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PID2020-112998GB-I00

Financiado

NUEVAS ESTRATEGIAS BIOFISICAS PARA DESCIFRAR EL PAPEL DE PARB Y DE LA CONDENSINA...

NUEVAS ESTRATEGIAS BIOFISICAS PARA DESCIFRAR EL PAPEL DE PARB Y DE LA CONDENSINA EN CONDENSACION Y SEGREGACION DEL CROMOSOMA LA TAREA DE SEPARAR LOS CROMOSOMAS HERMANOS EN CELULAS BACTERIANAS LA REALIZA EL SISTEMA PARABS Y LA CONDENSINA, UN COMPLEJO PROTEICO FORMADO POR CINCO PROTEINAS: EL HOMODIMERO SMC2 Y EL COMPLEJO SCPAB2. EL SISTEMA PARABS ESTA FOR... ver más

01/01/2020

CSIC

478K€

Presupuesto del proyecto: 478K€

Líder del proyecto

AGENCIA ESTATAL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGA... No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

TRL 2-3 | 552M€

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2020-01-01

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Participantes

CSIC

Lider

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Líder del proyecto

AGENCIA ESTATAL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGA...

TRL 2-3 | 552M€

Presupuesto del proyecto 478K€

Descripción del proyecto LA TAREA DE SEPARAR LOS CROMOSOMAS HERMANOS EN CELULAS BACTERIANAS LA REALIZA EL SISTEMA PARABS Y LA CONDENSINA, UN COMPLEJO PROTEICO FORMADO POR CINCO PROTEINAS: EL HOMODIMERO SMC2 Y EL COMPLEJO SCPAB2. EL SISTEMA PARABS ESTA FORMADO POR EL DIMERO PARB2, QUE SE UNE ESPECIFICAMENTE A SECUENCIAS PARS, QUE APARECEN CERCA DEL ORIGEN DE REPLICACION DEL CROMOSOMA, FORMANDO CONJUNTAMENTE EL CENTROMERO BACTERIANO. PARB FORMA REDES DE PROTEINA ALREDEDOR DE PARS Y RECLUTA AL COMPLEJO CONDENSINA, EL CUAL MANTIENE UNIDO LOS DOS BRAZOS DEL CROMOSOMA EN REPLICACION ANTES DE LA DIVISION CELULAR. LA ACCION DE SEGREGAR LOS CROMOSOMAS LA REALIZA LA ATPASA PARA, QUE CONSTITUYE EL TERCER COMPONENTE DEL SISTEMA PARABS. LA HIDROLISIS Y UNION DE ATP Y DE CTP SON ESENCIALES EN ESTE PROCESO DE UNION DE PARB A PARS Y DE SEGREGACION DEL CROMOSOMA, PERO EL MECANISMO QUE SUBYACE DETRAS ES DESCONOCIDO. EN ESTE PROYECTO, SE EMPLEARAN TECNICAS DE MOLECULA UNICA PARA ENTENDER EL ENSAMBLAJE DE LAS REDES DE PARB CENTRADAS EN PARS, EL RECLUTAMIENTO DE LA CONDENSINA POR PARB, Y EL MECANISMO QUE RIGE LA SEGREGACION DEL ADN POR ESTOS DOS COMPLEJOS PROTEICOS USANDO LA BACTERIA BACILLUS SUBTILIS COMO SISTEMA MODELO. ENTENDER EL MECANISMO DE SEGREGACION DEL CROMOSOMA BACTERIANO SERA DE GRAN RELEVANCIA PARA ENTENDER COMO FUNCIONAN OTRAS PROTEINAS DE LA FAMILIA SMC, ENTRE LAS QUE SE INCLUYEN LA CONDENSINA EUCARIOTA, LA COHESINA, O EL COMPLEJO SMC5/6, LAS CUALES POSEEN UN PAPEL ESENCIAL EN LA DINAMICA CROMOSOMICA DE LOS ORGANISMOS EUCARIOTAS Y, POR CONSIGUIENTE, EN LAS ENFERMEDADES HUMANAS.EN ESTE PROYECTO, EMPLEAREMOS UNA COMBINACION UNICA DE PINZAS MAGNETICAS, ATRAPAMIENTO OPTICO Y MICROSCOPIA CONFOCAL PARA DETERMINAR COMO LOS COMPLEJOS SMC SE ASOCIAN CON PARB EN LOS SITIOS PARS, Y CUAL ES EL PAPEL DE LA UNION E HIDROLISIS DE NUCLEOTIDOS EN LA CONDENSACION DEL ADN, EL RECLUTAMIENTO DEL COMPLEJO SMC Y LA SEGREGACION DEL CROMOSOMA. ESTE PROYECTO SE SUSTENTA EN LA HIPOTESIS DE QUE LOS METODOS DE MOLECULA UNICA SON IDEALES PARA LA MONITORIZACION DE LA ACTIVIDAD DE PROTEINAS EN EL ADN QUE RESULTAN EN CONDENSACION YA QUE PERMITEN MANIPULAR MOLECULAS INDIVIDUALES Y MEDIR FUERZAS, MIENTRAS SE INCORPORAN PROTEINAS INDIVIDUALES DE FORMA CONTROLADA. ADEMAS, EL USO COMBINADO DE LAS TECNICAS DE ATRAPAMIENTO OPTICO CON MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA CONFOCAL PERMITIRA VISUALIZAR Y CUANTIFICAR LA UNION DE PROTEINAS Y SEGUIR SU DINAMICA EN MOLECULAS INDIVIDUALES DE ADN. LA ESTRATEGIA DE MOLECULA UNICA PERMITIRA VALIDAR DIFERENTES MODELOS DE UNION DE PARB EN PARS Y OBSERVAR POR PRIMERA VEZ LA UNION ESPECIFICA DE PARB A PARS A NIVEL MOLECULAR. SE INVESTIGARA EL FENOMENO DESCRITO DE PROPAGACION DE PARB A PARTIR DE PARS Y EL PAPEL QUE JUEGA LA UNION E HIDROLISIS DE CTP EN ESTA FUNCION. ADEMAS, SE DETERMINARA EL MECANISMO DE RECLUTAMIENTO DE SMC POR PARB Y EL PAPEL DE LA UNION E HIDROLISIS DE ATP. ESTAS SON PREGUNTAS FUNDAMENTALES PARA LAS QUE TODAVIA NO HAY RESPUESTA Y A LAS QUE PRETENDEMOS RESPONDER EN ESTE PROYECTO. LA RECREACION DEL PROCESO DE ENSAMBLAJE DEL CENTROMERO BACTERIANO POR PARB Y LA CONDENSINA A NIVEL MOLECULAR SERA UN HITO EN EL CAMPO DE LA BIOFISICA MOLECULAR Y LA BIOLOGIA DE LOS COMPLEJOS SMC. ESTA PROPUESTA INVOLUCRA COLABORACIONES INTERNACIONALES ESTABLES ENTRE EXPERTOS EN EL CAMPO DE LA BIOQUIMICA DE PROTEINAS SMC Y BIOFISICOS MOLECULARES. LA INVESTIGACION DE MOLECULA UNICA QUE AQUI SE PROPONE SE COMPLEMENTARA CON ANALISIS ESTADISTICO Y ENSAYOS BIOQUIMICOS CONVENCIONALES. IOFISICA MOLECULAR\MOTORES MOLECULARES\INTERACCIONES ADN-PROTEINAS\CONDENSACION Y SEGREGACION DEL CROMOSOMA\FLUORESCENCIA\PINZAS OPTICAS\PINZAS MAGNETICAS

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