Descripción del proyecto
EN ESTE PROYECTO, ESTUDIAREMOS LA EXOCITOSIS COMO PARADIGMA DE LA ADAPTACION DE LA MAQUINARIA DE TRAFICO VESICULAR EN RESPUESTA A AQUELLAS FLUCTUACIONES TERMICAS QUE DESAFIAN LA DINAMICA DE MEMBRANAS Y LA VIABILIDAD DE LA CELULA.LOS CAMBIOS TERMICOS IMPACTAN DIRECTAMENTE EN LAS PROPIEDADES DE LAS MEMBRANAS Y LA SUPERVIVENCIA DE LOS ORGANISMOS VIVOS. EL ESTUDIO DE LOS EFECTOS QUE PRODUCEN ESTOS CAMBIOS EN LOS MICROORGANISMOS, PARTICULARMENTE SOBRE LOS MECANISMOS DE ADAPTACION PARA CRECER A DIFERENTES TEMPERATURAS, HA CENTRADO LA ATENCION DE DIFERENTES CAMPOS, COMO LA ECOLOGIA, LA BIOLOGIA CELULAR Y LA BIOTECNOLOGIA. LA CONCIENCIACION SOBRE EL CAMBIO CLIMATICO HA EXACERBADO AUN MAS EL INTERES POR ESTA CUESTION. LOS CIENTIFICOS HAN DEDICADO ENORMES ESFUERZOS A INVESTIGAR ESTE PROBLEMA, INCLUSO MEDIANTE EL ANALISIS DE GENOMA, TRANSCRIPTOMA, PROTEOMA Y LIPIDOMA COMPLETOS. LA ADAPTACION HOMOVISCOSA, LA REMODELACION DE LA COMPOSICION LIPIDICA PARA MANTENER LA FLUIDEZ DE LA MEMBRANA, SE CONSIDERA UN MECANISMO UNIVERSAL PRESENTE EN TODOS LOS REINOS DE LA VIDA. SIN EMBARGO, PARECE POCO PROBABLE QUE TALES PERTURBACIONES QUIMICAS NO VAYAN ACOMPAÑADAS DE LA CO-ADAPTACION DEL MECANISMO DE ACCION DE PROTEINAS, PARTICULARMENTE EN ORGANISMOS EUCARIOTAS QUE HAN DESARROLLADO REDES PROTEICAS SOFISTICADAS PARA OPTIMIZAR LA DINAMICA DE MEMBRANAS. DE HECHO, NUESTROS DATOS PRELIMINARES DEMUESTRAN QUE LA RED DE PROTEINAS RESPONSABLE DE LA EXOCITOSIS, TAMBIEN ADAPTA SU MECANISMO DE FUNCION A LA TEMPERATURA AMBIENTAL. DESAFORTUNADAMENTE, LAS LIMITACIONES TECNICAS COARTAN LA CAPACIDAD DE INVESTIGAR EL MECANISMO MOLECULAR DE REDES DE PROTEINAS DIRECTAMENTE EN LA CELULA. LOS ESTUDIOS IN VITRO, QUE PUEDEN BRINDAR MAYOR DETALLE Y CUANTIFICACIONES PRECISAS, SON INCOMPLETOS DEBIDO A LA IMPOSIBILIDAD DE RECONSTRUIR PROCESOS CELULARES, ESPECIALMENTE CUANDO ESTOS INVOLUCRAN MEMBRANAS DE COMPOSICION QUIMICA COMPLEJA.EN ESTE PROYECTO APLICAREMOS UN ENFOQUE METODOLOGICO QUE HEMOS DESARROLLADO DURANTE LOS ULTIMOS AÑOS PARA RESOLVER EL MECANISMO DE EXOCITOSIS IN SITU. SE TRATA DE UNA TECNOLOGIA QUE COMBINA MICROSCOPIA OPTICA AVANZADA E INGENIERIA CELULAR PARA RECONSTRUIR LA ARQUITECTURA 3D Y LA DINAMICA DE REDES DE PROTEINAS. ESTO SE COMPLEMENTARA CON ENSAYOS BIOQUIMICOS DE INTERACTOMICA Y EL ANALISIS ULTRAESTRUCTURAL POR CRIO-TOMOGRAFIA ELECTRONICA. ESTA PLATAFORMA TECNOLOGICA UNICA NOS PERMITIRA IDENTIFICAR LOS MECANISMOS QUE USAN LAS LEVADURAS PARA MODULAR LA EXOCITOSIS EN DIFERENTES CONDICIONES TERMICAS.NOS CENTRAREMOS EN ESPECIES DE SACCHAROMYCOTINA, PORQUE ESTAS LEVADURAS HAN DIVERGIDO PARA CRECER A DIFERENTES TEMPERATURAS. ADEMAS, LAS SACCHAROMYCOTINA SE USAN AMPLIAMENTE EN LA INDUSTRIA DE ALIMENTOS Y BEBIDAS, DONDE ESTAN EXPUESTAS A TEMPERATURAS RESTRICTIVAS. DADO QUE LA VIA DE LA EXOCITOSIS SE CONSERVA EN TODOS LOS EUCARIOTAS Y ES FUNDAMENTAL PARA LA SUPERVIVENCIA CELULAR, TAMBIEN REPRESENTA UN BUEN EJEMPLO PARA EL ESTUDIO DE MECANISMOS QUE HAN EVOLUCIONADO PARA SUPERAR LA PRESION EVOLUTIVA. USAREMOS LA EXOCITOSIS COMO MODELO DE ESTUDIO DE LA PLASTICIDAD EN REDES DE PROTEINAS INVOLUCRADAS EN LA FUSION DE MEMBRANAS EN GENERAL, Y EL TRANSPORTE DE VESICULAS EN PARTICULAR.FINALMENTE, EL ANALISIS COMPARATIVO ENTRE SACCHAROMYCES CEREVISIAE Y SACCHAROMYCES UVARUM, NOS PERMITIRA EXTRAPOLAR MECANISMOS ADAPTATIVOS GENERALES EN ORGANISMOS EUCARIOTAS QUE HAN EVOLUCIONADO PARA CRECER EN DIFERENTES RANGOS DE TEMPERATURA, ASI COMO LA RELEVANCIA DE NUESTROS HALLAZGOS. XOCITOSIS\CRYOET\BIOLOGIA ESTRUCTURAL INTEGRATIVA\NANOSCOPIA\ARQUITECTURA MOLECULAR\MICROSCOPIA EN CELULAS VIVAS\MECANISMO MOLECULAR\BIOFISICA\LEVADURA