Descripción del proyecto
LAS PROTEINAS FUR CONSTITUYEN UNA SUPERFAMILIA DE REGULADORES TRANSCRIPCIONALES QUE CONTIENE EL MOTIVO HHXHXXCXXC Y ENGLOBA A DIVERSOS SUBTIPOS QUE SE HAN ESPECIALIZADO EN LA RESPUESTA A DIFERENTES TIPOS DE ESTRES, EN CIANOBACTERIAS FURA ES ESENCIAL Y ADEMAS DE LA SECUENCIA CANONICA HHXHXXCXXC, PRESENTA VARIOS MOTIVOS CXXC MUY CONSERVADOS, PROXIMOS AL EXTREMO C-TERMINAL Y QUE PODRIAN ACTUAR DETECTANDO EL ESTADO REDOX DE LA CELULA Y/O PALIANDO DIRECTAMENTE LOS EFECTOS DE UN EXCESO EVENTUAL DE RADICALES LIBRES, EN ESTE SENTIDO, HEMOS OBSERVADO QUE EL ESTADO REDOX DE LOS TIOLES DE FURA ES CRUCIAL EN LA INTERACCION CON EL DNA Y QUE LA SOBREEXPRESION DE ESTA PROTEINA CONFIERE TOLERANCIA AL ESTRES OXIDATIVO, OTRA CARACTERISTICA DE FURA DE CIANOBACTERIAS ES QUE FORMA UN COMPLEJO ESTABLE CON HEMO Y ESTA INTERACCION AFECTA A LA CAPACIDAD DEL REGULADOR PARA UNIRSE AL DNA, EN LA ESTIRPE FILAMENTOSA FIJADORA DE NITROGENO ANABAENA, FURA ES UNA PROTEINA EXTRAORDINARIAMENTE ABUNDANTE PARA TRATARSE EXCLUSIVAMENTE DE UN REGULADOR, ADEMAS, LA EXPRESION DE FURA ESTA FUERTEMENTE INDUCIDA EN LOS HETEROCISTOS, CELULAS ESPECIALIZADAS DONDE SE PRODUCE LA FIJACION DE NITROGENO EN UN ENTORNO MICROAEROBICO,EL OBJETIVO GENERAL DE ESTE PROYECTO ES AVERIGUAR COMO INTERVIENEN LAS CISTEINAS DE FURA EN EL MANTENIMIENTO DE LA HOMEOSTASIS REDOX, ASI COMO EL PAPEL QUE JUEGA EL COMPLEJO FURA-HEMO EN LA FISIOLOGIA CELULAR, EN AMBOS CASOS, SE RELACIONARA LA ACTIVIDAD DE ESTOS CENTROS SENSORES CON LA REGULACION DE LA FOTOSINTESIS Y EL METABOLISMO DEL HETEROCISTO, DONDE FURA-HEMO PODRIA JUGAR UN PAPEL RELEVANTE EN EL TRANSPORTE DE OXIGENO Y LA NEUTRALIZACION DE RADICALES LIBRES,PARA ELLO, SE ABORDARAN LOS SIGUIENTES OBJETIVOS CONCRETOS:1-CONOCER EL MECANISMO DE ACTUACION DE LAS CISTEINAS COMO MEDIADORAS DE LA RESPUESTA REDOX EN FURA, -SE IDENTIFICARAN LAS CISTEINAS IMPLICADAS EN LA FORMACION DE PUENTES DISULFURO INTRA E INTERMOLECULARES Y SE ANALIZARA LA RELACION ENTRE LA FORMACION DE DIMEROS Y LA RESISTENCIA AL ESTRES OXIDATIVO,-SE INVESTIGARA SI EL MOTIVO C141PKC144 ACTUA COMO UN REOSTATO SIMILAR AL DE LAS ISOMERASAS DE PUENTES DISULFURO (DSBA), TRANSFIRIENDO LA SEÑAL DE OXIDACION AL PAR C101VKC104 -SE EVALUARA LA CAPACIDAD DE FURA PARA UNIR GLUTATION Y SI PROCEDE, SE IDENTIFICARAN LOS RESIDUOS MODIFICADOS Y SE ESTUDIARA COMO AFECTA ESTA INTERACCION A LA UNION A DNA,2-CARACTERIZAR LA FUNCIONALIDAD DE FURA COMO SENSOR BASADO EN SU INTERACCION CON HEMO - SE EXPLORARA LA CAPACIDAD DEL COMPLEJO FURA-HEMO PARA UNIR GASES - SE IDENTIFICARAN LOS LIGANDOS DE FURA QUE PARTICIPAN EN LA COORDINACION DE HEMO3-ANALIZAR EL EFECTO DE LA SOBREEXPRESION DE FURA EN ANABAENA, CARACTERIZANDO EL FENOTIPO DE LA ESTIRPE DE ANABAENA AG2770FURA, ESTUDIANDO SU RESPUESTA EN CONDICIONES DE DEFICIT NITROGENADO, HIPOXIA Y ESTRES OXIDATIVO, SE ANALIZARA LA PRESENCIA DE INDICADORES DEL INICIO DE LA DIFERENCIACION DE HETEROCISTOS 4-APORTAR DATOS SOBRE LAS FUNCIONES DE FURA EN EL HETEROCISTO-SE INVESTIGARA UNA POSIBLE ACTIVIDAD PEROXIDASA DE FURA LIBRE O UNIDA A HEMO -SE ANALIZARAN LOS PROMOTORES DE LOS GENES CUYOS NIVELES DE EXPRESION EN EL HETEROCISTO DIFIEREN SIGNIFICATIVAMENTE DE LOS ENCONTRADOS EN CELULAS VEGETATIVAS EVALUANDO SU POSIBLE REGULACION POR FURA, LA CARACTERIZACION A NIVEL MOLECULAR DE ESTA PROTEINA MULTIFUNCION NOS PERMITIRA CONOCER MEJOR COMO INTERVIENE EN PROCESOS TAN IMPORTANTES COMO LA PROTECCION FRENTE A ROS, LA FIJACION DE NITROGENO Y LA FOTOSINTESIS FERRIC UPTAKE REGULATOR\CIANOBACTERIAS\HETEROCISTO\HEMO\CISTEINAS\SENSOR REDOX