Descripción del proyecto
UNA PREGUNTA CLAVE EN EL TRAFICO DE MEMBRANAS ES LA NATURALEZA DE LOS TRANSPORTADORES QUE OPERAN ENTRE COMPARTIMENTOS, DURANTE DECADAS SE ASUMIO QUE ESTOS TRANSPORTADORES ERAN PEQUEÑAS VESICULAS QUE SE FORMABAN POR GEMACION DE LA MEMBRANA DONANTE PARA POSTERIOR FUSION CON EL COMPARTIMENTO ACEPTOR, EN LOS ULTIMOS AÑOS SE HAN DADO PASOS DE GIGANTE EN LA DISECCION MOLECULAR DE ESTE PROCESO, ASI, SE HAN IDENTIFICADO UN GRAN NUMERO DE MOLECULAS QUE INTERVIENEN EN LA ADQUISICION DE LA CUBIERTA PROTEICA, GEMACION, ELIMINACION DE LA CUBIERTA, RECONOCIMIENTO E INTERACCION CON LA MEMBRANA DIANA Y FINALMENTE, FUSION, A PESAR DEL AMPLIO CONSENSO SOBRE EL PAPEL DE LAS VESICULAS, EL NUMERO DE PUBLICACIONES QUE INDICAN QUE OTRAS ESTRUCTURAS ACTUAN COMO TRANSPORTADORES NO DEJA DE CRECER, TUBULOS Y ESTRUCTURAS DE MORFOLOGIA HETEROGENEA PODRIAN PARTICIPAR EN ALGUNOS (O QUIZAS TODOS) PASOS DE LA RUTA SECRETORA, NO SE CONOCE EL MODO EN QUE PROTEINAS Y LIPIDOS ATRAVIESAN EL APARATO DE GOLGI, EXISTIENDO DOS TEORIAS ALTAMENTE ENFRENTADAS: MADURACION DE CISTERNAS Y CISTERNAS ESTACIONARIAS, DE ACUERDO CON ESTAS DOS TEORIAS LAS VESICULAS SERIAN LAS RESPONSABLES DEL TRANSPORTE RETROGRADO Y ANTEROGRADO, RESPECTIVAMENTE, RECIENTEMENTE HAN COBRADO FUERZA MODELOS DE TRANSPORTE BASADO EN CONEXIONES TUBULARES, MAS DATOS EXISTEN SOBRE EL TRANSPORTE BIDIRRECIONAL ENTRE EL RETICULO ENDOPLASMATICO Y EL APARATO DE GOLGI, AUNQUE SE DESCONOCE EL PAPEL EXACTO DEL DENOMINADO COMPARTIMENTO INTERMEDIO, AGRUPACIONES HETEROGENEAS TUBULO-VESICULARES QUE OPERAN EN ESTA AREA, EN EL PRESENTE PROYECTO PRETENDEMOS ANALIZAR UTILIZANDO TECNICAS MORFOLOGICAS ACTUALES DE ALTA RESOLUCION EL TRANSPORTE ENTRE RETICULO ENDOPLASMATICO Y APARATO DE GOLGI Y DENTRO DE ESTE ULTIMO ORGANULO, MAS CONCRETAMENTE, EL PAPEL DESEMPEÑADO POR LOS INTERMEDIARIOS DE TRANSPORTE TUBULARES, PARA ELLO UTILIZAREMOS VARIOS MODELOS EXPERIMENTALES: CELULAS HELA INCUBADAS A BAJA TEMPERATURA, ESPERMATIDAS TEMPRANAS DE RATA Y CELULAS EUCARIOTAS SENCILLAS (LEVADURAS, ALGA FLAGELADA), ENTRE LAS TECNICAS QUE UTILIZAREMOS ESTAN INMUNOFLUORESCENCIA, MICROSCOPIA CONFOCAL IN VIVO, CRIOINMUNOCITOQUIMICA ULTRAESTRUCTURAL, TECNICAS ESTEREOLOGICAS EN MICROSCOPIA ELECTRONICA Y TOMOGRAFIA ELECTRONICA, Aparato de Golgi\compartimento intermedio\tráfico intracelular\túbulo\microscopía electrónica\microscopía confocal in vivo\crioinmunocitoquímica