Descripción del proyecto
EL RENDIMIENTO REPRODUCTIVO EN LAS ESPECIES MAS RELEVANTES DE UNGULADOS DE GRANJA (BOVINO, OVINO, CAPRINO Y PORCINO) SE ENCUENTRA AFECTADO NEGATIVAMENTE POR LAS PERDIDAS TEMPRANAS DE GESTACION, QUE PUEDEN ALCANZAR HASTA EL 50% EN ANIMALES DE PRODUCCION INTENSIVA, CAUSANDO UN CLARO IMPACTO ECONOMICO Y MEDIOAMBIENTAL. LA MORTALIDAD EMBRIONARIA ENTRE EL ESTADIO DE BLASTOCISTO Y LA IMPLANTACION ES LA PRINCIPAL RESPONSABLE DE ESTOS FALLOS REPRODUCTIVOS. PARA MEJORAR LA EFICIENCIA REPRODUCTIVA, ES FUNDAMENTAL EXPLORAR LOS COMPLEJOS PROCESOS DEL DESARROLLO QUE TIENEN LUGAR DURANTE ESTE PERIODO, QUE INCLUYEN EL DESARROLLO DE LOS PRIMEROS LINAJES CELULARES (TROFOECTODERMO, EPIBLASTO E HIPOBLASTO) Y LA GASTRULACION. SIN EMBARGO, LOS ESTUDIOS LLEVADOS A CABO HASTA AHORA EN UNGULADOS DE GRANJA SE HAN VISTO LIMITADOS POR LA FALTA DE HERRAMIENTAS EFICIENTES DE EDICION GENETICA Y PORQUE SOLO PODIAN LLEVARSE A CABO IN VIVO, CONLLEVANDO UN ALTO ESFUERZO Y COSTE ECONOMICO. NUESTRO GRUPO DE INVESTIGACION HA DESARROLLADO RECIENTEMENTE UN NOVEDOSO SISTEMA DE CULTIVO QUE MANTIENE EL DESARROLLO EMBRIONARIO IN VITRO DESDE EL ESTADIO DE BLASTOCISTO HASTA LA GASTRULACION EN LA OVEJA. EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES CARACTERIZAR ESTE SISTEMA EN PROFUNDIDAD Y EMPLEARLO COMO UNA PLATAFORMA PARA EXPLORAR LOS MECANISMOS MOLECULARES CLAVE QUE REGULAN EL DESARROLLO POST-BLASTOCISTO Y LA DIFERENCIACION DE LOS PRIMEROS LINAJES CELULARES EN EL EMBRION DE OVEJA. EN PRIMER LUGAR, LLEVAREMOS A CABO UNA CARACTERIZACION TRANSCRIPCIONAL A NIVEL DE CELULAS INDIVIDUALES EN EMBRIONES POST-BLASTOCISTO CULTIVADOS IN VITRO EN NUESTRO SISTEMA, Y LOS COMPARAREMOS CON EMBRIONES OBTENIDOS IN VIVO EN ESTADIOS DE DESARROLLO EQUIVALENTES. ADEMAS, REALIZAREMOS ANALISIS DE PERDIDA DE FUNCION DE GENES INVOLUCRADOS EN EL DESARROLLO DE LOS PRIMEROS LINAJES CELULARES MEDIANTE LA TECNOLOGIA CRISPR-CAS9, Y CARACTERIZAREMOS LAS PRINCIPALES VIAS DE SEÑALIZACION INVOLUCRADAS EN EL DESARROLLO POST-BLASTOCISTO MEDIANTE EL USO DE INHIBIDORES ESPECIFICOS Y DE MODELOS DE EMBRIONES KNOCK-OUT. EL RESULTADO DE ESTOS EXPERIMENTOS FUNCIONALES SERA ANALIZADO POR PRIMERA VEZ COMPLETAMENTE IN VITRO A PARTIR DEL ESTADIO DE BLASTOCISTO, EVITANDO EL USO DE ANIMALES DE EXPERIMENTACION. ESTE PROYECTO MULTIDISCIPLINAR, QUE COMBINA MANEJO REPRODUCTIVO ANIMAL, EMBRIOLOGIA, TRANSCRIPTOMICA, EDICION GENETICA Y BIOINFORMATICA, NOS PERMITIRA DESVELAR LAS REDES REGULADORAS CLAVE ENCARGADAS DE COORDINAR EL DESARROLLO EMBRIONARIO DURANTE EL PERIODO EN EL QUE MAYOR MORTALIDAD SE OBSERVA EN UNGULADOS DE GRANJA. EN ULTIMA INSTANCIA, ESTO NOS PERMITIRA EXPLORAR EL FUNDAMENTO DE LAS PERDIDAS TEMPRANAS DE GESTACION EN ESTAS ESPECIES Y DISEÑAR ESTRATEGIAS APROPIADAS PARA REDUCIRLAS. MBRION\PERDIDAS DE GESTACION\UNGULADOS DE GRANJA\TRANSGENESIS\GASTRULATION\LINAJES CELULARES\OVINO\POST-BLASTOCISTO