EL PAPEL DE LOS LINFOCITOS T REGULADORES (TREG) EN EL SINDROME REPRODUCTIVO Y RE...
EL PAPEL DE LOS LINFOCITOS T REGULADORES (TREG) EN EL SINDROME REPRODUCTIVO Y RESPIRATORIO PORCINO: CORRELACION CON LA EXPRESION DE CITOQUINAS INMUNMODULADORAS
EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES EVALUAR EL PAPEL DE LOS LINFOCITOS T REGULADORES, TANTO A NIVEL CIRCULATORIO (CELULAS MONONUCLEARES DE SANGRE PERIFERICA, PBMCS) COMO A NIVEL DE ORGANOS LINFOIDES, EN LA PATOGENIA DEL SINDROME REPRO...
EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES EVALUAR EL PAPEL DE LOS LINFOCITOS T REGULADORES, TANTO A NIVEL CIRCULATORIO (CELULAS MONONUCLEARES DE SANGRE PERIFERICA, PBMCS) COMO A NIVEL DE ORGANOS LINFOIDES, EN LA PATOGENIA DEL SINDROME REPRODUCTIVO Y RESPIRATORIO PORCINO (PRRS), PARA ELLO ANALIZAREMOS LOS CAMBIOS CUANTITATIVOS Y CUALITATIVOS EN LA EXPRESION DE MARCADORES ESPECIFICOS PARA ESTA SUBPOBLACION DE LINFOCITOS T Y SU CORRELACION CON LA EXPRESION DE CITOQUINAS INMUNOMODULADORAS, PRINCIPALMENTE IL-10 Y TGF-β,PARA ALCANZAR NUESTRO OBJETIVO, SE REALIZARA UN ENSAYO PRELIMINAR IN VITRO EN EL QUE SE ESTUDIARAN LOS CAMBIOS ORIGINADOS EN LOS LINFOCITOS T REGULADORES TRAS LA INFECCION DE PBMCS CON EL VIRUS DEL PRRS, Y COMO ESTOS CAMBIOS INFLUYEN EN LA MODULACION DE LA RESPUESTA INMUNE, MAS CONCRETAMENTE A TRAVES DE LA EXPRESION DE IL-10 Y TGF-β, EN DICHO ESTUDIO, ADICIONALMENTE, SE BLOQUEARA, MEDIANTE EL USO DE ANTICUERPOS ESPECIFICOS, TANTO LA ACTIVIDAD DE LINFOCITOS T REGULADORES COMO DE IL-10, PARA ESTUDIAR SU REPERCUSION SOBRE UNA RESPUESTA DE BASE CELULAR EFICIENTE FRENTE AL VIRUS DEL PRRS, POSTERIORMENTE, SE LLEVARA A CABO UN ESTUDIO IN VIVO, EN EL QUE SE OBSERVARA EN QUE MEDIDA LOS RESULTADOS OBTENIDOS IN VITRO SON APLICABLES IN VIVO, PARA ELLO, CERDOS LIBRES DEL VIRUS DEL PRRS SE INOCULARAN CON EL VIRUS DEL PRRS, SE SACRIFICARAN DE FORMA SECUENCIAL ENTRE EL DIA CERO Y VEINTIOCHO POST-INOCULACION, RECOGIENDOSE MUESTRAS DE SANGRE Y DE DIFERENTES TEJIDOS, LAS MUESTRAS DE LOS TEJIDOS SE UTILIZARAN PARA LA EVALUACION DE LOS CAMBIOS CUANTITATIVOS DE LAS SUBPOBLACIONES DE LINFOCITOS T MEDIANTE CITOMETRIA DE FLUJO, Y ADICIONALMENTE SERAN FIJADAS EN FORMOL AL 10%, SOLUCION DE BOUIN Y FIJADOR DE SALES DE ZINC PARA EL ESTUDIO HISTOPATOLOGICO E INMUNOHISTOQUIMICO (TECNICAS DEL COMPLEJO AVIDINA-BIOTINA-PEROXIDASA Y DE HIBRIDACION ¿IN SITU¿), ASI COMO PARA LA DETERMINACION DE LOS FENOMENOS DE APOPTOSIS (TUNEL, CASPASAS), A PARTIR DE MUESTRAS DE SUERO SE DETERMINARAN LA VIREMIA, LOS NIVELES DE ANTICUERPOS FRENTE AL VIRUS DEL PRRS, Y LA CONCENTRACION SERICA DE CITOQUINAS Y DE PROTEINAS DE FASE AGUDA, ASIMISMO, SE CUANTIFICARA LA EXPRESION GENICA DEL VIRUS DEL PRRS Y DE DIFERENTES CITOQUINAS MEDIANTE QRT-PCR A TIEMPO REAL, VIRUS\PORCINO\PRRS\LINFOCITOS T REGULADORES\RESPUESTA INMUNEver más
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