Descripción del proyecto
EL OBJETIVO GENERAL DEL PROYECTO ES MEJORAR EL CONTROL DE LA LEISHMANIOSIS EN ESPAÑA MEDIANTE LA BUSQUEDA DE MOLECULAS INMUNOGENICAS EN LA SALIVA DE PHLEBOTOMUS PERNICIOSUS, PRINCIPAL VECTOR DE LA LEISHMANIOSIS EN ESPAÑA, QUE PUEDAN UTILIZARSE COMO COMPONENTES DE UNA VACUNA FRENTE A LA LEISHMANIOSIS, LOS OBJETIVOS CONCRETOS DEL PROYECTO COMPRENDEN: I) ELECTROFORESIS 2D-PAGE DE EXTRACTOS PROTEICOS DE GLANDULAS SALIVALES DE P, PERNICIOSUS, II) WESTERN-BLOT DE LOS GELES CON SUEROS DE CRICETOS Y RATONES BALB/C EXPUESTOS A SUCESIVAS PICADURAS DE P, PERNICIOSUS Y SUEROS HUMANOS (LEISHMANIOSIS VISCERAL Y CUTANEA) Y DE LEISHMANIOSIS CANINA, III) ANALISIS MEDIANTE ESPECTROMETRIA DE MASAS DE LOS SPOTS DE INTERES Y ESTUDIO DE LA HOMOLOGIA DE LOS PEPTIDOS OBTENIDOS EN LAS BASES DE DATOS DE SECUENCIAS, IV) AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE LOS GENES QUE CODIFIQUEN PROTEINAS DE NUESTRO INTERES A PARTIR DE UNA LIBRERIA DE EXPRESION CONSTRUIDA CON EL ARNM OBTENIDO DE LAS GLANDULAS SALIVALES DE P, PERNICIOSUS Y CRIBADO DE LA MISMA CON SUEROS POLICLONALES OBTENIDOS DE CONEJOS Y/O RATONES INMUNIZADOS CON LOS PEPTIDOS IDENTIFICADOS PREVIAMENTE Y/O CON PRODUCTOS DE PCRS GENOMICAS Y OLIGOS DISEÑADOS A PARTIR DE DICHOS PEPTIDOS, V) CLONACION DE LAS MOLECULAS DE INTERES EN VECTORES DE EXPRESION EUCARIOTA, VI) INFECCIONES EXPERIMENTALES DE CRICETOS Y RATONES BALB/C, INMUNIZADOS CON LAS MOLECULAS DE INTERES, POR EXPOSICION A LAS PICADURAS DE P, PERNICIOSUS INFECTADOS EXPERIMENTALMENTE CON PROMASTIGOTES O POR INOCULACION DE PROMASTIGOTES OBTENIDOS DE FLEBOTOMOS INFECTADOS EXPERIMENTALMENTE CON UNA CEPA VIRULENTA DE LEISHMANIA INFANTUM, DETERMINACION DE LA CARGA PARASITARIA Y VALORACION DE LA CAPACIDAD PROTECTORA DE LAS MOLECULAS IDENTIFICADAS, Leishmaniosis\Phlebotomus perniciosus\Leishmania infantum\Saliva\Nuevas dianas\Vacuna\Proteómica