LA INTERACCION MICROORGANISMO PROBIOTICO - MUCOSA: IDENTIFICACION DE ADHESINAS B...
LA INTERACCION MICROORGANISMO PROBIOTICO - MUCOSA: IDENTIFICACION DE ADHESINAS BACTERIANAS Y EVALUACION DE LOS PROTEOGLICANOS COMO RECEPTORES EPITELIALES.
ESTE PROYECTO PRETENDE ESTUDIAR LA INTERACCION ESPECIFICA QUE SE ESTABLECE ENTRE LOS MICROORGANISMOS DE LA MICROBIOTA NORMAL DE OCUPACION Y EL EPITELIO QUE TAPIZA LAS CAVIDADES ORGANICAS. COMO MODELOS DE TRABAJO USAREMOS CEPAS DE...
ESTE PROYECTO PRETENDE ESTUDIAR LA INTERACCION ESPECIFICA QUE SE ESTABLECE ENTRE LOS MICROORGANISMOS DE LA MICROBIOTA NORMAL DE OCUPACION Y EL EPITELIO QUE TAPIZA LAS CAVIDADES ORGANICAS. COMO MODELOS DE TRABAJO USAREMOS CEPAS DE LACTOBACILLUS AISLADAS DE INTESTINO Y VAGINA HUMANAS, LO QUE DARA UNA TRASCENDENCIA APLICADA AL TRABAJO, DEBIDO AL USO DE ESTOS ORGANISMOS COMO PROBIOTICOS Y A LAS CONDICIONES RESTRICTIVAS IMPUESTAS POR EFSA AL RESPECTO. NUESTRA HIPOTESIS DE PARTIDA, AVALADA POR UNA SERIE DE EXPERIMENTOS PRELIMINARES, ES QUE LOS PROTEOGLICANOS DE LA SUPERFICIE EPITELIAL SON LOS RECEPTORES PARA LAS ADHESINAS BACTERIANAS. ASI PUES, EL PROYECTO SE ARTICULA EN LOS CINCO OBJETIVOS SIGUIENTES:IDENTIFICACION Y ANALISIS DE LOS RECEPTORES EPITELIALES. SE DETERMINARA CUALES DE LOS PROTEOGLICANOS DE LA SUPERFICIE CELULAR PRESENTAN MAYOR AFINIDAD POR LAS BACTERIAS, MEDIANTE ESTUDIOS DE COMPETICION Y DE ELIMINACION SELECTIVA.PURIFICACION E IDENTIFICACION DE ADHESINAS BACTERIANAS. LOS EXTRACTOS CELULARES SE PASARAN POR COLUMNAS DE HEPARINA (FORMA PARTE DE ALGUNOS PROTEOGLICANOS), SE IDENTIFICARAN LAS PROTEINAS RETENIDAS, SE CLONARAN LOS GENES RESPECTIVOS, QUE SE SOBREEXPRESARAN PARA REPETIR LOS EXPERIMENTOS DEL OBJETIVO ANTERIOR CON PROTEINAS PURAS.ESTUDIOS DE UNION ADHESINA ¿ RECEPTOR IN VITRO. SE EXTRAERAN LOS PROTEOGLICANOS DE LA SUPERFICIE EPITELIAL Y SE MEDIRA LA CINETICA DE UNION A LAS ADHESINAS PURAS. EL TRABAJO SE COMPLETARA CON MODELIZACIONES DE LA INTERACCION COMO PASO PREVIO A LA MUTAGENESIS DE AMINOACIDOS PRESUNTAMENTE IMPLICADOS EN LA UNION.INFLUENCIA DE LA UNION SOBRE LA EXPRESION GENICA DE LOS LIGANDOS. SE PURIFICARA EL ARN DE LAS LINEAS CELULARES, DE LAS BACTERIAS Y DE LOS CULTIVOS CONJUNTOS PARA DETERMINAR SI LA INTERACCION PROVOCA EXPRESION DIFERENCIAL DE LOS GENES IMPLICADOS EN LA SINTESIS DE PROTEOGLICANOS Y/O ADHESINAS. SE ANALIZARA SI ESTO SE TRADUCE EN UNA VARIACION DE LA CONCENTRACION/AFINIDAD DE LOS LIGANDOS.INFLUENCIA DE FACTORES FISIOLOGICOS SOBRE LA ADHERENCIA. LAS CELULAS EN EL ORGANISMO ESTAN SOMETIDAS A ESTIMULOS EXTERNOS QUE MODULAN SU COMPORTAMIENTO. INVESTIGAREMOS SI HORMONAS COMO LA PROGESTERONA Y EL ESTRADIOL POR UN LADO Y LA BILIS POR OTRO, INFLUYEN EN LA AFINIDAD DE LAS CELULAS EPITELIALES GENITALES E INTESTINALES POR LOS LACTOBACILOS DEL MISMO ORIGEN. EN ESE CASO, ANALIZAREMOS LOS FACTORES QUE DESENCADENAN EL PROCESO.ver más
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