BIOFISICA DE MOLECULA UNICA PARA EL ESTUDIO DE MAQUINAS PROTEICAS DE REPARACION...
LA INTEGRIDAD DEL ADN DE NUESTRAS CELULAS ES FUNDAMENTAL PARA SU CORRECTO FUNCIONAMIENTO Y ESTA CONSTANTEMENTE BAJO AMENAZA POR MULTIPLES FACTORES TANTO EXOGENOS COMO ENDOGENOS QUE FRECUENTEMENTE DAN LUGAR A UN CORTE EN LA DOBLE H...
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Descripción del proyecto
LA INTEGRIDAD DEL ADN DE NUESTRAS CELULAS ES FUNDAMENTAL PARA SU CORRECTO FUNCIONAMIENTO Y ESTA CONSTANTEMENTE BAJO AMENAZA POR MULTIPLES FACTORES TANTO EXOGENOS COMO ENDOGENOS QUE FRECUENTEMENTE DAN LUGAR A UN CORTE EN LA DOBLE HEBRA DEL ADN (DSBS), LA NO REPARACION DE ESTE DAÑO PUEDE DAR LUGAR A INESTABILIDAD GENOMICA Y PERDIDA DE INTEGRIDAD ESTRUCTURAL EN LOS CROMOSOMAS, ADEMAS, ESTOS PROBLEMAS SE ASOCIAN A DEFECTOS EN EL DESARROLLO, EN EL SISTEMA INMUNE, Y EN PREDISPOSICION A DESARROLLAR CANCER, AFORTUNADAMENTE, LAS CELULAS POSEEN MECANISMOS ROBUSTOS DE REPARACION DEL ADN DAÑADO, UNO DE ESTOS MECANISMOS ES LA RECOMBINACION HOMOLOGA DONDE LA CROMATIDA HERMANA SE USA COMO MOLDE PARA REPARAR EL ADN DAÑADO, LA MAYORIA DE LAS PROTEINAS RESPONSABLES DE ESTA TAREA EN CELULAS EUCARIOTAS SE HAN IDENTIFICADO RECIENTEMENTE, SIN EMBARGO, AUN SE DESCONOCE COMO ESTAS PROTEINAS GESTIONAN LOS DIFERENTES TIPOS DE CORTE DEL ADN QUE SE PRODUCEN IN VIVO, ESTE PROYECTO DESARROLLARA Y EMPLEARA TECNOLOGIA DE MOLECULA UNICA PARA COMPRENDER COMO LAS PROTEINAS DE RESECCION HUMANAS TRABAJAN PARA RECONOCER E INICIAR LA REPARACION DE DIFERENTES ESTRUCTURAS DE CORTE DE ADN, LAS TECNICAS DE MANIPULACION E IMAGEN DE MOLECULA UNICA PUEDEN PROPORCIONAR INFORMACION SOBRE EL FUNCIONAMIENTO DE LAS MAQUINAS MOLECULARES INVOLUCRADAS EN ESTOS PROCESOS QUE ES INACCESIBLE A LAS TECNICAS BIOQUIMICAS CONVENCIONALES, LOS RESULTADOS DE ESTA INVESTIGACION TENDRAN IMPLICACIONES DIRECTAS EN INVESTIGACION BASICA DE CANCER, ASI COMO TAMBIEN EN EL DESARROLLO DE POSIBLES AGENTES QUIMIOTERAPEUTICOS, NUESTRO GRUPO HA TRABAJADO INTENSAMENTE EN APLICAR TECNICAS DE MOLECULA UNICA PARA ESTUDIAR PROTEINAS DE REPARACION DE DSBS DE SISTEMAS BACTERIANOS, ESTO REPRESENTA UNA VENTAJA A LA HORA DE AFRONTAR EL AMBICIOSO PROBLEMA DE COMPRENDER EL PROCESAMIENTO DE DSBS EN CELULAS HUMANAS, EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES DETERMINAR EL PAPEL QUE JUEGAN LAS PROTEINAS HUMANAS DE RESECCION CTIP, EL COMPLEJO MRN, Y DNA2 EN EL PROCESAMIENTO Y UNION DE EXTREMOS DE ADN MEDIANTE NUEVAS ESTRATEGIAS DE MOLECULA UNICA, CON ESTE FIN, POSICIONAREMOS NUESTRAS TECNICAS A LA VANGUARDIA DEL CONOCIMIENTO INCORPORANDO ESTIRAMIENTO LATERAL EN NUESTRO EQUIPO COMBINADO DE PINZAS MAGNETICAS (PM) Y MICROSCOPIA TIRF Y COMBINANDO MICROSCOPIA DE FUERZAS ATOMICAS (AFM) CON TIRF, ESTA INSTRUMENTACION PERMITIRA CORRELACIONAR LA ACTIVIDAD MECANICA DE PROTEINAS CON LA POSICION DONDE SE UNEN AL ADN, LOS EQUIPOS SE VALIDARAN CON MOTORES MOLECULARES BACTERIANOS Y OTRAS PROTEINAS DE UNION A ADN, SE INVESTIGARA LA INTERACCION DE LA PROTEINA HUMANA CTIP Y EL COMPLEJO MRN CON DIFERENTES TIPOS DE EXTREMOS DE ADN, ESTUDIAREMOS TAMBIEN LA DINAMICA DEL PROCESAMIENTO DE ADN POR DNA2, E INVESTIGAREMOS EL PAPEL QUE JUEGA RPA PARA ESTABILIZAR LAS ESTRUCTURAS DE ADN DE HEBRA SIMPLE QUE SE PRODUCEN EN ESTAS REACCIONES, LA RECONSTITUCION DEL PROCESO DE RESECCION DE UN DSB POR COMPLEJOS DE PROTEINA HUMANA SERA UN HITO EN EL CAMPO DE LA BIOFISICA MOLECULAR Y LA RECOMBINACION, ESTA PROPUESTA INVOLUCRA COLABORACIONES ESTABLES ENTRE EXPERTOS EN EL CAMPO DE LA BIOQUIMICA DE PROTEINAS DE REPARACION Y BIOFISICOS DE MOLECULA UNICA CON INTERES EN AFM, PM Y FLUORESCENCIA, LA INVESTIGACION DE MOLECULA UNICA QUE AQUI SE PROPONE SERA COMPLEMENTADA CON ANALISIS ESTADISTICOS Y ENSAYOS BIOQUIMICOS CONVENCIONALES, BIOFÍSICA MOLECULAR\PINZAS MAGNÉTICAS\MICROSCOPÍA DE FUERZAS ATÓMICAS\FLUORESCENCIA\REPARACIÓN DE ADN\INTERACCIONES ADN-PROTEÍNAS\MOTORES MOLECULARES
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