Descripción del proyecto
TALINA ES UNA PROTEINA CLAVE EN LOS PROCESOS CELULARES DE SEÑALIZACION, ADHESION, Y MIGRACION. EN UN EXTREMO, TALINA TIENE UN PEQUEÑO DOMINIO GLOBULAR QUE SE UNE A INTEGRINAS Y EN EL OTRO EXTREMO, UN FRAGMENTO CON SITIOS DE RECONOCIMIENTO PARA NUMEROSOS LIGANDOS. DEFICIENCIAS EN LA REGULACION DE TALINA Y SUS LIGANDOS CAUSA EL DESARROLLO DE CANCER EN HUMANOS. NOTABLEMENTE, LOS ESTIMULOS MECANICOS SON CAPACES DE ALTERAR LA FORMA EN QUE TALIN INTERACCIONA CON OTRAS MOLECULAS. ESTE PROYECTO SE PROPONE USAR TECNICAS BIOFISICAS A NIVEL DE MOLECULA Y CELULA INDIVIDUAL PARA DETERMINAR EL MECANISMO PRECISO PARA LA INTERACCION DE TALINA Y SUS LIGANDOS BAJO ESTIMULACION MECANICA. PRIMERO, EL PROYECTO SE ENFOCARA EN ELUCIDAR EL MECANISMO MOLECULAR PARA LA INTERACCION DE TALINA E INTEGRINAS CON EL OBJETIVO DE DISCERNIR: (I) COMO TALINA SE UNE Y ACTIVA INTEGRINA BAJO ESTIMULACION MECANICA, Y (II) COMO LA FUERZA PUEDE INDUCIR QUE LA TALINA SE DISOCIE DE INTEGRINA, DEJANDO ESTA ULTIMA INACTIVA. SEGUNDO, NOSOTROS USAREMOS LINEAS CELULARES NORMALES PARA EXPLORAR LAS RESPUESTAS CELULARES MEDIADAS POR TALINA Y LINEAS CELULARES CANCERIGENAS PARA ESTUDIAR COMO ESTAS RESPUESTAS ESTAN MODIFICADAS O PERDIDAS EN CANCER. FINALMENTE, ESTE PROYECTO SE PROPONE (I) DETERMINAR EL MECANISMO MOLECULAR PARA LA INTERACCION DE TALINA CON OTROS LIGANDOS BAJO ESTIMULACION MECANICA CON PARTICULAR ENFASIS EN LA KINASA DE ADHESION FOCAL (EN INGLES, FAK) Y (II) ELUCIDAR LA INFLUENCIA DE LA APLICACION DE FUERZA EN LAS REACCIONES ENZIMATICAS CON FAK Y TALINA. PARA ESTOS ESTUDIOS, SE USARAN UNAS PINZAS MAGNETICAS PARA ESTIRAR MOLECULAS INDIVIDUALES Y MICROSCOPIA TIRF O FRET PARA OBSERVAR LA UNION DE LIGANDOS FLUORESCENTES A LAS PROTEINAS BAJO ESTUDIO. PARA LOS ENSAYOS CELULARES, PINZAS MAGNETICAS SERAN USADAS PARA OBSERVAR LAS RESPUESTAS DE LAS CELULAS A FUERZAS EXTERNAS Y UN METODO DE PILARS ELASTICOS, PARA ESTUDIAR LAS FUERZAS QUE LAS CELULAS APLICAN A SUS SUBSTRATOS. UERZA\VIAS DE SEÑALIZACION\MECANOTRADUCCION\MECANOBIOLOGIA\CANCER\VINCULIN\INTEGRIN\TALIN