Descripción del proyecto
LA BESNOITIOSIS BOVINA ES UNA ENFERMEDAD DEBILITANTE DE CURSO CRONICO QUE PUEDE CAUSAR CUANTIOSAS PERDIDAS ECONOMICAS DERIVADAS DE LA DEFICIENTE CONDICION CORPORAL, DESCENSO DE LA PRODUCCION LACTEA Y ABORTOS OCASIONALES EN LAS VACAS Y ESTERILIDAD EN LOS SEMENTALES, INVESTIGACIONES RECIENTES HAN CONFIRMADO LA RAPIDA EXPANSION DE LA ENFERMEDAD EN EUROPA, INCLUIDA ESPAÑA, DONDE AFECTA PRINCIPALMENTE AL GANADO DE CARNE DE PRODUCCION EXTENSIVA, DESAFORTUNADAMENTE NO EXISTEN FARMACOS NI VACUNAS DISPONIBLES PARA EL CONTROL, EL OBJETIVO GENERAL DEL PRESENTE PROYECTO ES INVESTIGAR SOBRE EL CONTROL QUIMIOTERAPEUTICO DE LA BESNOITIOSIS BOVINA, PARA ESTE PROPOSITO SE PROPONEN DOS OBJETIVOS QUE SE ALCANZARIAN EN TRES AÑOS DE PROYECTO, EL PRIMER OBJETIVO ES REFINAR UN MODELO EXPERIMENTAL DE BESNOITIOSIS BOVINA UTILIZANDO BRADIZOITOS OBTENIDOS IN VITRO, PARA ELLO, SE ESTUDIARA POR PRIMERA VEZ LA CONVERSION TAQUIZOITO/BRADIZOITO DE B, BESNOITI, VALORANDO LAS CONDICIONES QUE HAN DEMOSTRADO QUE INDUCEN ESTA CONVERSION EN OTROS PARASITOS APICOMPLEJOS, SE TENDRAN EN CUENTA LA INFLUENCIA DE LAS CELULAS DEL HOSPEDADOR Y DE FACTORES EXOGENOS QUE AFECTEN LA CONVERSION, SE ESTUDIARAN MARCADORES ADECUADOS DE TAQUIZOITO Y BRADIZOITO PARA MONITORIZAR LA CONVERSION A LO LARGO DEL TIEMPO Y SE DETERMINARA EL PROTOCOLO MAS EXITOSO PARA OBTENER BRADIZOITOS IN VITRO, MEDIANTE TRANSCRIPTOMICA SE TRATARA DE ELUCIDAR LOS MECANISMOS MOLECULARES QUE AFECTAN AL ESTABLECIMIENTO DE UNA INFECCION CRONICA, LOS BRADIZOITOS OBTENIDOS IN VITRO SE UTILIZARAN EN INFECCIONES EXPERIMENTALES EN UN MODELO DE TERNEROS MACHOS, LAS DOSIS Y RUTAS DE INOCULACION UTILIZADAS SE CORRELACIONARAN CON LOS SIGNOS CLINICOS OBSERVADOS, ASI COMO CON LA DETECCION DEL PARASITO, LA RESPUESTA INMUNE Y LAS LESIONES CAUSADAS, EL OBJETIVO FINAL ES DESARROLLAR UN MODELO EXPERIMENTAL DE BESNOITIOSIS BOVINA NORMALIZADO Y REPRODUCIBLE QUE PUEDA UTILIZARSE PARA EVALUAR CANDIDATOS TERAPEUTICOS O VACUNALES, EL SEGUNDO OBJETIVO ES INVESTIGAR QUIMIOTERAPICOS PARA EL CONTROL DE LA BESNOITIOSIS BOVINA, PARA ELLO SE CRIBARAN FARMACOS YA DISPONIBLES COMERCIALMENTE PARA OTRAS ENFERMEDADES BOVINAS Y TAMBIEN NUEVAS MOLECULAS FRENTE A TAQUIZOITOS DE B, BESNOITI CULTIVADOS IN VITRO, SE EVALUARAN CANDIDATOS TERAPEUTICOS POTENCIALES INCLUIDOS EN EL LLAMADO THE PATHOGEN BOX, ESTA ES UNA COLECCION DE 400 FARMACOS DIVERSOS QUE OFRECE GRATUITAMENTE PARA INVESTIGADORES EL CONSORCIO MEDICINES FOR MALARIA VENTURE (WWW,PATHOGENBOX,ORG), OTROS FARMACOS YA COMERCIALIZADOS PARA SU USO EN BOVINOS COMO LA NICLOSAMIDA Y EL FENBENDAZOL Y NUEVOS CANDIDATOS COMO LOS INHIBIDORES DE LAS PROTEINAS QUINASAS TAMBIEN SERAN EVALUADOS, PARA ELLO SE NORMALIZARA UN SISTEMA CON TAQUIZOITOS DE B, BESNOITI QUE EXPRESEN BETA-GALACTOSIDASA, PARA ASI PODER EVALUAR LA ACTIVIDAD FARMACOLOGICA DE NUMEROSOS CANDIDATOS SOBRE PARASITOS CULTIVADOS IN VITRO, ESTE METODO NOS PERMITIRA VALIDAR UNA SERIE DE NUEVAS MOLECULAS Y OTRAS YA COMERCIALIZADAS PARA USO EN BOVINOS Y CON PROBADA EFICACIA FRENTE A OTROS PATOGENOS, LAS DIANAS TERAPEUTICAS Y EL MODO DE ACCION DE LOS FARMACOS SE INVESTIGARA MEDIANTE MICROSCOPIA ELECTRONICA Y METABOLOMICA, ADEMAS, SE REALIZARA UNA PRUEBA IN VIVO PARA INVESTIGAR LA EFICACIA DE DOS FARMACOS QUE HUBIERA MOSTRADO UNA ACTIVIDAD PROMETEDORA IN VITRO, FRENTE A UNA INFECCION EXPERIMENTAL POR B, BESNOITI EN EL MODELO NORMALIZADO EN EL OBJETIVO ANTERIOR, BESNOITIA BESNOITI\BOVINO\MODELO EXPERIMENTAL\CRIBADO DE FARMACOS\CONTROL QUIMIOTERAPICO