Descripción del proyecto
BOTRYTIS CINEREA ES UN HONGO FITOPATOGENO CAPAZ DE INFECTAR MAS DE DOSCIENTAS ESPECIES VEGETALES, INCLUYENDO UNA AMPLIA VARIEDAD DE PLANTAS IMPORTANTES EN AGRICULTURA, SU CONTROL NO RESULTA SENCILLO POR DIVERSAS RAZONES, ENTRE LAS QUE DESTACA LA CRECIENTE APARICION DE CEPAS RESISTENTES A LOS FUNGICIDAS ACTUALMENTE EN USO, EL DESARROLLO RACIONAL DE ESTRATEGIAS DE CONTROL NOVEDOSAS REQUIERE UN MEJOR CONOCIMIENTO DE LAS INTERACCIONES MOLECULARES CON SUS HOSPEDADORES Y, ESPECIFICAMENTE, DE LA CONTRIBUCION A LA INFECCION DE LOS CIENTOS DE PROTEINAS QUE SE SABE QUE EL HONGO SECRETA, MUCHAS DE ELLAS CON FUNCION DESCONOCIDA, LA GENERACION DE MUTANTES CARENTES DE ESTAS PROTEINAS HA SIDO Y SIGUE SIENDO UN METODO HABITUAL PARA ESTUDIAR EL PAPEL DE LAS MISMAS EN LA VIRULENCIA, PERO SU COMPLEJIDAD TECNICA IMPIDE SU APLICACION A UN NUMERO ELEVADO DE PROTEINAS, ADEMAS, LA ALTA REDUNDANCIA ENTRE LAS PROTEINAS SECRETADAS, A MENUDO CON MULTIPLES ISOFORMAS, CONLLEVA QUE LA MUTACION DE GENES INDIVIDUALES NO RESULTE CON FRECUENCIA EN FENOTIPO ALGUNO, EN ESTE PROYECTO PROPONEMOS UNA APROXIMACION ALTERNATIVA, CONSISTENTE EN LA GENERACION DE UN CONJUNTO DE CEPAS DE LEVADURAS EN EL QUE CADA UNA DE ELLAS EXPRESE UNA DE LAS PROTEINAS QUE SE HAN ENCONTRADO EXPERIMENTALMENTE EN EL SECRETOMA DE B, CINEREA, UN TOTAL DE 327 PROTEINAS, PARA ELLO, PROPONEMOS UN SISTEMA EXPERIMENTAL NOVEDOSO QUE COMBINA LA ALTA TASA DE RECOMBINACION DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE, QUE HACE INNECESARIO NINGUN PASO DE CLONAJE, CON SU POTENCIAL COMO ORGANISMO PRODUCTOR DE PROTEINAS HETEROLOGAS, LA COLECCION DE CEPAS GENERADA PODRA SER RASTREADA EN ESTE PROYECTO, Y EN OTROS POSTERIORES, PARA LA IDENTIFICACION DE CUALQUIER FUNCION PROTEICA CONOCIDA, O HIPOTETICA, SIEMPRE QUE SE DISPONGA O SEA POSIBLE DISEÑAR UN ENSAYO DE LA MISMA, UTILIZANDO ESTA ESTRATEGIA, EN EL PRESENTE PROYECTO PRETENDEMOS IDENTIFICAR PROTEINAS QUE, APLICADAS DE FORMA EXOGENA, MODULEN LA VIRULENCIA DE B, CINEREA Y DE OTROS FITOPATOGENOS SOBRE DOS PLANTAS, ARABIDOPSIS THALIANA Y TABACO, ASIMISMO, PRETENDEMOS IDENTIFICAR PROTEINAS EXTRACELULARES DE B, CINEREA QUE SEAN RECONOCIDAS COMO PAMPS POR EL SISTEMA INMUNE VEGETAL Y PROTEINAS QUE TENGAN ACTIVIDAD MODULADORA SOBRE LA RESPUESTA HIPERSENSIBLE, BOTRYTIS CINEREA\PAMP\EFECTORES\SACCHAROMYCES CEREVISIAE\SECRETOMA