Descripción del proyecto
EL ANALISIS DE CELULAS INDIVIDUALES REPRESENTA UNO DE LOS MAYORES RETOS EN EL DESARROLLO DE METODOS ANALITICOS, LA INFORMACION SOBRE LA PRESENCIA DE PROTEINAS, LIPIDOS, PERO TAMBIEN METALES EN CELULAS INDIVIDUALES PUEDE OFRECER UNA MEJOR VISION SOBRE LA ORGANIZACION DE LOS ORGANISMOS VIVOS, ESTA INFORMACION CUALITATIVA Y CUANTITATIVA REQUIERE DE HERRAMIENTAS ANALITICAS CAPACES DE ABORDAR DIFERENTES PROBLEMAS, ALTA SENSIBILIDAD, SELECTIVIDAD Y CAPACIDAD DE CUANTIFICACION SON ALGUNOS DE LOS REQUISITOS NECESARIOS PARA ANALIZAR CELULAS INDIVIDUALES, LA BASE DE LA VIDA,LA ESPECTROMETRIA DE MASAS CON FUENTE DE PLASMA DE ACOPLAMIENTO INDUCTIVO (ICP-MS) ES HOY EN DIA EL METODO DE RUTINA PARA LA DETERMINACION DE METALES Y SEMIMETALES (Y ALGUN NO METAL) CON ALTA SENSIBILIDAD, AVANCES RECIENTES HAN MOSTRADO QUE LAS FIGURAS DE MERITO DE UN ICP-MS SON MAS QUE SUFICIENTES PARA CARACTERIZAR ESTRUCTURAS PEQUEÑAS INDIVIDUALES COMO NANOPARTICULAS O CELULAS,EN ESTE SENTIDO, EL PRESENTE PROYECTO PRETENDE PROMOVER EL ANALISIS DE CELULAS INDIVIDUALES MEDIANTE ICP-MS PARA ESTUDIAR SU CONTENIDO ELEMENTAL CON ESPECIAL RELEVANCIA PARA APLICACIONES NUTRICIONALES, FARMACEUTICAS Y MEDICAS, EL OBJETIVO PRINCIPAL ES DESARROLLAR UNA METODOLOGIA ROBUSTA QUE PERMITA QUE LA TECNICA DE SINGLE CELL ICP-MS (SC-ICP-MS) SE INCORPORE EN LOS ANALISIS DE RUTINA EN DIVERSOS CAMPOS DE APLICACION,EL PROYECTO PROPUESTO IMPLICA, PRIMERAMENTE, EL DESARROLLO Y OPTIMIZACION DE LA METODOLOGIA ANALITICA, SE EVALUARA EL RENDIMIENTO DEL TRANSPORTE DE CELULAS EUCARIOTAS A LA FUENTE DE IONIZACION DE DIFERENTES NEBULIZADORES DE BAJO FLUJO, EL SISTEMA OPTIMIZADO, SE APLICARA AL ANALISIS DE LEVADURAS SELENIZADAS (S, CEREVISIAE) CON EL FIN DE DETERMINAR IMPORTANTES PARAMETROS DE ESTE SUPLEMENTO ALIMENTICIO COMO EL PORCENTAJE DE CELULAS QUE CONTIENEN SELENIO Y LA CONCENTRACION POR CELULA, RESPECTO A ESTO, LA PRESENCIA DE NANOPARTICULAS DE SELENIO SERA ESTUDIADA TANTO POR SINGLE PARTICLE ICP-MS COMO POR CROMATOGRAFIA LIQUIDA ACOPLADA A ICP-MS, PARA ESTE PROPOSITO, SE PRETENDE DESARROLLAR UN SISTEMA PARA LA LISIS CELULAR EN LINEA, POR EJEMPLO, ROMPER LAS CELULAS QUE ENTRAN POR EL SISTEMA MEDIANTE ULTRASONIDOS, LIBERANDO ASI LAS NANOPARTICULAS QUE CONTENGAN PARA SU ANALISIS POR SINGLE PARTICLE ICP-MS, ESTA APROXIMACION PERMITE ELUCIDAR EL NUMERO DE NANOPARTICULAS INCORPORADAS, UN IMPORTANTE PARAMETRO PARA INVESTIGACION FARMACEUTICA, TOXICOLOGICA Y MEDICA,PARTE DEL PROYECTO SERA DEDICADO A LA SINTESIS DE NANOPARTICULAS DE OXIDO DE HIERRO SUPERPARAMAGNETICAS, ESTAS PARTICULAS (< 20 NM) SERAN RECUBIERTAS POR UNA CAPA DE DIOXIDO DE SILICIO POR HIDROLISIS Y POLICONDENSACION DE TEOS, ESTA SUPERFICIE PERMITE LA FUNCIONALIZACION CON (3-MERCAPTOPROPIL)TRIMETOXISILANO, SE PUEDEN CONSEGUIR MODIFICACIONES ADICIONALES CON COMPLEJOS DE RU (PARA SER PROBADOS COMO DROGAS CITOSTATICAS) O ANTICUERPOS (PARA EL RECONOCIMIENTO ESPECIFICO DE CELULAS CANCEROSAS), SE INCUBARAN VARIAS LINEAS CELULARES CON ESTAS NANOPARTICULAS MODIFICADAS CON LAS DROGAS DE RU, LA CAPTACION CELULAR SERA MEDIDA POR SC-ICP-MS ACOMPAÑADA DE TESTS FISIOLOGICOS PARA OBTENER INFORMACION DE SUS PROPIEDADES TOXICOLOGICAS, POR OTRA PARTE, SE EVALUARA EL USO DE PARTICULAS MODIFICADAS CON ANTICUERPOS PARA LA IDENTIFICACION DE SUBPOBLACIONES CELULARES,EN CONJUNTO, ESTE PROYECTO INTERDISCIPLINAR PRETENDE PROPORCIONAR UNA METODOLOGIA ROBUSTA DE SC-ICP-MS CON APLICACIONES SIGNIFICANTES EN LA INVESTIGACION NUTRICIONAL, FARMACEUTICA Y MEDICA, ICP-MS\ANÁLISIS DE CÉLULAS INDIVIDUALES\DESARROLLO DE MÉTODOS ANALÍTICOS\INCORPORACIÓN CELULAR DE NANOPARTÍCULAS\SÍNTESIS DE NANOPARTÍCULAS DE FE3O4\ESTUDIOS TOXICOLÓGICOS