ANALISIS DE LAS PROTEINAS MULTIFUNCIONALES FLRTS EN LA MIGRACION DE INTERNEURONA...
ANALISIS DE LAS PROTEINAS MULTIFUNCIONALES FLRTS EN LA MIGRACION DE INTERNEURONAS Y LOS MECANISMOS DE SEÑALIZACION IMPLICADO
NUESTRO GRUPO ESTA INTERESADO EN LOS ASPECTOS MOLECULARES QUE REGULAN LA CONECTIVIDAD NEURONAL, EN CONCRETO, ESTUDIAMOS LAS MOLECULAS QUE REGULAN EL DESARROLLO DEL SISTEMA NERVIOSO, SOBRETODO LA MIGRACION NEURONAL Y LA GUIA AXONAL...
NUESTRO GRUPO ESTA INTERESADO EN LOS ASPECTOS MOLECULARES QUE REGULAN LA CONECTIVIDAD NEURONAL, EN CONCRETO, ESTUDIAMOS LAS MOLECULAS QUE REGULAN EL DESARROLLO DEL SISTEMA NERVIOSO, SOBRETODO LA MIGRACION NEURONAL Y LA GUIA AXONAL, NOS INTERESAN UNA FAMILIA DE PROTEINAS TRANSMEMBRANA LLAMADAS FIBRONECTIN AND LEUCINE RICH TRANSMEMBRANE PROTEINS (FLRT1-3) CUYA EXPRESION ESTA ENRIQUECIDA TANTO EN EL DESARROLLO COMO EN EL CEREBRO ADULTO, LOS FLRTS SE CONOCIAN POR SU PAPEL MORFOGENICO EN ADHESION CELULAR EN EL EMBRION, SIN EMBARGO, SU PAPEL EN EL SISTEMA NERVIOSO PARECE SER MUCHO MAS COMPLEJO, DURANTE LOS ULTIMOS AÑOS, NUESTRO GRUPO HA REVELADO QUE REGULAN LA MIGRACION DE NEURONAS PIRAMIDALES EN LA CORTEZA CEREBRAL ASI COMO LA GUIA AXONAL DE NEURONAS TALAMICAS ROSTRALES, ADEMAS, LOS ASPECTOS MOLECULARES DE ESTAS FUNCIONES SON DIFERENTES INDICANDO QUE DEPENDEN DEL CONTEXTO NEURONAL: EN NEURONAS PIRAMIDALES, FLRT2 ACTUA EN TRANS COMO UN REPELENTE PARA NEURONAS UNC5D+ MIENTRAS QUE EN AXONES TALAMICOS FLRT3 ACTUA EN CIS COMO UN CO-RECEPTOR DE ROBO1 PROVOCANDO UN CAMBIO DE LA SEÑALIZACION DE REPULSIVA A ATRACTIVA, DEPENDIENTE DE NETRIN-1, ESTA "MULTIFUNCIONALIDAD" DE LOS FLRTS Y SUS COMPLEJOS MECANISMOS DE ACCION SUGIEREN QUE PUEDEN ACTUAR EN OTRAS POBLACIONES NEURONALES (INTERNEURONAS), TAMBIEN NUESTROS RESULTADOS HAN REDIRIGIDO EL FOCO DE LOS NEUROBIOLOGOS MOLECULARES HACIA LOS FLRTS COMO PROTEINAS CANDIDATAS RELEVANTES EN ASPECTOS IMPORTANTES DE LA CONECTIVIDAD NEURONAL, IGUAL QUE LAS NEURONAS PIRAMIDALES, LAS INTERNEURONAS MIGRAN DURANTE EL DESARROLLO HASTA SU POSICION FINAL EN LA CORTEZA, AUNQUE MUCHO MENOR EN NUMERO, ESTAS NEURONAS JUEGAN UN PAPEL ESENCIAL EN LA COORDINACION DE LA EXCITABILIDAD CORTICAL Y, DE HECHO, DEFECTOS EN SU FUNCION SE HA ASOCIADO CON EPILEPSIA Y ESQUIZOFRENIA, EN CONTRASTE CON LAS NEURONAS PIRAMIDALES, LAS INTERNEURONAS USAN RUTAS DE MIGRACION TANGENCIALES DESDE EL TELENCEFALO VENTRAL, TRES SON LAS RUTAS PRINCIPALES QUE SE HAN IDENTIFICADO EN LA CORTEZA Y, SORPRENDENTEMENTE, TODAS ELLAS EVITAN LAS ZONAS RICAS EN FLRTS, RESULTADOS PRELIMINARES EN CEREBROS KNOCK-OUT PARA FLRT HAN REVELADO QUE LAS RUTAS DE INTERNEURONAS CALBINDINA+ EN LA CORTEZA ESTAN DESFIGURADAS, ADEMAS LOS FLRTS EJERCEN UN EFECTO REPULSIVO EN CULTIVOS DE INTERNEURONAS, ASI, NUESTRA HIPOTESIS ES QUE JUEGAN UN PAPEL IMPORTANTE EN LA INTEGRIDAD DE LAS RUTAS DE MIGRACION DE LAS INTERNEURONAS CORTICALES, POSIBLEMENTE A TRAVES DE UN EFECTO REPULSIVO SOBRE ESTAS NEURONAS, EN ESTE PROYECTO, PRETENDEMOS CARACTERIZAR EL EFECTO DE LOS FLRTS EN LA MIGRACION DE LAS INTERNEURONAS CORTICALES Y LOS MECANISMOS IMPLICADOS, IN VIVO, TAMBIEN HEMOS PLANEADO DIFERENTES APROXIMACIONES PARA ENTENDER MEJOR LOS COMPLEJOS MECANISMOS DE LA ACCION DE LOS FLRTS Y SU SEÑALIZACION INTRACELULAR, EN UNA DE LAS APROXIMACIONES UTILIZAREMOS CULTIVOS PRIMARIOS DE NEURONAS TALAMICAS PARA ESTUDIAR LAS POSIBLES VIAS DE SEÑALIZACION ACTIVADAS POR FLRT3 CON ESPECIAL ATENCION A LA REGULACION DE ROBO1, EN UNA SEGUNDA APROXIMACION UTILIZAREMOS UN MODELO DE RATON TRANSGENICO QUE EXPRESE FLRT3 CON UN TANDEM AFFINITY PURIFICATION TAG (TAP TAG) QUE NOS PERMITIRA ANALIZAR LOS COMPLEJOS DE PROTEINAS QUE SE UNEN A FLRT3 EN CEREBROS EMBRIONARIOS, IN VIVO, MEDIANTE PROTEOMICA, PENSAMOS QUE PARA PROTEINAS CON UN COMPLEJO MECHANISMO DE ACCION COMO LOS FLRTS, ESTA APROXIMACION PERMITE DESCIFRAR MAS ADECUADAMENTE SUS PROPIEDADES COMO MOLECULAS SEÑALIZADORAS, DESARROLLO\ CORTEZA\ FLRT\ROBO\INTERNEURONA\MIGRACIÓN\SEÑALIZACIÓN\TRANSGÉNESI DE RATÓN\MASS SPEC\CRISPR/CASver más
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