ESTUDIO DE LA TOPOLOGIA DEL DNA DURANTE LA REPLICACION
EN EL PRESENTE PROYECTO DE INVESTIGACION NOS PROPONEMOS CARACTERIZAR EL PAPEL QUE JUEGA CADA TOPOISOMERASA EN LA REGULACION DEL SUPERENROLLAMIENTO DEL DNA A LO LARGO DEL PROCESO REPLICATIVO Y SU PAPEL EN EL ENCADENAMIENTO Y DESENC...
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Financiación
concedida
El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto
el día 2008-01-01
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Descripción del proyecto
EN EL PRESENTE PROYECTO DE INVESTIGACION NOS PROPONEMOS CARACTERIZAR EL PAPEL QUE JUEGA CADA TOPOISOMERASA EN LA REGULACION DEL SUPERENROLLAMIENTO DEL DNA A LO LARGO DEL PROCESO REPLICATIVO Y SU PAPEL EN EL ENCADENAMIENTO Y DESENCADENAMIENTO ASI COMO EN EL ANUDAMIENTO Y DESANUDAMIENTO DE LAS CROMATIDAS HERMANAS, PARA ELLO UTILIZAREMOS LA ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL EN GELES DE AGAROSA EN COMBINACION CON LA MICROSCOPIA ELECTRONICA Y OTRAS TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR PARA ANALIZAR EL SUPERENROLLAMIENTO, ENCADENAMIENTO Y ANUDAMIENTO DE INTERMEDIARIOS DE REPLICACION CON LAS HORQUILLAS DETENIDAS A DISTINTAS DISTANCIAS DEL ORIGEN EN TRES SISTEMAS BIOLOGICOS DISTINTOS: PLASMIDOS DE E, COLI, MINICROMOSOMAS DE S, CEREVISIAE Y MINICROMOSOMAS DERIVADOS DEL VIRUS DE EPSTEIN-BARR EN LINFOCITOS DE LA ESTIRPE RAJI (DERIVADOS DE UN LINFOMA DE BURKITT EBNA1-POSITIVO), PARA BLOQUEAR EL PROGRESO DE LAS HORQUILLAS DE REPLICACION SE UTILIZARA EL SISTEMA TER/TUS EN E, COLI, EL SISTEMA RFB/FOB1P EN S, CEREVISIAE Y 5 ELEMENTOS DE LA FAMILIA DE REPETICIONES DE ORIP DEL VIRUS DE EPSTEIN-BARR EN CELULAS RAJI, EL ESTUDIO SE LLEVARA A CABO EN CONDICIONES CONTROL Y LUEGO DE LA INHIBICION DE LA ACTIVIDAD DE TOPOISOMERASAS ESPECIFICAS EN LINEAS PORTADORAS DE MUTACIONES, MEDIANTE EL EMPLEO DE INHIBIDORES ESPECIFICOS Y POR SILENCIAMIENTO MEDIADO POR RNA DE INTERFERENCIA, LA COMPARACION DE LOS RESULTADOS QUE OBTENGAMOS EN LINEAS PORTADORAS DE MUTACIONES Y MEDIANTE EL SILENCIAMIENTO MEDIADO POR RNA DE INTERFERENCIA CON AQUELLOS DERIVADOS DEL TRATAMIENTO CON INHIBIDORES NOS PERMITIRAN RECONOCER LOS EFECTOS PRIMARIOS Y SECUNDARIOS DE LOS MISMOS, ASI COMO IDENTIFICAR EL MECANISMO DE ACCION DE OTROS POSIBLES INHIBIDORES CUYO MECANISMO DE ACCION A NIVEL MOLECULAR ES AUN DESCONOCIDO, REPLICACIÓN\TOPOLOGÍA\SUPERENROLLAMIENTO\ENCADENAMIENTO\ANUDAMIENTO\RECOMBINACIÓN