Descripción del proyecto
LOS ROTAVIRUS (RVS) Y LOS NOROVIRUS (NOVS) SON PATOGENOS HUMANOS CON UN GRAN IMPACTO EN LA SALUD, LOS RVS SON LA PRINCIPAL CAUSA DE GASTROENTERITIS VIRAL EN NIÑOS MENORES DE 5 AÑOS DE EDAD, Y LOS NOVS SON LOS CAUSANTES DE LA MAYORIA DE BROTES DE GASTROENTERITIS AFECTANDO TANTO A NIÑOS COMO A ADULTOS, ADEMAS ESTOS ULTIMOS SON LA PRINCIPAL CAUSA DE GASTROENTERITIS VIRAL TRANSMITIDA POR ALIMENTOS, TANTO LOS NOVS COMO LOS RVS INTERACCIONAN CON LOS ANTIGENOS DE LOS GRUPOS SANGUINEOS (AGSS), LOS CUALES CONTIENEN OLIGOSACARIDOS, A TRAVES DE UN DOMINIO PROTUBERANTE (DOMINIO P) O ESPICULA (VP8*) RESPECTIVAMENTE, LO QUE SUGIERE UNA POSIBLE FUNCION DE LOS OLIGOSACARIDOS COMO RECEPTORES PARA ESTOS VIRUS, ESOS OLIGOSACARIDOS TAMBIEN JUEGAN UN PAPEL IMPORTANTE EN LA SUSCEPTIBILIDAD DEL HUESPED EN LAS INFECCIONES POR NOVS Y RVS, ADEMAS LOS OLIGOSACARIDOS DE LA LECHE MATERNAL (OLHS) POSEEN LA MISMA ESTRUCTURA Y SON SINTETIZADOS POR LAS MISMAS GLICOSIL-TRANSFERASAS QUE LOS AGSS PERO EN LA LECHE EN LUGAR DE EN LAS CELULAS SANGUINEAS O EPITELIARES, TAMBIEN ES CONOCIDO QUE LA LECHE HUMANA POSEE LA CAPACIDAD DE BLOQUEAR LAS INFECCIONES TANTO DE RVS COMO DE NOVS DE MANERA INDEPENDIENTE A LOS ANTICUERPOS PRESENTES EN LA MISMA, PROBABLEMENTE DEBIDO A LA CAPACIDAD ANTI-ADHESIVA DE LOS OLHS, PARA INCREMENTAR NUESTRO CONOCIMIENTO DE LAS INTERACIONES VIRUS-RECEPTOR PRETENDEMOS EVALUAR DE FORMA PRECISA LAS PROPIEDADES DE UNION DE VARIOS GENOTIPOS DE RVS Y NOVS A DIFERENTES AGSS PRESENTES EN LA SALIVA Y EN LA SUPERFICIE DE LAS LINEAS CELULARES EPITELIARES, TAMBIEN ESTUDIAREMOS LA UNION DE LAS PROTEINAS VIRALES A AGSS BIEN CARACTERIZADOS, LOS ESTUDIOS DE UNION SE REALIZARAN EN DIFERENTES FORMATOS INCLUYENDO ELISA, ENSAYOS DE UNION A CELULAS EN CULTIVO Y RESONANCIA SUPERFICIAL DE PLASMON (SPR), EL SEGUNDO OBJETIVO DEL PROYECTO ES EVALUAR LA CAPACIDAD DE BLOQUEO DE DIFIRENTES OLHS Y OLIGOSACARIDOS SIMILARES A OLHS PRODUCIDOS EN EL SUBPROYECTO 1 PARA CONOCER EL POTENCIAL COMO ANTI-ADHESINAS DE ESTOS OLHS, SE UTILIZARAN LOS MISMOS ENSAYOS PREINCUBANDO LAS PROTEINAS VIRALES CON LOS OLHS PRODUCIDOS, TRAS LA CARACTERIZACION DE LO PATRONES DE UNION VIRUS-AGSS Y CONOCIENDO LOS OLHS QUE SON CAPACES DE BLOQUEAR DICHAS INTERACCIONES, UN NUEVO GRUPO DE EXPERIMENTOS SERAN REALIZADOS PARA ESTUDIAR LA ACTIVIDAD ANTIVIRAL DE LOS OLHS SELECCIONADOS, PARA CONSEGUIR ESTE OBJETIVO SE UTILIZARA EL MODELO DE INFECCION DE CELULAS MA104 POR RV IN VITRO,POR TODO LO EXPUESTO LOS OBJETIVOS ESPECIFICOS DEL PROYECTO SON:1, PRODUCIR EN ESCHERICHIA COLI DIFERENTES PARTICULAS P DE NOROVIRUS CON DIFERENTES PATRONES DE UNION A AGSS (GI1, GII4, GII9, ETC
)2, PRODUCIR EN E, COLI DIFERENTES PROTEINAS VP8* DE ROTAVIRUS CON DIFERENTES PATRONES DE UNION A AGSS (P[4], P[6], P[9], P[11], ETC
)3, ESTUDIAR LA CAPACIDAD DE UNION DE LAS PROTEINAS VIRALES PRODUCIDAS EN LOS OBJETIVOS 1 Y 2 A LOS OLIGOSACARIDOS PRODUCIDOS EN EL SUBPROYECTO 1 Y DE UN PANEL DE OLIGOSACARIDOS DISPONIBLE COMERCIALMENTE,4, ESTUDIAR IN VITRO LAS PROPIEDADES ANTI-ADHESINA DE LOS OLIGOSACARIDOS CARACTERIZADOS, TANTO MEDIANTE ESTUDIOS DE LA REDUCCION DE LA UNION (NOV Y RV) COMO ESTUDIANDO LA REDUCCION DE LA INFECCION (RV), ROTAVIRUS\NOROVIRUS\OLIGOSACÁRIDOS DE LECHE HUMANA\ANTÍGENOS DE GRUPO SAGUÍNEO.