Descripción del proyecto
LAS ENFERMEDADES NEURODEGENERATIVAS, COMO EL ALZHEIMER Y LA DEGENERACION DE LA MACULA ASOCIADA A LA EDAD (DMAE), SON UN GRUPO DE PATOLOGIAS QUE COMPARTEN RASGOS Y PATRONES MOLECULARES CARACTERIZADOS POR UNA ACUMULACION ANORMAL DE PROTEINAS ASI COMO POR UNA DEGENERACION Y MUERTE NEURONAL SELECTIVA, LA HIPOTESIS DE LA NEURODEGENERACION BASADA EN LA DISHOMEOSTASIS DE METALES ES PLAUSIBLE SEGUN ESTUDIOS ACTUALES RECOGIDOS EN BIBLIOGRAFIA, SIN EMBARGO, UNA LIMITACION IMPORTANTE EN ESTE TIPO DE ESTUDIOS ES LA CARENCIA DE UN ENFOQUE MULTIDISCIPLINAR,EL PRINCIPAL OBJETIVO DEL PROYECTO CONSISTE EN EL DESARROLLO Y APLICACION DE NUEVAS ESTRATEGIAS ANALITICAS PARA ESTUDIAR LA METALOSTASIS Y LA DISHOMEOSTASIS DE METALES EN PATOLOGIAS NEURODEGENERATIVAS ASOCIADAS A LA EDAD, CON ESTE OBJETIVO, SE PROPONE UN ABORDAJE MULTIDISCIPLINAR EN EL QUE PARTICIPARAN QUIMICOS ANALITICOS, BIOLOGOS Y MEDICOS DE LAS AREAS DE OFTALMOLOGIA Y NEUROLOGIA, EN ESTE PROYECTO SE INCLUYEN ESTUDIOS CON CULTIVOS CELULARES COMO MODELO IN VITRO DE ENVEJECIMIENTO, UN MODELO ANIMAL DE ENVEJECIMIENTO ACELERADO Y MUESTRAS HUMANAS DE PACIENTES DIAGNOSTICADOS CON DMAE, ALZHEIMER E ICTUS, SE LLEVARA A CABO LA SINTESIS DE NANOPARTICLAS (NPS) PARA ESTUDIOS IN VITRO E IN VIVO, SE EMPLEARAN METODOLOGIAS NO-INVASIVAS PARA EL ANALISIS DE MUESTRAS HUMANAS, Y SE APLICARAN TECNICAS DE ESPECTROMETRIA DE MASAS (MS) PARA LA DETERMINACION DE METALES, RELACIONES ISOTOPICAS Y PROTEINAS ASI COMO PARA EL BIOIMAGING CUANTITATIVO DE METALES Y PROTEINAS, ADEMAS, SE EMPLEARAN TECNICAS ELECTROQUIMICAS PARA EL DESARROLLO DE ANALIZADORES PORTATILES DE BAJO COSTE, PARA LOGRAR ESTE OBJETIVO GENERAL, SE PROPONEN LOS SIGUIENTES OBJETIVOS ESPECIFICOS:1, ESTUDIO DE LA DISHOMEOSTASIS DE METALES EMPLEANDO CULTIVOS CELULARES DE EPITELIO PIGMENTARIO RETINAL (RPE), SE LLEVARA A CABO EL DESARROLLO Y CARACTERIZACION DE MODELOS IN VITRO DE CELULAS DE RPE, LOS CULTIVOS PRIMARIOS DE RPE FETAL HUMANO EN UNA MONOCAPA 2D CONSTITUYEN UN MODELO IN VITRO UNICO YA QUE EN ELLOS SE OBSERVA LA FORMACION DE AGREGADOS PROTEICOS, ADEMAS, SE EVALUARA TAMBIEN UN METODO PARA CULTIVOS 3D (ESFEROIDES), PARA EL ANALISIS DE METALES Y PROTEINAS EN LAS CELULAS Y EN LA MATRIZ EXTRACELULAR DE LOS MODELOS IN VITRO SE EMPLEARAN NUEVAS ESTRATEGIAS ANALITICAS DIRIGIDAS A METODOS DE PURIFICACION DE EXOSOMAS, SINTESIS DE NPS, Y METODOLOGIAS POR ABLACION LASER (LA) ACOPLADO A ICP-MS PARA EL IMAGING CUANTITATIVO DE METALES Y PROTEINAS,2, ESTUDIO DE LA DISHOMEOSTASIS DE METALES Y SU PAPEL EN LA FORMACION DE AGREGADOS PROTEICOS EN EL OJO Y EL CEREBRO EMPLEANDO UN MODELO ANIMAL DE ENVEJECIMIENTO, EL RATON APP/PS1 ES UN MODELO ANIMAL DE ENVEJECIMIENTO ACELERADO MUY UTIL PARA EL ESTUDIO DE ENFERMEDADES NEURODEGENERATIVAS ASOCIADAS A LA EDAD EN EL CUAL SE PRODUCEN AGREGADOS DE PROTEINAS, ESTE OBJETIVO PERMITIRA EVALUAR LOS EFECTOS DE LA DESREGULACION DE METALES EN LA FORMACION DE DICHOS AGREGADOS, SUS CONSECUENCIAS PATOFISIOLOGICAS Y LOS EFECTOS DE LA SUPLEMENTACION CON ZN EN LA METALLOSTASIS Y APARICION DE PATOLOGIAS,3, ANALISIS DE MUESTRAS BIOLOGICAS NO-INVASIVAS DE DONANTES HUMANOS PARA LA BUSQUEDA DE BIOMARCADORES EN PACIENTES DE DMAE, ALZHEIMER E ICTUS, EN LA INVESTIGACION DE FLUIDOS NO-INVASIVOS SE ESTUDIARAN LAS CONCENTRACIONES DE METALES, ISOTOPOS Y PROTEINAS EN LAGRIMAS Y EXUDADO NASAL DE PACIENTES Y CONTROLES, ADEMAS, EN PACIENTES CON DMAE TAMBIEN SE ANALIZARAN COMPUESTOS ORGANICOS VOLATILES EN EL AIRE EXHALADO, DEGENERACION DE LA MACULA ASOCIADA A LA \ALZHEIMER\NANOCLUSTERES METALICOS\ESPECTROMETRIA DE MASAS\ABLACION LASER\IMAGING DE PROTEINAS\RELACIONES ISOTOPICAS\CELULAS IN VITRO\MODELO ANIMAL\MUESTRAS NO INVASIVAS