Descripción del proyecto
A PESAR DEL ELEVADO NUMERO DE ESPECIES INCLUIDAS EN EL GENERO LACTOBACILLUS, SOLO UNAS POCAS, ENTRE ELLAS LACTOBACILLUS PLANTARUM, INCLUYEN CEPAS AISLADAS TANTO DE ALIMENTOS FERMENTADOS COMO DEL TGI HUMANO, L, PLANTARUM ES UNA ESPECIE MUY VERSATIL QUE SE ENCUENTRA EN UNA GRAN VARIEDAD DE NICHOS ECOLOGICOS ESTANDO POR ELLO ADAPTADA A LA UTILIZACION DE UN ELEVADO NUMERO DE CARBOHIDRATOS DIFERENTES, EN ESTE CONTEXTO, EL PRESENTE PROYECTO PRETENDE CONOCER LAS ACTIVIDADES MODIFICADORAS DE CARBOHIDRATOS PRESENTES EN L, PLANTARUM WCFS1, CEPA PROBIOTICA AISLADA DE SALIVA HUMANA, Y REFERENCIA A NIVEL DE ESPECIE, QUE TIENE UNO DE LOS GENOMAS MAS GRANDES ENTRE LAS BACTERIAS LACTICAS, POSEYENDO POR TANTO UN ALTO POTENCIAL METABOLICO SOBRE CARBOHIDRATOS, A PESAR DE QUE EN ESTA CEPA SE HAN ANOTADO 91 GENES QUE PUEDEN CODIFICAR ENZIMAS IMPLICADAS EN LA MODIFICACION DE CARBOHIDRATOS, SIN EMBARGO, SOLO SE HA ESTUDIADO SU ACTIVIDAD GLICOSIDASICA SOBRE UN REDUCIDO NUMERO DE SUSTRATOS Y SOLO 8 DE ESTAS ENZIMAS SE HA CARACTERIZADO BIOQUIMICAMENTE, EN EL PROYECTO SOLICITADO SE PRETENDE REALIZAR UN ESTUDIO AMPLIO Y EXHAUSTIVO DE LAS ACTIVIDADES ENZIMATICAS IMPLICADAS EN LA HIDROLISIS, BIOSINTESIS O MODIFICACION DE CARBOHIDRATOS Y GLICOCONJUGADOS PRESENTES EN L, PLANTARUM WCFS1, CON ESPECIAL ATENCION EN ACTIVIDADES GLICOSIDASAS, GLICANSACARASAS Y GLICOSIDO-FOSFORILASAS, CICLODEXTRINA-TRANSFERASAS, TIOGLUCOSIDASAS Y BETA-GLICOSIDASAS, PARA LA SINTESIS DE COMPUESTOS BIOACTIVOS CON INTERES ALIMENTARIO, PARA ELLO SE ESTUDIARAN LAS ACTIVIDADES GLICOSIDASICAS PRESENTES EN CULTIVOS Y EXTRACTOS PROTEICOS DE ESTA CEPA, Y SE PRODUCIRAN Y CARACTERIZARAN BIOQUIMICAMENTE PROTEINAS ANOTADAS COMO POSIBLES GLICOSIDASAS, LA OBTENCION DE MUTANTES EN ESTOS GENES PERMITIRA ASIGNAR UNA DETERMINADA ACTIVIDAD A LA PRESENCIA DE UNA DETERMINADA PROTEINA, ESTUDIOS TRANSCRIPTOMICOS PERMITIRAN CONOCER LA RELEVANCIA DE ESTAS ENZIMAS EN PRESENCIA DE DISTINTOS CARBOHIDRATOS, LA INFORMACION OBTENIDA EN ESTA CEPA PERMITIRA CONOCER EL POTENCIAL GLICOSIDASICO DE OTRAS CEPAS DE L, PLANTARUM Y DE OTRAS BACTERIAS LACTICAS,AL MISMO TIEMPO SE LLEVARA A CABO LA PRODUCCION HETEROLOGA DE LAS ENZIMAS MODIFICADORAS DE CARBOHIDRATOS SELECCIONADAS QUE PRESENTAN INTERES TECNOLOGICO, EN ESTAS ENZIMAS SE DETERMINARAN SUS CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS Y PARAMETROS CINETICOS, ESTUDIOS CRISTALOGRAFICOS PERMITIRAN ELUCIDAR SU MECANISMO CATALITICO, Y EN CASO DE SER NECESARIO, SE OBTENDRAN ENZIMAS MEJORADAS (GENETICA O QUIMICAMENTE) CON CARACTERISTICAS TECNOLOGICAS MAS ADECUADAS, EL DESARROLLO DEL PROYECTO CONDUCIRA TANTO A LA GENERACION DE CONOCIMIENTO CIENTIFICO NOVEDOSO SOBRE LA CAPACIDAD GLICOSIDASICA DE BACTERIAS LACTICAS, COMO A LA IDENTIFICACION Y MEJORA DE NUEVAS ENZIMAS CON INTERES PARA EL DISEÑO EFICAZ DE NUEVOS COMPUESTOS CON PROPIEDADES BENEFICIOSAS PARA LA SALUD HUMANA, LACTOBACILLUS PLANTARUM WCFS1\GLICOSIDASAS\SÍNTESIS ENZIMÁTICA\EDULCORANTES\CARBOHIDRATOS NO-DIGERIBLES