SISTEMAS DE MADURACION BIFASICA PARA MEJORAR LA COMPETENCIA EMBRIONARIA DE LOS O...
SISTEMAS DE MADURACION BIFASICA PARA MEJORAR LA COMPETENCIA EMBRIONARIA DE LOS OOCITOS CAPRINOS
LA PRODUCCION IN VITRO DE EMBRIONES (PIVE) ES UNA ART (ASSISTED REPRODUCTIVE TECHNOLOGY) CON GRAN IMPACTO EN LA PRODUCCION ANIMAL, DEBIDO A LA EXTRAORDINARIA POSIBILIDAD DE DIFUSION DE LAS CARACTERISTICAS GENETICAS DE LAS HEMBRAS...
LA PRODUCCION IN VITRO DE EMBRIONES (PIVE) ES UNA ART (ASSISTED REPRODUCTIVE TECHNOLOGY) CON GRAN IMPACTO EN LA PRODUCCION ANIMAL, DEBIDO A LA EXTRAORDINARIA POSIBILIDAD DE DIFUSION DE LAS CARACTERISTICAS GENETICAS DE LAS HEMBRAS SELECTAS, DURANTE LOS ULTIMOS 30 AÑOS SE HAN REALIZADO MUCHOS TRABAJOS SOBRE ESTE TEMA, PRINCIPALMENTE EN BOVINO Y PORCINO, EN PEQUEÑOS RUMIANTES, Y ESPECIALMENTE EN CABRAS, SON MUCHO MENOS LOS EQUIPOS QUE ESTUDIAN ESTA LINEA DE INVESTIGACION, EN TODAS LAS ESPECIES, PERO SOBRE TODO EN LAS MENOS ESTUDIADAS, LOS RESULTADOS EN PRODUCCION IN VITRO DE BLASTOCISTOS NO HAN MEJORADO SIGNIFICATIVAMENTE AUNQUE LOS PROGRESOS SON EVIDENTES, EL PRINCIPAL PROBLEMA ES QUE LOS RESULTADOS DE LOS PROGRAMAS DE PIVE SON VARIABLES E IMPREDECIBLES DEBIDO EN PARTE A LA ESPONTANEA E INCONTROLADA REINICIACION DE LA MEIOSIS QUE SE PRODUCE INMEDIATAMENTE DESPUES DE LIBERAR EL OOCITO DEL FOLICULO, ADEMAS, EN OOCITOS PROCEDENTES DE FOLICULOS PEQUEÑOS Y MEDIANOS, COMO EN EL CASO DE LAS HEMBRAS PREPUBERES, EL CITOPLASMA DEL OOCITO ES INMADURO Y POCO COMPETENTE PARA PRODUCIR UN EMBRION VIABLE, ESTOS DOS FACTORES, DESCONOCIMIENTO DEL ESTADO NUCLEAR AL INICIARSE LA MIV Y CITOPLASMA INMADURO, NOS PRODUCE UN OOCITO POCO COMPETENTE PARA LA PIVE, EN COLABORACION CON LA UNIVERSIDAD DE ADELAIDA, EL PRESENTE PROYECTO PRETENDE PREPARAR UN PROTOCOLO DE PIVE BASADO EN UNA MADURACION BIFASICA CON 2 ETAPAS: 1) PREMADURACION CON COMPUESTOS, COMO LOS PEPTIDOS NATRIURETICOS TIPO C (CNP), CAPACES DE PARAR LA MEIOSIS CON EL OBJETO DE PERMITIR UN MAYOR CRECIMIENTO Y PREPARACION DEL OOCITO, Y CON FORSKOLIN Y 3-ISOBUTYL-1-METHYLXANTHINE (IBMX), COMPUESTOS QUE PERMITIRIAN UN INCREMENTO DEL CAMP INTRACITOPLASMATICO DE LOS COCS Y EL MANTENIMIENTO DE LAS UNIONES GAP, EN LA ETAPA 2, LOS OOCITOS PREMADURADOS PASARIAN A LAS CONDICIONES DE MIV CONVENCIONAL, ESTE SISTEMA BIFASICO DE MIV SERA PROBADO EN PRODUCCION DE EMBRIONES UTILIZANDO LA FIV, LA ICSI Y LA ACTIVACION PARTENOGENETICA, ADEMAS, Y DEBIDO AL LARGO PROCESO DE ESTE PROTOCOLO DE PIVE, LOS RADICALES DE OXIGENO (ROS) PODRIAN PROVOCAR UN FACTOR DE TOXICIDAD EN LAS CELULAS, ASI, PARA INTENTAR CONTROLAR LA PRODUCCION Y EFECTO DE LOS ROS, ESTUDIAREMOS EL EFECTO DE LA ADICION EN LOS MEDIOS FIV Y DE CULTIVO EMBRIONARIO DE DISTINTAS DOSIS DE MELATONINA, PODEROSO COMPUESTO DE LIMPIEZA DE LOS ROS, SOBRE LA PRODUCCION Y CALIDAD DE LOS BLASTOCISTOS, LA ULTIMA FINALIDAD ES DISEÑAR UN PROTOCOLO DE MIV QUE NOS PERMITA MEJORAR LA COMPETENCIA DE OOCITOS DE BAJA CALIDAD, COMO SON LOS DE PREPUBERES, PROCEDENTES EN SU MAYORIA DE FOLICULOS PEQUEÑOS, SE ANALIZARA, LA PARADA MEOITICA DE LOS OOCITOS DURANTE LA PREMADURACION MEDIANTE LA TINCION CON ORCEINA, EL CRECIMIENTO DE ESTOS MEDIANTE LA TINCION DE BCB, LA CONCENTRACION DE CAMP DESPUES DE LA MIV POR RADIOINMUNOENSAYO, LAS UNIONES GAP MEDIANTE LA MICROINYECCION DEL COLORANTE FLUORESCENTE LUCIFER AMARILLO EN EL OOCITO, LOS COMPUESTOS ROS Y LA CONCENTRACION DE GLUTATION (GSH) MEDIANTE TINCIONES FLUORESCENTES, LA ACUMULACION TOTAL DE RNA MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRIA, Y DE DNA MITOCONDRIAL POR QPCR, EL GRADO DE APOPTOSIS POR TUNEL, LA TRANSCRIPCION DE GENES RELACIONADOS CON LA MADURACION OOCITARIA, LA OXIDACION CELULAR Y EL DESARROLLO EMBRIONARIO, FINALMENTE EL ULTIMO OBJETIVO ES DISEÑAR UN PROTOCOLO DE MADURACION BIFASICO QUE NOS PROPORCIONE MEJORES RESULTADOS DE PRODUCCION DE BLASTOCISTOS EN CANTIDAD Y CALIDAD, CABRA\REPRODUCCION\COMPETENCIA OOCITARIA\EMBRIÓN\CAMPver más
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