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BIO2008-00133

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DESARROLLO DE HERRAMIENTAS DE MODIFICACION GENETICA DE CELULAS DE MAMIFERO BASAD...

DESARROLLO DE HERRAMIENTAS DE MODIFICACION GENETICA DE CELULAS DE MAMIFERO BASADAS EN SISTEMAS DE SECRECION TIPO IV BACTERIANOS. LOS SISTEMAS DE SECRECION TIPO IV (T4SS) BACTERIANOS SON COMPLEJOS MULTIPROTEICOS TRANSMEMBRANALES DEDICADOS A LA SECRECION SELECTIVA DE MACROMOLECULAS, TRABAJAMOS EN DOS T4SS CON UN ALTO NIVEL DE HOMOLOGIA PERO MUY DISTINTOS PAPE... ver más

01/01/2008

UNICAN

145K€

Presupuesto del proyecto: 145K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE CANTABRIA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 472

Fecha límite participación Sin fecha límite de participación.

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2008-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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UNICAN

Lider

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE CANTABRIA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 472

Presupuesto del proyecto 145K€

Fecha límite de participación Sin fecha límite de participación.

Descripción del proyecto LOS SISTEMAS DE SECRECION TIPO IV (T4SS) BACTERIANOS SON COMPLEJOS MULTIPROTEICOS TRANSMEMBRANALES DEDICADOS A LA SECRECION SELECTIVA DE MACROMOLECULAS, TRABAJAMOS EN DOS T4SS CON UN ALTO NIVEL DE HOMOLOGIA PERO MUY DISTINTOS PAPELES BIOLOGICOS: EL IMPLICADO EN LA CONJUGACION DEL PLASMIDO R388, Y EL IMPLICADO EN LA VIRULENCIA DEL PATOGENO INTRACELULAR HUMANO BARTONELLA SPP, NUESTRO PRIMER OBJETIVO ES ANALIZAR A NIVEL MOLECULAR LAS SIMILITUDES Y DIFERENCIAS ENTRE AMBOS, CONTRIBUYENDO ASI AL MAYOR CONOCIMIENTO DEL FUNCIONAMIENTO DE LOS T4SS Y SU ADAPTABILIDAD A DISTINTAS FUNCIONES, ADEMAS, UTILIZAREMOS ESTE CONOCIMIENTO PARA MANIPULAR ESTOS SISTEMAS Y QUE EL T4SS DEL PATOGENO RECONOZCA AL SUSTRATO DEL T4SS CONJUGATIVO, CONSIGUIENDO ASI LA INTRODUCCION EFICIENTE DEL ADN DE ELECCION EN CELULAS HUMANAS ESPECIFICAS, POR OTRA PARTE, DURANTE LA CONJUGACION BACTERIANA, SE SECRETA A TRAVES DEL T4SS LA HEBRA DE ADN PILOTADA POR UNA PROTEINA QUE, EN EL CASO DEL SISTEMA DEL PLASMIDO R388, TIENE ACTIVIDAD INTEGRASA SITIO-ESPECIFICA EN LA CELULA RECEPTORA, OTRO OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES CARACTERIZAR DICHA ACTIVIDAD E IDEAR SISTEMAS DE PROBAR LA CAPACIDAD INTEGRASA EN EL INTERIOR DE UNA CELULA DE MAMIFERO, UNA VEZ INTRODUCIDOS LOS COMPLEJOS PROTEINA-ADN BIEN POR CONJUGACION, BIEN POR TRANSFECCION, BIEN POR VIRUS, LOS DOS OBJETIVOS ANTERIORES SE AUNAN EN UN OBJETIVO PRACTICO GLOBAL: UTILIZAR LOS T4SS PARA ENVIAR EL ADN DE ELECCION IN VIVO A CELULAS DE MAMIFERO, Y QUE ESTE ADN SE INTEGRE EN SITIOS ESPECIFICOS DEL GENOMA RECEPTOR, ESTA HERRAMIENTA DE MODIFICACION GENETICA SERIA DE SUMA RELEVANCIA, MAXIME SI PUDIESEMOS EXTENDERLA A LOS T4SS DE OTROS PATOGENOS (QUE INFECTAN OTROS TIPOS CELULARES) Y A DISTINTAS SECUENCIAS DIANA EN LA CELULA RECEPTORA, POR ELLO, EL PROYECTO SE COMPLETA CON UN ESTUDIO POR MUTAGENESIS DE LA PROTEINA ACOPLADORA DE R388, RESPONSABLE DE RECLUTAR EL COMPLEJO PROTEINA-ADN A DISTINTOS T4SS, Y DE PROTEINAS PILOTO CON DISTINTAS SECUENCIAS DIANA, PARA INTENTAR DETERMINAR LOS RESIDUOS RESPONSABLES DE LAS INTERACCIONES DE LA PROTEINA ACOPLADORA Y DE LA CAPACIDAD INTEGRASA, RESPECTIVAMENTE, ESTO SENTARIA LAS BASES PARA SU POSTERIOR MANIPULACION, ESTE PROYECTO SE BASA EN UNA SERIE DE RESULTADOS OBTENIDOS DURANTE NUESTRO PROYECTO ANTERIOR: EN PRIMER LUGAR, EL DESCUBRIMIENTO Y CARACTERIZACION INICIAL DE LA CAPACIDAD INTEGRASA SITIO-ESPECIFICA DE LA PROTEINA PILOTO EN LA CELULA RECEPTORA, CAPACIDAD NO DESCRITA HASTA AHORA PARA NINGUNA OTRA PROTEINA SIMILAR, EN SEGUNDO LUGAR, NUESTROS RESULTADOS RECIENTES DE TRANSFERENCIA DE ADN A TRAVES DEL T4SS DE BARTONELLA, Y POR ULTIMO, TRABAJOS PREVIOS DE MUTAGENESIS DE LA PROTEINA ACOPLADORA QUE DELIMITAN LOS DOMINIOS QUE QUEREMOS ANALIZAR EN PROFUNDIDAD, secreción tipo IV\conjugación bacteriana\integración sitio-específica\terapia génica\modificación genómica

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