Descripción del proyecto
LOS ESTEROIDES, TANTO SINTETICOS COMO ENDOGENOS, SON SUSTANTCIAS ANABOLIZANTES CUYO CONSUMO EN EL DEPORTE ESTA PROHIBIDO, LOS ANALISIS DE CONTROL DEL DOPAJE MEDIANTE ESTAS SUSTANCIAS REQUIEREN ALCANZAR LIMITES DE DETECCION DE 10 NG/ML, EN EL CASO DE ESTEROIDES SINTETICOS EL ANALISIS SE LLEVA A CABO MEDIANTE GC CON ESPECTROMETRIA DE MASAS (GC-MS), CON AL MENOS TRES IONES PARA LA IDENTIFICACION, EN EL CASO DE ESTEROIDES ENDOGENOS SE REQUIERE UN ANALISIS POR GC CON CELDA DE COMBUSTION Y ANALISIS POR ESPECTROMETRIA DE MASAS DE RELACIONES ISOTOPICAS (GC-C-IRMS), LA MUESTRA DE ORINA REQUIERE UNA ETAPA PREVIA DE PREPARACION CONSISTENTE EN UNA EXTRACCION, HIDROLISIS, LIMPIEZA DEL EXTRACTO HIDROLIZADO Y DERIVATIZACION, SIN EMBARGO PARA ALCANZAR LOS LIMITES DE DETECCION REQUERIDOS POR LA AGENCIA MUNDIAL ANTIDOPAJE, WADA, ES NECESARIO AUMENTAR LA SENSIBILIDAD Y SELECTIVIDAD DEL METODO ANALITICO, LO QUE ALGUNOS GRUPOS HAN ABORDADO INTRODUCIENDO UNA ETAPA DE HPLC OFF-LINE, EN EL PRESENTE PROYECTO SE PRETENDE ALCANZAR ESTOS OBJETIVOS MEDIANTE EL EMPLEO DEL ACOPLAMIENTO DIRECTO DE CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS-CROMATOGRAFIA DE GASES (LC-GC) USANDO LA INTERFASE TOTAD, DESARROLLADA Y PATENTADA POR EL EQUIPO DE INVESTIGACION DE LA UCLM, ESTA METODOLOGIA ANALITICA PERMITE TRANSFERIR A GC TODA LA FRACCION DE LC QUE CONTIENE LOS ANALITOS Y ADEMAS PROPORCIONA UNA MEJOR RELACION SEÑAL/RUIDO AL OBTENERSE EXTRACTOS MAS LIMPIOS LO QUE, EN PRINCIPIO, PODRIA PERMITIR AUMENTAR LA SENSIBILIDAD EN 1 O 2 ORDENES DE MAGNITUD, SE PRETENDEN DESARROLLAR DOS METODOS DE ANALISIS, PARA POSTERIORMENTE SELECCIONAR AQUEL QUE PROPORCIONE MAYORES VENTAJAS, EN EL PRIMER METODO EL EXTRACTO HIDROLIZADO SE DERIVATIZA (OFF-LINE) Y SE ANALIZA POR LC-GC, Y EN EL SEGUNDO, EL EXTRACTO HIDROLIZADO SE INYECTA EN EL SISTEMA LC-GC, EN EL QUE SE LLEVA A CABO LA DERIVATIZACION ON-LINE, EL OBJETIVO DEL PRESENTE PROYECTO ES, POR TANTO, DESARROLLAR UN METODO SENSIBLE, ROBUSTO Y FIABLE DE DETERMINACION DE ESTEROIDES EN ORINA, QUE PERMITA ALCANZAR LOS LIMITES DE DETECCION REQUERIDOS PARA LLEVAR A CABO UN CONTROL EFICAZ DEL EMPLEO DE ESTEROIDES ANABOLIZANTES COMO SUSTANCIAS DOPANTES, ACOPLAMIENTO DIRECTO LC-GC\ESPECTROMETRIA DE MASAS\RELACIONES ISOTOPICAS\DOPAJE