Descripción del proyecto
LOS VIRUS SON ENTIDADES FASCINANTES QUE PUEBLAN TODA NUESTRA BIOSFERA INTERACTUANDO Y MODULANDO EL CENSO DE HUESPEDES, INFECTAN ORGANISMOS PERTENECIENTES A LOS TRES DOMINIOS DE LA VIDA: BACTERIA, ARCHAEA Y EUKARYA, EN ESTE ULTIMO CASO, LOS VIRUS TAMBIEN PUEDEN SER PATOGENOS MORTALES PARA LOS SERES HUMANOS Y ANIMALES, CON EL FIN DE INFECTAR Y REPLICARSE, TODOS LOS VIRUS COMPARTEN ETAPAS SECUENCIALES SIMILARES EN SU CICLO DE VIDA VIRAL: 1-ADSORCION, 2-ENTRADA, 3-SINTESIS, 4-ENSAMBLAJE Y 5- LIBERACION, NUESTRO GRUPO ESTA PARTICULARMENTE INTERESADO EN LAS ETAPAS 1, 2 Y 4, EL DESCIFRADO DE ESTOS MECANISMOS NOS OTORGA, EN PRINCIPIO, LA POSIBILIDAD DE INTERFERIR CON LA ENTRADA DEL VIRUS EN LA CELULA Y SU ENSAMBLAJE, CON ESTE FIN, PROPONEMOS COMBINAR TECNICAS ESTRUCTURALES Y BIOFISICAS TALES COMO LA MICROSCOPIA ELECTRONICA, CRISTALOGRAFIA DE RAYOS X, DICROISMO CIRCULAR Y MALS, LAS CUALES SERAN COMPLEMENTADAS CON ESTUDIOS FUNCIONALES GRACIAS TAMBIEN A LA RED DE COLABORADORES, CENTRAMOS NUESTRO INTERES EN VIRUS QUE POSEEN UNA MEMBRANA LIPIDICA, YA SEA COMO CUBIERTA O COMO VESICULA INTERNA, ESTE TIPO DE VIRUS REPRESENTA SISTEMAS UNICOS PARA LA COMPRENSION DEL ROL DE LAS INTERACCIONES PROTEINA-MEMBRANA EN EL CONTEXTO DE PROCESOS CELULARES Y VIRALES INFECTIVOS,EN CUANTO A LOS VIRUS CON ENVOLTURA NUESTROS OBJETIVOS SERAN:(A1) EXTENDER NUESTRO ESTUDIO INTRACELLULAR DEL BUDDING DE HCV EN HEPATOCITOS CON PROTEINAS NO ESTRUCTURALES P7 Y NS2 POR TOMOGRAFIA ELECTRONICA 3D UTILIZANDO TECNICAS DE PREPARACION CELULARES MODERNAS;(A2) DETERMINAR LAS ESTRUCTURAS 3D POR CRISTALOGRAFIA DE RAYOS X DE LA NUCLEOPROTEINA MUTANTE (MUT-N) DE RIFT VALLEY FEVER VIRUS Y COMPLEJOS DE N CON MABS PARA LA MEJORA DE LAS VACUNAS ATENUADAS EXISTENTES; IGUALMENTE NUESTRO OBJETIVO ES RESOLVER LAS PROTEINAS ESTRUCTURALES DEL VIRUS DE SCHMALLENBERG Y DESARROLLAR ANTICUERPOS ESPECIFICOS Y HERRAMIENTAS DE DIAGNOSTICO MOLECULAR,EN CUANTO A LOS VIRUS QUE CONTIENEN VESICULA PRETENDEMOS:(B3) DETERMINAR POR CRYO-EM DE ALTA RESOLUCION (MAS ALTA DE 5 A) LAS ESTRUCTURAS 3D DE DOS VIRUS DE ARCHAEA Y RESOLVER SUS MECANISMOS DE ENSAMBLAJE, YA QUE ESTOS VIRUS AUN NO EXPLORADOS UTILIZAN DOS PROTEINAS BETA-BARREL VERTICALES INDIVIDUALES PARA EL ENSAMBLAJE DE LA CAPSIDE, ASIMISMO, VAMOS A CARACTERIZAR LAS PROPIEDADES FISICAS DE PRD1 (BACTERIOFAGO CON VESICULA INTERNA) MEDIANTE MICROSCOPIA DE FUERZA ATOMICA,(B4) CARACTERIZAR POR CRYO-EM LA ESTRUCTURA 3D DEL TUBO PROTEO-LIPIDICO UTILIZADO POR PRD1 PARA TALADRAR AGUJEROS EN LA PARED CELULAR BACTERIANA GRAM (-) Y TRANSPORTAR EL ADN VIRAL PARA EL INICIO DE LA INFECCION,ES IMPORTANTE DESTACAR QUE, A TRAVES DE NUESTROS ESTUDIOS INTEGRALES ESTRUCTURA-FUNCION, VAMOS A GENERAR NUEVOS CONOCIMIENTOS Y HERRAMIENTAS EN AREAS CLAVE DE LA PATOGENESIS VIRAL, CON ESPECIAL ENFASIS EN LOS ESTUDIOS DE VIRUS HUMANOS Y ANIMALES, CON EL ESTUDIO DE LOS VIRUS DE ARCHAEA Y FAGOS CON MEMBRANAS LIPIDICAS VAMOS A PROPORCIONAR LAS BASES MOLECULARES DE LOS PROCESOS DE AUTOENSAMBLAJE DE NUEVOS VIRUS, ASI COMO DE LA ESTRUCTURA DEL TUBO PROTEO-LIPIDICO DEL PRD1 NECESARIO PARA LA INFECCION BACTERIANA,LA INFORMACION GENERADA SERVIRA EN VARIAS AREAS DE INTERES COMO LA PROSECUCION DE NUEVAS APLICACIONES EN EL CAMPO DE LA VACUNOLOGIA, DIAGNOSTICOS Y POSIBLEMENTE TAMBIEN EN LA BIOTECNOLOGIA Y LUCHA DE LAS INFECCIONES MICROBIANAS, VIRUS\ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL\CICLO VIRAL\ENSAMBLAJE\INTERACCIÓN CÉLULA\COMPLEJOS PROTEICOS\CRISTALOGRAFÍA DE RAYOS X\CRYO-EM\COMBINACIÓN DE MÉTODOS