Descripción del proyecto
LOS INTRONES DEL GRUPO II SON ARNS CATALITICOS Y RETROELEMENTOS MOVILES IDENTIFICADOS EN ORGANELAS (EUCARIOTAS INFERIORES Y PLANTAS SUPERIORES) Y GENOMAS BACTERIANOS QUE MADURAN A TRAVES DE UN INTERMEDIARIO EN LAZO, SIGUIENDO UN MECANISMO SIMILAR A LOS INTRONES DEL ESPLICEOSOMA, LOS INTRONES DEL GRUPO II SON CAPACES DE INSERTARSE EN SITIOS DIANA ESPECIFICOS DEL ADN, EL HECHO DE QUE PUEDAN INSERTARSE DENTRO DE ELLOS SECUENCIAS DE ADN, INCLUSO GENES; LA POSIBILIDAD DE SER REDISEÑADOS DE MODO QUE SE PUEDAN INSERTAR VIRTUALMENTE EN CUALQUIER SECUENCIA DE ADN ELEGIDA, EN AUSENCIA DE RECOMBINACION HOMOLOGA, SIMPLEMENTE MODIFICANDO EL ARN DEL INTRON, JUNTO CON LA ALTA FRECUENCIA DE INSERCION Y ESPECIFICIDAD, HACE QUE ESTOS ELEMENTOS GENETICOS TENGAN UNA ENORME POTENCIALIDAD EN INGENIERIA GENETICA, EN EL ANALISIS FUNCIONAL DE GENOMAS Y TERAPIA GENICA, EL OBJETIVO GENERAL DE ESTE PROYECTO ES PROSEGUIR CON EL DESARROLLO DEL INTRON RMINT1 COMO VECTOR MANIPULABLE DE RECONOCIMIENTO GENICO, CONTRIBUYENDO CON ESTE NUEVO SISTEMA DE MUTAGENESIS AL DESARROLLO DE LA GENOMICA FUNCIONAL, EN PARTICULAR EN MICROORGANISMOS Y PLANTAS, LOS OBJETIVOS ESPECIFICOS DE ESTE PROYECTO SON: I) DETERMINAR EL CONTROL DE LA EXPRESION GENICA CAUSADA POR LA INSERCION DEL INTRON RMINT1, II) IDENTIFICAR LA FUNCION DE LA EXTENSION CARBOXI-TERMINAL DEL DOMINIO MATURASA DE LA PROTEINA (REVERSO TRANSCRIPTASA) CODIFICADA POR EL INTRON RMINT1, III) RECONSTITUIR RIBONUCLEOPARTICULAS ACTIVAS DEL INTRON RMINT1 IN VITRO, IV) PROFUNDIZAR EN LAS BASES DEL RECONOCIMIENTO DE LAS SECUENCIAS DE ADN DIANA POR RMINT1 QUE PERMITAN DISEÑAR A PRIORI INTRONES CAPACES DE INVADIR SECUENCIAS ESPECIFICAS, V) CARACTERIZAR LA RESPUESTA DE LA CELULA A LA PRESENCIA Y ACTIVIDAD DE INTRONES DEL GRUPO II EN EL GENOMA BACTERIANO, VI) EXPLORAR EL USO DE INTRONES DEL GRUPO II DERIVADOS DE RMINT1 COMO SISTEMA DE MUTAGENESIS EN PLANTAS, INTRONES GRUPO IIREVERSO TRANSCRIPTASAMATURASARNASPLICINGRETROELEMENTOSGENÓMICA FUNCIONALMICROORGANISMOSPLANTAS