Descripción del proyecto
EL SUBPROYECTO 3 TENDRA COMO OBJETIVO ANALIZAR LOS EFECTOS DEL BISFENOL A, EE2 Y CIMETIDINA EN LAS CELULAS DE LA LINEA GERMINAL MASCULINA, UTILIZANDO COMO MODELO EL PEZ CEBRA, YA QUE PERMITE LA REALIZACION DE PROTOCOLOS DE EXPOSICION INVIABLES EN ESPECIES COMERCIALES, LA CONTRIBUCION PATERNA ES CRUCIAL PARA EL CONTROL DEL DESARROLLO EMBRIONARIO TEMPRANO A TRAVES DE LA EXPRESION DE DETERMINADOS GENES, LA TRANSCRIPCION DE DETERMINADOS ARNMS Y EL MANTENIMIENTO DE UN CORRECTO PATRON EPIGENETICO, QUE ES REPRODUCIDO EN EL EMBRION 24HPF, LOS CONTAMINANTES EMERGENTES PUEDEN MODIFICAR DICHA INFORMACION Y AFECTAR, COMO YA SE HA COMPROBADO, AL DESARROLLO DE LA F1, NUESTRO ESTUDIO ANALIZARA EN ESPERMATOZOIDES DE ANIMALES EXPUESTOS A LOS TOXICOS DURANTE LA VIDA EMBRIONARIA O ADULTA, LOS POTENCIALES DAÑOS EN EL GENOMA, TRANSCRIPTOMA Y EPIGENOMA, IDENTIFICANDO GENES CANDIDATOS DE DAÑO GENOTOXICO Y EPIGENOTOXICO, PARA ELLO SE EMPLEARAN TECNICAS PUESTAS A PUNTO EN NUESTRO LABORATORIO, COLABORANDO CON OTROS EQUIPOS PARA LA REALIZACION DEL RRBS, ESTOS ESTUDIOS NOS PERMITIRAN IDENTIFICAR LAS FASES MAS SENSIBLES Y LOS ELEMENTOS POTENCIALMENTE AFECTADOS POR LOS AGENTES TOXICOS, IDENTIFICANDO LOS GENES O PROMOTORES MAS VULNERABLES Y ESTABLECIENDO UN PANEL DE INDICADORES DE DAÑO EN LA LINEA GERMINAL, EN LA DESCENDENCIA DE LOS PROGENITORES EXPUESTOS SE EVALUARA LA MORFOGENESIS, CON ESPECIAL ATENCION A LA FORMACION DEL CORAZON, LA CAPACIDAD REPRODUCTORA, RESPUESTA INMUNE, CAPACIDAD DE REGENERACION DE TEJIDOS Y TASA DE ENVEJECIMIENTO, UTILIZANDO ESTUDIOS MORFOLOGICOS, FUNCIONALES Y DE EXPRESION GENICA, LA POSIBLE TRANSMISION DE LA INFORMACION PATERNA A LAS CELULAS DE LA LINEA GERMINAL DE LA F1, QUE PROVOCARIAN UNA HERENCIA TRANSGENERACIONAL A LA F2 SE ANALIZARA MEDIANTE EL ANALISIS DE LAS CELULAS DE LA LINEA GERMINAL DE LOS MARCADORES DE TOXICIDAD PREVIAMENTE DEFINIDOS, EN SU CASO, TAMBIEN SERA EVALUADO EL DESARROLLO DE LA F2 UTILIZANDO LOS MISMOS PARAMETROS QUE CON LA F1, SE EVALUARA ADEMAS EL POSIBLE RESCATE NUTRICIONAL DE LOS DAÑOS EPIGENOTOXICOS, QUE PODRIAN DEBERSE A UNA MENOR ACTIVIDAD DE LAS METIL TRANSFERASAS O A UNA MENOR DISPONIBILIDAD DE GRUPOS METILO, MEDIANTE LA ADMINISTRACION DE DIETAS RICAS EN FOLATOS, LA INFLUENCIA DEL MICROAMBIENTE SOMATICO EN LA RECUPERACION DE LOS EFECTOS TOXICOS SOBRE LAS CELULAS DE LA LINEA GERMINAL SERA ESTUDIADA MEDIANTE EL TRASPLANTE DE CELULAS GERMINALES ENTRE ANIMALES EXPUESTOS Y ANIMALES CONTROL PREVIAMENTE ESTERILIZADOS POR ELIMINACION DE SUS CELULAS GERMINALES CON MORFOLINO DND,PARA LA REALIZACION DEL ESTUDIO SE UTILIZARAN LINEAS WILD TYPE (AB) Y TRANSGENICAS (VASA::EGFP), QUE PERMITIRAN EL AISLAMIENTO, TRANSPLANTE Y ESTUDIO DE LA EVOLUCION DE LAS CELULAS DE LA LINEA GERMINAL PEZ CEBRA\CONTAMINANTES EMERGENTES\ESPERMATOGENESIS\HERENCIA TRANSGENERACIONAL\EPIGENETICA\GENOTOXICIDAD\INFERTILIDAD MASCULINA