Descripción del proyecto
LA GRAN IMPORTANCIA DE LOS HONGOS FILAMENTOSOS SE DEBE TANTO A SUS POSIBLES EFECTOS BENEFICIOSOS COMO PERJUDICIALES PARA EL HOMBRE, EN LA NATURALEZA, LOS MATERIALES VEGETALES MUERTOS Y EN DESCOMPOSICION CONSTITUYEN LA FUENTE PRINCIPAL DE NUTRIENTES PARA MUCHOS HONGOS FILAMENTOSOS, LAS ENZIMAS HIDROLITICAS (CELULASAS, XILANASAS, PECTINASAS, ETC,) QUE ESTOS ORGANISMOS SINTETIZAN Y SECRETAN, DEGRADAN LOS POLIMEROS VEGETALES DANDO LUGAR A LA LIBERACION DE COMPUESTOS DE MENOR TAMAÑO QUE PUEDEN SER ASIMILADOS COMO NUTRIENTES, ESTAS ENZIMAS HIDROLITICAS, JUNTO CON OTRAS ENZIMAS DE ORIGEN FUNGICO, TIENEN UNA IMPORTANCIA INDUSTRIAL CONSIDERABLE Y ES POR ELLO QUE DURANTE DECADAS SE HAN INVESTIGADO LOS MECANISMOS QUE REGULAN SU PRODUCCION, AUNQUE EL PAPEL DE LOS AZUCARES MONOMERICOS (LIBERADOS POR HIDROLISIS ENZIMATICA A PARTIR DE LOS POLIMEROS COMPLEJOS) EN LOS PROCESOS DE INDUCCION Y REPRESION DE LA PRODUCCION DE ENZIMAS ESTA BIEN ESTABLECIDO, EXISTEN POCOS ESTUDIOS SOBRE LOS MECANISMOS DE ENTRADA DE LOS MISMOS A LA CELULA FUNGICA,EL EQUIPO INVESTIGADOR HA IDENTIFICADO EN EL HONGO FILAMENTOSO ASPERGILLUS NIDULANS VARIOS TRANSPORTADORES DE GLUCOSA CON CARACTERISTICAS CINETICAS DIFERENTES, EN LA CEPA SILVESTRE DE A, NIDULANS LA EXPRESION DE ESTOS TRANSPORTADORES ESTA DETERMINADA POR LA NATURALEZA DE LA FUENTE DE CARBONO PRESENTE EN EL MEDIO, EN ALGUNAS CEPAS MUTANTES, INCLUIDAS AQUELLAS AFECTADAS POR REPRESION POR CATABOLITO DE CARBONO (CCR) HEMOS ENCONTRADO UNA CINETICA DIFERENTE DE LA TOMA DE GLUCOSA, RECIENTEMENTE HEMOS IDENTIFICADO LOS GENES QUE CODIFICAN ESTOS SISTEMAS DE TRANSPORTE Y HEMOS CARACTERIZADO LA FUNCION DE LOS TRANSPORTADORES CODIFICADOS (MSTA, MSTB Y MSTE),BASANDONOS EN NUESTRO TRABAJO PREVIO Y TENIENDO EN CUENTA QUE EN LA ACTUALIDAD SE DISPONE DE LOS GENOMAS SECUENCIADOS DE VARIOS HONGOS FILAMENTOSOS INCLUIDO A, NIDULANS, LA INVESTIGACION QUE PROPONEMOS EN ESTE PROYECTO SE CENTRA EN TRES OBJETIVOS PRINCIPALES:1) CARACTERIZACION DEL TRANSPORTE DE XILOSA, E IDENTIFICACION Y ESTUDIO DE SUS TRANSPORTADORES,2) ESTUDIO DE LOS FENOMENOS DE REGULACION RELACIONADOS CON LA TOMA Y METABOLISMO DE AZUCARES,3) IDENTIFICACION DE NUEVOS TRANSPORTADORES DE GLUCOSA DE RELEVANCIA FISIOLOGICA,PARA ABORDAR ESTOS OBJETIVOS SE REALIZARAN LAS SIGUIENTES TAREAS:1,I) CARACTERIZACION CINETICA DEL TRANSPORTE DE XILOSA,1,II) RASTREO DE GENES POTENCIALES QUE CODIFIQUEN TRANSPORTADORES DE XILOSA USANDO UN MACROARRAY,1,III) CARACTERIZACION DE LOS PRODUCTOS DE LOS GENES QUE CODIFICAN POSIBLES TRANSPORTADORES DE XILOSA,1,IV) MODIFICACION DE LAS CARACTERISTICAS DE INDUCCION / REPRESION POR CAMBIO DE PROMOTORES,2,I) IDENTIFICACION DEL REPRESOR PUTATIVO DE MSTE,2,II) GENERACION DE MUTANTES CCR POTENCIALMENTE RELACIONADOS CON LA SEÑALIZACION DE LA REPRESION POR GLUCOSA,3,I) RASTREO DE MACROARRAY,3,II) CARACTERIZACION CINETICA,3,III) MUTAGENESIS (SI ES NECESARIO),A LARGO PLAZO, LA CAPACIDAD DE MODIFICAR LA TOMA DE AZUCARES, POR EJEMPLO PERMITIENDO LA INTERNALIZACION DE UN INDUCTOR BAJO CONDICIONES EN LAS CUALES NORMALMENTE NO ES TOMADO (EXCLUSION DEL INDUCTOR) O EQUILIBRANDO LA INTERNALIZACION DE AZUCARES REPRESORES CON LAS NECESIDADES METABOLICAS PARA EL CRECIMIENTO Y LA PRODUCCION, PROPORCIONARA UN NIVEL ADICIONAL PARA MANIPULAR LOS HONGOS FILAMENTOSOS COMO FACTORIAS CELULARES CON EL FIN DE MEJORAR SUS CARACTERISTICAS DE PRODUCCION DE ENZIMAS O METABOLITOS DE INTERES, Hongos filamentosos\Aspergillus nidulans\Cinética de toma de azúcares\Transcriptómica\Represión por catabolito de carbono\Regulación génica\Enzimas agroalimentarias\Transducción de señal\Deleción de genes\Exclusión de inductor