Descripción del proyecto
ORNITHODOROS ERRATICUS Y O, MOUBATA SON LOS PRINCIPALES VECTORES DE LA PESTE PORCINA AFRICANA (PPA) Y LA FIEBRE RECURRENTE HUMANA EN EL MEDITERRANEO Y AFRICA, LA PRESENCIA DE ESTOS ARGASIDOS EN EL MEDIO DOMESTICO Y PERIDOMESTICO CONTRIBUYE A LA PERSISTENCIA DE DICHAS ENFERMEDADES EN ZONAS DONDE SON ENDEMICAS Y, EN RELACION CON LA PPA, SUPONEN UNA AMENAZA CONSTANTE DE REINTRODUCCION EN PAISES DE LOS QUE SE ERRADICO Y DE DISPERSION HACIA ZONAS DONDE NO EXISTIA PREVIAMENTE, LA PREVENCION Y CONTROL DE TALES ENFERMEDADES REQUIERE LA ELIMINACION DE ESTOS ARGASIDOD DEL ENTORNO SINANTROPICO, PERO LA APLICACION DE ACARICIDAS COMO METODO DE LUCHA FRENTE A ELLOS RESULTA INEFICAZ HACIENDO NECESARIO EL DESARROLLO DE METODOS ALTERNATIVOS DE CONTROL, DE LOS CUALES, LOS MAS PROMETEDORES SON LAS VACUNAS ANTI-GARRAPATA, ESPECIALMENTE LAS BASADAS EN ANTIGENOS OCULTOS DEL INTESTINO,ESTOS ANTIGENOS, AL NO HABER SUFRIDO LA PRESION SELECTIVA DE LA RESPUESTA INMUNITARIA DEL HOSPEDADOR ES PROBABLE QUE ESTEN CONSERVADOS EN ARGASIDOS E IXODIDOS, LO QUE PERMITIRIA UTILIZARLOS EN UNA VACUNA ANTI-GARRAPATA DE AMPLIO ESPECTRO, EN ESTUDIOS PREVIOS HEMOS OBSERVADO QUE EL INTESTINO DE LOS ORNITHODOROS CONTIENE ANTIGENOS PROTECTORES MUY EFICACES, AUNQUE ESTOS AUN NO HAN SIDO IDENTIFICADOS,LA FINALIDAD DEL PRESENTE PROYECTO ES LA IDENTIFICACION Y VALIDACION DE ANTIGENOS INTESTINALES PROTECTORES DE O, ERRATICUS Y O, MOUBATA MEDIANTE UNA APROXIMACION DE VACUNOLOGIA REVERSA,CON ESA FINALIDAD SE PROPONEN LOS SIGUIENTES OBJETIVOS ESPECIFICOS: (1) OBTENCION DEL TRANSCRIPTOMA Y (2) DEL PROTEOMA DEL INTESTINO DE AMBAS ESPECIES Y EN DOS MOMENTOS DISTINTOS DE SU CICLO TROFOGONICO, EN AYUNAS Y A LAS 48 HORAS POST-ALIMENTACION (HPA), PARA DETECTAR A LAS PROTEINAS QUE SE EXPRESEN EN RESPUESTA A LA INGESTION DE LA SANGRE; (3) ANALISIS IN SILICO DE LAS SECUENCIAS VALIDAS Y SELECCION DE UNA LISTA DE CANDIDATOS TEORICOS, QUE INCLUIRA, PREFERENTEMENTE, A LAS PROTEINAS ANTIGENICAS EXPUESTAS A LOS EFECTORES INMUNES INGERIDOS CON LA SANGRE DEL HOSPEDADOR, ESTO ES, LAS DE MEMBRANA Y LAS SECRETADAS, DE ESTAS, SE PRIORIZARA A LAS QUE REUNAN EL MAYOR NUMERO DE LOS SIGUIENTES REQUISITOS: QUE SU EXPRESION AUMENTE SIGNIFICATIVAMENTE A LAS 48 HPA,, QUE SEAN EXPRESADAS SIMULTANEAMENTE EN LAS GLANDULAS SALIVALES, QUE ESTEN CONSERVADAS EN OTROS ARTROPODOS HEMATOFAGOS Y QUE SU FUNCION, PREVISTA O VERIFICADA EXPERIMENTALMENTE, SEA VITAL PARA EL PARASITO; (4) SILENCIAMIENTO GENICO MEDIANTE RNAI DE LOS CANDIDATOS TEORICOS PARA EVALUAR SU EFECTO FENOTIPICO Y SELECCION DE LOS QUE MUESTREN UN MAYOR POTENCIAL PROTECTOR; (5) PRODUCCION DE LOS CANDIDATOS EN FORMA RECOMBINANTE Y (6) INMUNIZACION DE ANIMALES CON LAS RECOMBINANTES PARA VERIFICAR SU CAPACIDAD PROTECTORA FRENTE A ORNITHODOROS Y A IXODIDOS Y, SOBRE ESA BASE, DEFINIR NUEVOS ANTIGENOS VACUNALES EFICACES Y DE AMPLIO ESPECTRO,EN ARGASIDOS SE DESCONOCEN EL TRANSCRIPTOMA Y PROTEOMA DEL INTESTINO Y NO SE HAN PODIDO APLICARSE AUN ESTRATEGIAS DE VACUNOLOGIA REVERSA PARA LA IDENTIFICACION DE ANTIGENOS PROTECTORES EN ESTE ORGANO, POR TANTO, LA APROXIMACION QUE PROPONEMOS EN ESTE PROYECTO ES ORIGINAL Y NOVEDOSA Y PROPORCIONARA CONOCIMIENTOS INEDITOS, BASICOS PARA COMPRENDER LA BIOLOGIA DE ESTOS PARASITOS Y SUS RELACIONES CON EL HOSPEDADOR Y CON LOS PATOGENOS INGERIDOS CON LA SANGRE Y, POR TANTO, UTILES PARA LA SELECCION DE CANDIDATOS VACUNALES EN EL DESARROLLO DE METODOS INMUNOLOGICOS DE CONTROL DE GARRAPATAS Y DE LAS ENFERMEDADES QUE TRANSMITEN, VACUNOLOGÍA REVERSA\ TRANSCRIPTOMA\ PROTEOMA\ ANTÍGENOS\ VACUNAS\ GARRAPATAS\ ORNITHODOROS\ PESTE PORCINA AFRICANA