Descripción del proyecto
HAEMOPHILUS PARASUIS ES EL AGENTE ETIOLOGICO DE LA ENFERMEDAD DE GLASSER, UN PROCESO EMERGENTE EN LAS MODERNAS EXPLOTACIONES INTENSIVAS PORCINAS, ESPECIALMENTE EN ASOCIACION CON OTRAS ENFERMEDADES BACTERIANAS Y/O VIRICAS, EL CONOCIMIENTO DE LA RESPUESTA INMUNE SIGUE SIENDO ESCASO Y RESPECTO A SU CONTROL, SOLO SE DISPONE DE BACTERINAS CUYA EFICACIA SE LIMITA A LOS SEROTIPOS HOMOLOGOS, LO QUE NO RESULTA DE GRAN UTILIDAD, TODA VEZ QUE EN LA ACTUALIDAD SE CONOCEN 15 SEROTIPOS DE VIRULENCIA MUY DIFERENTE Y CON FRECUENCIA SE AISLA MAS DE UNO DE ELLOS DE UNA EXPLOTACION E INCLUSO DE UN ANIMAL CONCRETO, COMO CONTINUACION DE PROYECTOS ANTERIORES, SE PRETENDE PROFUNDIZAR EN EL ESTUDIO DE DOS PROTEINAS DE UNION A TRANSFERRINA (TBPS), LA TBPA Y LA TBPB, COMO CANDIDATAS A LA ELABORACION DE VACUNAS EFICACES FRENTE A LOS DIFERENTES SEROTIPOS DE H, PARASUIS E INCLUSO FRENTE A OTROS PATOGENOS PROXIMOS, TAMBIEN INCLUIDOS EN LA FAMILIA PASTEURELLACEAE, CONSIDERANDO CUALIDADES TALES COMO EL IMPORTANTE GRADO DE CONSERVACION DE LA TBPA DESCRITO EN TODA ESTA FAMILIA O LA BUENA CAPACIDAD INMUNOGENA DE LA TBPB, YA DEMOSTRADA EN OTRAS ESPECIES GRAM NEGATIVAS, UNA VEZ OBTENIDAS AMBAS PROTEINAS CONVENIENTEMENTE PURIFICADAS, SE VERIFICARA SU INMUNOGENICIDAD EN CONEJOS, COMO PASO PREVIO A LA EXPERIMENTACION EN EL HOSPEDADOR NATURAL, SE UTILIZARAN CERDOS PRIVADOS DE CALOSTRO Y SE PROBARAN AMBAS PROTEINAS MEZCLADAS Y POR SEPARADO, POTENCIADAS MEDIANTE LA COMBINACION CON ADYUVANTES MODERNOS, DEL TIPO DEL ¿MONTANIDE IMS 2215 VG PR¿, IDONEO EN LA ESTABILIZACION Y CONSERVACION DE ESTAS PROTEINAS RECOMBINANTES, SE VALORARA LA EFICACIA EN COMPARACION CON GRUPOS CONTROL, SIN VACUNAR, UNA VEZ LLEVADO A CABO EL DESAFIO CON VARIOS SEROTIPOS DE VIRULENCIA PROBADA, EN TERMINOS DE MORTALIDAD, SINTOMAS Y LESIONES, ASI COMO AISLAMIENTO DE LA BACTERIA A PARTIR DE DIFERENTES LOCALIZACIONES ORGANICAS, SIMULTANEAMENTE, SE ESTUDIARA EXHAUSTIVAMENTE LA RESPUESTA INNATA (FAGOCITOSIS, MEDICION DE PROTEINAS DE LA FASE AGUDA, COMO PIG-MAP, HAPTOGLOBINA, PROTEINA C REACTIVA, APOLIPOPROTEINA A-I), LA RESPUESTA INMUNE HUMORAL (CLASES Y SUBCLASES DE INMUNOGLOBULINAS Y SUS TITULOS, AVIDEZ Y AFINIDAD) Y LA DE BASE CELULAR (CARACTERIZACION DE LAS SUBPOBLACIONES LINFOCITARIAS, MEDICION DE LA PROLIFERACION DE LOS LINFOCITOS T Y DE LA CITOTOXICIDAD DEPENDIENTE DE LOS LINFOCITOS T, MEDICION DE CITOQUINAS TALES COMO LAS INTERLEUCINAS 1, 4, 6, 8, 10, TNF-ALFA E IFN-GAMMA), ASIMISMO, SE ABORDARAN ESTUDIOS DE INMUNIDAD DE MUCOSAS, COMO LA VALORACION DE IGA EN LAVADOS BRONCOALVEOLARES Y EN SANGRE PERIFERICA, CARACTERIZACION FENOTIPICA DE LOS MACROFAGOS OBTENIDOS EN ESOS LAVADOS Y EXPRESION DE CITOQUINAS POR ELLOS PRODUCIDAS, Haemophilus parasuis\enfermedad de Glässer\porcino\TbpA\TbpB\vacunación