO EXISTE MUCHA INFORMACION ESTRUCTURAL SOBRE ESTA PROTEINA, SOLO SE CONOCE POCO MAS DE LA MITAD DE SU ESTRUCTURA Y NO SE SABE NADA DE COMO ES SU DISTRIBUCION SOBRE LA MEMBRANA NI NADA A CERCA DE DE SU INTERACCION CON LAS RNPS. EN ESTE CONTEXTO, EL OBJETIVO FINAL DE ESTE PROYECTO ES LA REALIZACION DE UN ESTUDIO COMPLETO DE LA ESTRUCTURA DEL VIRUS DE LA GRIPE A MEDIANTE LA INTEGRACION DE TODAS LAS METODOLOGIAS DE DETERMINACION ESTRUCTURAL EMPLEADAS EN MICROSCOPIA ELECTRONICA DE TRANSMISION: CRISTALIZACION BIDIMENSIONAL DE PROTEINAS, PROCESAMIENTO DE PARTICULAS INDIVIDUALES Y TOMOGRAFIA ELECTRONICA. ADICIONALMENTE, LOS DATOS OBTENIDOS CON LAS TECNICAS MENCIONADAS SERAN COMPLEMENTADOS CON LAS ESTRUCTURAS ATOMICAS CONOCIDAS, PUDIENDOSE GENERAR ASI UN MAPA DETALLADO DE LA ORGANIZACION GENERAL DEL VIRUS. ES NECESARIO DESTACAR QUE EN ESTE ESTUDIO SE PRESTARA ESPECIAL ATENCION A LA ESTRUCTURA DE LA PROTEINA M1 Y A LA DE LAS RNPS NATIVAS, COMO SE HA DICHO LOS COMPONENTES FUNCIONALES MAS COMPLEJOS DEL VIRION, INTENTANDO ELUCIDAR LA ORGANIZACION GENERAL DE LA NUCLEOCAPSIDA Y COMO EL VIRUS CONSIGUE EMPAQUETAR UNA UNICA COPIA DE CADA UNO DE LOS 8 SEGMENTOS DE RNA DE SU GENOMA. ICROSCOPIA ELECTRONICA\VIRUS.\RIBONUCLEOPROTEINA\POLIMERASA\GRIPE\PARTICULAS INDIVIDUALES\TOMOGRAFIA ELECTRONICA\CRISTALES BIDIMENSIONALES\PROCESAMIENTO DE IMAGENES\CRIOMICROSCOPIA ELECTRONICA