Descripción del proyecto
LA DEGENERACION MACULAR ASOCIADA A LA EDAD (DMAE) ES UNA ENFERMEDAD OCULAR LIGADA AL ENVEJECIMIENTO Y LA PRINCIPAL CAUSA DE CEGUERA IRREVERSIBLE ENTRE PERSONAS MAYORES DE 65 AÑOS, ACTUALMENTE, LOS TRATAMIENTOS EXISTENTES PARA PALIAR ESTA PATOLOGIA NO SON SUFICIENTEMENTE EFECTIVOS, LA PRINCIPAL CARACTERISTICA CLINICA DE LA DMAE ES LA PRESENCIA DE DEPOSITOS EXTRACELULARES, DENOMINADOS DRUSAS, EN LA REGION MACULAR DE LA RETINA, DEBIDO A UNA DEGENERACION DE LAS CELULAS DEL EPITELIO PIGMENTARIO RETINIANO (RPE), LA MODULACION DE LA FORMACION DE ESTOS DEPOSITOS AYUDARIA A DISMINUIR O DETENER LA PROGRESION DE LA DMAE,EN ESTE PROYECTO SE PRETENDE DESCIFRAR SI EL SISTEMA ANTIOXIDANTE ZINC-METALOTIONEINA (ZN-MT) PUEDE CONSIDERARSE UNA DIANA TERAPEUTICA EFICIENTE EN EL TRATAMIENTO DE LA DMAE, ESTUDIOS PREVIOS SUGIEREN QUE EXISTE UN DESEQUILIBRIO REDOX ZN-MT DURANTE EL INICIO Y LA PROGRESION DE LA DMAE QUE INDUCE DAÑO CELULAR EN EL RPE A TRAVES DE UNA CADENA DE EVENTOS QUE INCLUYEN LA LIBERACION INTRACELULAR Y CITOTOXICA DE ZINC Y COBRE, LA SUBSECUENTE INDUCCION DE LA LIBERACION DE CALCIO, Y LA OLIGOMERIZACION EXTRACELULAR INCONTROLADA DE PROTEINAS CFH, SOD, APP Y S100A6 (ENTRE OTRAS), LO QUE DESENCADENA UNA INFLAMACION CRONICA, ULTERIOR MUERTE CELULAR Y LA FORMACION DE LAS DRUSAS, POR TANTO, LA FORMACION DE DRUSAS EN LA DMAE Y LA PROGRESION DEL DAÑO CELULAR DEL RPE PODRIA DETENERSE SI SE MODULA LA HOMEOSTASIS CITOSOLICA DEL ZINC A TRAVES DE LA REGULACION DE LAS MTS, CON OBJETO DE EVALUAR LOS MECANISMOS MOLECULARES IMPLICADOS EN LA FORMACION DE LAS DRUSAS EN DMAE SE DESARROLLARAN METODOLOGIAS ANALITICAS BASADAS EN ESPECTROMETRIA DE MASAS PARA SU APLICACION EN EL ESTUDIO DEL SISTEMA ZN-MT EN MUESTRAS DE SUERO Y HUMOR VITREO DE PACIENTES CON DMAE, ASI COMO EN UN MODELO IN VITRO DE RPE CAPAZ DE PRODUCIR DRUSAS,POR UN LADO, PARA ESTUDIAR SI EXISTE UNA ALTERACION SISTEMICA Y LOCAL EN EL SISTEMA PROPUESTO SE LLEVARA A CABO LA DETERMINACION DEL CONTENIDO TOTAL DE CA, CU Y ZN EN MUESTRAS DE SUERO Y HUMOR VITREO DE PACIENTES CON DMAE Y SUJETOS CONTROL EMPLEANDO PLASMA DE ACOPLAMIENTO INDUCTIVO CON DETECCION POR ESPECTROMETRIA DE MASAS (ICP-MS), ADEMAS, RECIENTEMENTE SE HA DEMOSTRADO EL POTENCIAL QUE TIENE LA MEDIDA DE RELACIONES ISOTOPICAS DE ELEMENTOS TRAZA CON OBJETO DE CONSEGUIR UN MAYOR CONOCIMIENTO DEL METABOLISMO HUMANO Y EN LA BUSQUEDA DE BIOMARCADORES DE ENFERMEDADES, POR LO QUE SE LLEVARAN A CABO MEDIDAS DE RELACIONES ISOTOPICAS DE CA, CU Y ZN EN DICHAS MUESTRAS MEDIANTE ICP-MS DE TIPO MULTICOLECTOR, POR OTRO LADO, PARA EVALUAR LA EXISTENCIA DE UNA RELACION ENTRE LA ALTERACION DEL SISTEMA ZN-MT Y LA GENERACION DE DRUSAS, EN EL MODELO IN VITRO DE RPE Y LOS TEJIDOS OCULARES DE DONATES POSTMORTEM, SE REQUIERE DE HERRAMIENTAS ANALITICAS CON ALTA SENSIBILIDAD Y QUE PERMITAN CONOCER DE MANERA SIMULTANEA LA DISTRIBUCION (BIOIMAGING) DE METALES Y PROTEINAS, EN NUESTRO CASO SE ESTUDIARAN LOS METALES INVOLUCRADOS EN EL PROCESO DEGENERATIVO (ZN, CA Y CU) ASI COMO LAS PROTEINAS MT, CFH, SOD, APP Y S100A6, EN ESTE SENTIDO, LA TECNICA DE ABLACION LASER (LA) ACOPLADA A ICP-MS HA DEMOSTRADO UN GRAN POTENCIAL PARA ESTUDIOS DE BIOIMAGING, EN EL PROYECTO SE PROPONE EL EMPLEO DE ANTICUERPOS CON MARCAS METALICAS (NANOCLUSTERES METALICOS DE AU, PT, AG, PD Y BI) EN COMBINACION CON LA-ICP-MS PARA LA DETECCION SIMULTANEA DE LAS CINCO PROTEINAS DIRECTAMENTE SOBRE SECCIONES DE TEJIDOS OCULARES Y CULTIVOS CELULARES, ICP-MS\ABLACIÓN LÁSER\BIOIMAGING\RELACIONES ISOTÓPICAS\NANOCLÚSTERES METÁLICOS FLUORESCENTES\MODELO IN-VITRO\DEGENERACIÓN MACULAR ASOCIADA A LA EDAD\DRUSAS\ANÁLISIS QUÍMICO CUANTITATIVO