Descripción del proyecto
EL VIRUS DE LA GRIPE, INFLUENZA A, ES UNA AMENAZA PARA LA SALUD PUBLICA MUNDIAL, ESTE VIRUS CAUSA EPIDEMIAS ESTACIONALES DE ENFERMEDADES RESPIRATORIAS Y, OCASIONALMENTE, PANDEMIAS CON UNA GRAN MORBILIDAD Y MORTALIDAD EN HUMANOS, LAS VACUNAS CONTRA EL VIRUS DE LA GRIPE A OFRECEN UNA PROTECCION LIMITADA DEBIDO A LAS ALTAS TASAS DE MUTACION DEL VIRUS, LAS CUALES PROVOCAN CAMBIOS CONTINUOS EN SU ANTIGENICIDAD, A NIVEL MOLECULAR, LA FUENTE DOMINANTE DE MUTACIONES ES LA ARN POLIMERASA VIRAL; EL COMPLEJO PROTEICO RESPONSABLE DE REPLICAR Y TRANSCRIBIR EL GENOMA VIRAL, DEBIDO A SU IMPORTANCIA EN LA VARIABILIDAD ANTIGENICA DEL VIRUS, LA ARN POLIMERASA ES UNA DIANA FUNDAMENTAL EN NUEVOS TRATAMIENTOS ANTIVIRALES,EL GENOMA DEL VIRUS INFLUENZA A ESTA FORMANDO POR SEGMENTOS INDIVIDUALES DENOMINADOS RIBONUCLEOPROTEINAS VIRALES O VRNP, CADA VRNP CONTIENE UNA COPIA DEL ARN GENOMICO DE CADENA SENCILLA, UNA COPIA DE LA ARN POLIMERASA Y VARIOS MONOMEROS DE NUCLEOPROTEINA, EN LOS ULTIMOS AÑOS SE HA AVANZADO EN LA COMPRENSION DE LAS PROPIEDADES BIOQUIMICAS Y ESTRUCTURALES DE LA POLIMERASA VIRAL Y DE LAS VRNPS, SIN EMBARGO, NO SE CONOCEN LOS MECANISMOS MOLECULARES FUNDAMENTALES QUE GOBIERNAN EL FUNCIONAMIENTO DE LA POLIMERASA VIRAL EN EL CONTEXTO DE LAS VRNPS,EL PRINCIPAL OBJETIVO DE LA PRESENTE PROPUESTA ES ABORDAR ESTE RETO Y CUANTIFICAR LOS PROCESOS MECANO-QUIMICOS Y DINAMICOS QUE GOBIERNAN LA OPERACION DE LA POLIMERASA VIRAL A NIVEL MOLECULAR DURANTE EL PROCESO DE TRANSCRIPCION DE LAS VRNPS, PARA ELLO, PROPONEMOS COMBINAR TECNICAS BIOQUIMICAS, DE BIOLOGIA MOLECULAR Y DE MANIPULACION DE MOLECULAS INDIVIDUALES, COMO LAS PINZAS OPTICAS, UTILIZANDO LAS PINZAS OPTICAS AISLAREMOS VRNPS INDIVIDUALES Y SEGUIREMOS LA EXTENSION DEL ARN MENSAJERO (MRNA) NACIENTE A MEDIDA QUE AVANZA LA TRANSCRIPCION, DE ESTA MANERA, SEGUIREMOS LA REACCION DE TRANSCRIPCION DIRECTAMENTE EN LA ESCALA DE TIEMPO EN LA QUE OCURRE, LO QUE REVELARA LA DINAMICA DEL PROCESO, ADEMAS, LA TECNICA DE PINZAS OPTICAS NOS PERMITIRA MEDIR Y APLICAR DE MANERA CONTROLADA FUERZAS MECANICAS (DEL ORDEN DE PICONEWTONS) EN EL MRNA NACIENTE, LA MANIPULACION MECANICA DEL MRNA REVELARA EL PAPEL DE SU CAPACIDAD DE FORMACION DE ESTRUCTURA SECUNDARIA EN LA DINAMICA DE TRANSCRIPCION, OTROS OBJETIVOS, SERAN DETERMINAR LAS PROPIEDADES MECANICAS DEL ARN VIRAL Y AUMENTAR LA RESOLUCION DEL SISTEMA DE PINZAS OPTICAS, AMBOS OBJETIVOS NOS PERMITIRAN UNA CARACTERIZACION MAS DETALLADA DE LA DINAMICA TRANSCRIPCIONAL, LA EXPERIENCIA DE NUESTRO LABORATORIO EN EL USO DE PINZAS OPTICAS PARA EL ESTUDIO DE MOTORES MOLECULARES INVOLUCRADOS EN EL METABOLISMO DE ACIDOS NUCLEICOS Y LA AMPLIA EXPERIENCIA DE NUESTROS COLABORADORES EN CAMPO DE LA VIROLOGIA, AVALAN EL LOGRO DE LOS OBJETIVOS PROPUESTOS,ESTA PROPUESTA DESCRIBE UN ENFOQUE NOVEDOSO PARA DETERMINAR LOS PROCESOS MECANICOS Y DINAMICOS QUE RIGEN EL FUNCIONAMIENTO DE LA POLIMERASA DEL VIRUS INFLUENZA A EN EL CONTEXTO DE LAS VRNPS, LOS RESULTADOS DE ESTE PROYECTO PODRIAN PERMITIR IDENTIFICAR DIANAS MOLECULARES ALTERNATIVAS EN EL DESARROLLO DE NUEVOS FARMACOS PARA EL TRATAMIENTO DE LA INFECCION POR EL VIRUS DE LA GRIPE, GRIPE\INFLUENZA A\MOLECULAS INDIVIDUALES\TRANSCRIPCION\PINZAS OPTICAS