Descripción del proyecto
EL SUBPROYECTO QUE SE PRESENTA FORMA PARTE DEL PROYECTO PLATAFORMA DE DIAGNOSTICO UNIVERSAL BASADA EN NANOPARTICULAS CODIFICADAS CON OLIGONUCLEOTIDOS Y MICROARRAYS DE DNA EN DISPOSITIVOS SENSORES(OLIGOCODES) LIDERADO POR LA DRA. PILAR MARCO COLAS DEL AMRG-IQAC-CSIC. EL OBJETIVO GENERAL DE ESTE SUBPROYECTO ES EL DESARROLLO DE BIORECEPTORES PARA LA DETECCION DE BIOMARCADORES EN CANCER. DADO QUE UNO DE LOS OBJETIVOS DEL PROYECTO OLIGOCODES ES DEMOSTRAR LA MULTIMODALIDAD DEL ENFOQUE, HEMOS SELECCIONADO EL CANCER DE PANCREAS COMO UN MODELO DE PRUEBA DE PRINCIPIO. ACTUALMENTE, EL DIAGNOSTICO EN SANGRE PARA EL CANCER DE PANCREAS ESTA BASADO PRINCIPALMENTE EN DOS BIOMARCADORES, CA 19-9 (ANTIGENO DE CANCER 19-9, CARBOHIDRATO 19-9) Y EL CEA (ANTIGENO CARCINOEMBRIONARIO), POR LO QUE EL EMPLEO DE MULTIPLES MARCADORES MEJORARA SIGNIFICATIVAMENTE EL DIAGNOSTICO DE ESTE TIPO DE CANCER. ESTUDIOS RECIENTES BASADOS EN LA IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION DE NUEVOS BIOMARCADORES HAN PERMITIDO EL DESCUBRIMIENTO DE NUEVOS BIOMARCADORES POTENCIALMENTE UTILES Y DE DIFERENTE NATURALEZA QUIMICA. SIN EMBARGO, ESTOS NUEVOS BIOMARCADORES ESTAN PENDIENTES DE VALIDACION, PERO PUEDEN SER UTILES SI SE EMPLEAN EN COMBINACION CON EL CEA Y CA19-9. EJEMPLOS SON LA PROTEINA S100A4 (AIKX Y COL. GASTROENTEROLOGY 2008, 16(3); OIDA Y COL., ONCOLOLOGY REP 2006, 16(3)), OBJETO DE ESTUDIO COMO BIOMARCADOR PLASMATICO EN NUESTRO GRUPO, Y MICRORNAS (CHO. INT J BIOCHEM CELL BIOL. 2010;42).LA ESTRATEGIA A SEGUIR EN ESTE SUBPROYECTO SERIA (I) LA SELECCION DE LOS BIOMARCADORES DE DIFERENTE NATURALEZA QUIMICA (OBJETIVO DEL OLIGOCODES) PARA EL DIAGNOSTICO DE CANCER DE PANCREAS, (II) DESARROLLAR LOS BIORECEPTORES, QUE SE PROPORCIONARAN A LOS GRUPOS QUE COOPERAN EN ESTE PROYECTO PARA SU BIOFUNCIONALIZACION, Y (III) ESTABLECER LOS ENSAYOS IN VITRO PARA VALIDAR CADA PASO EL DESARROLLO DE BIOSENSORES. INICIALMENTE, LOS BIOMARCADORES SELECCIONADOS SERAN LOS DOS BIOMARCADORES VALIDADOS CEA Y CA19-9. SE AÑADIRAN OTROS BIOMARCADORES IDENTIFICADOS, COMO LA PROTEINA S100A4, Y EL MIRNA-155. ESTOS MARCADORES REPRESENTAN TRES DIFERENTES TIPOS DE MOLECULAS: PROTEINAS, CARBOHIDRATOS Y ACIDOS NUCLEICOS.PARA CEA, S100A4 Y C19-9 SE GENERARAN ANTICUERPOS MONOCLONALES CONTRA LOS ANTIGENOS HUMANOS MEDIANTE LA INMUNIZACION DE RATONES Y POSTERIOR PRODUCCION DE HIBRIDOMAS ESPECIFICOS. POR LO QUE RESPECTA A LA MIR-155, SI LAS SECUENCIAS DE OLIGONUCLEOTIDOS EN PARTICULAR NO ESTAN COMERCIALMENTE DISPONIBLES, SE SOLICITARIAN A EMPRESAS ESPECIALIZADAS. CONTAMOS CON EL ASESORAMIENTO DEL PROF. RAMON ERITJA (IQAC-CSIC).UNA VEZ OBTENIDOS LOS ANTICUERPOS, SE SELECCIONARAN LOS QUE PRESENTEN TANTO ESPECIFICIDAD CONTRA EL ANTIGENO HUMANO COMO PARA ANTIGENO HUMANO Y MURINO. LOS QUE MUESTREN MAYOR AFINIDAD FRENTE AL ANTIGENO EN SUERO SALINO, SE PASARAN AL ANALISIS EN MEDIOS MAS COMPLEJOS, COMO SUERO DE RATON CON O SIN ANTIGENO HUMANO, Y SUEROS DE RATONES PORTADORES DE TUMORES PANCREATICOS (MODELOS ORTOTOPICOS) CON O SIN ANTIGENO HUMANO. COMO CONTROL EXPERIMENTAL SE EMPLEARAN ANTICUERPOS COMERCIALES.LOS ANTICUERPOS SELECCIONADOS Y EL BIORECEPTOR ESPECIFICO PARA EL MIRNA-155 SE ENTREGARAN A LOS GRUPOS COLABORADORES PARA SU BIOFUNCIONALIZACION.ESTOS MISMOS ENSAYOS SE EMPLEARAN DURANTE EL PROCESO DE VALIDACION DE LOS BIOSENSORES. ANCER\BIOMARCADORES\BIOSENSORES\TERAPIA\DIAGNOSTICO