Descripción del proyecto
LA BRUCELOSIS DE LOS RUMIANTES DOMESTICOS, CAUSADA POR BRUCELLA MELITENSIS Y BRUCELLA ABORTUS, ES UNA ENFERMEDAD ZOONOSICA DE GRAN IMPORTANCIA A NIVEL MUNDIAL Y EN ESPAÑA, SU CONTROL Y ERRADICACION SE VE COMPLICADO POR LAS DIFICULTADES QUE ENTRAÑAN SU DIAGNOSTICO Y LA DETECCION DE LA BACTERIA EN MUESTRAS BIOLOGICAS, AUNQUE SE HAN DESARROLLADO VARIAS VACUNAS QUE PERMITEN PREVENIR LA ENFERMEDAD EN CIERTAS CIRCUNSTANCIAS, LA PROFILAXIS DE LA ENFERMEDAD ES COMPLICADA DEBIDO A DIVERSOS FACTORES (DIFICULTAD PARA DIFERENCIAR ANIMALES VACUNADOS DE INFECTADOS, VIRULENCIA RESIDUAL DE ALGUNAS CEPAS VACUNALES, PROTECCION INSUFICIENTE DEBIDO A UNA INCORRECTA VACUNACION, RIESGO DE INFECCION HUMANA POR CEPAS VACUNALES),EL PRESENTE PROYECTO ABORDA ALGUNOS DE LOS PROBLEMAS QUE PLANTEA LA BRUCELOSIS DE LOS RUMIANTES DOMESTICOS DESDE DOS PERSPECTIVAS DISTINTAS; POR UNA PARTE, Y DEBIDO A LOS GRANDES INCONVENIENTES QUE SUPONE LA CONFIRMACION BACTERIOLOGICA DE LA INFECCION POR B, ABORTUS O B, MELITENSIS (MEDIANTE EL AISLAMIENTO DEL AGENTE) PERSIGUE LA OPTIMIZACION DE UN SISTEMA DE DETECCION DE SU ADN A PARTIR DE MUESTRAS CLINICAS DE DISTINTA NATURALEZA, MAS AUN, UNO DE LOS OBJETIVOS DE ESTE PROYECTO ES EL DESARROLLO DE UN SISTEMA DE DETECCION DEL ADN BACTERIANO BASADO EN LA AMPLIFICACION ISOTERMICA DEL MISMO MEDIANTE LA APLICACION DE LA TECNICA LAMP (LOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION); ESTA TECNICA, DE RECIENTE DESCRIPCION, SE HA IDO APLICANDO A UN NUMERO CADA VEZ MAYOR DE PATOGENOS CON EXCELENTES RESULTADOS, AUNQUE SU UTILIDAD EN LA DETECCION DE BRUCELLA SPP, APENAS HA SIDO ESTUDIADA, ADEMAS DE SU ELEVADA SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD, LA FACILIDAD CON LA QUE PUEDE LLEVARSE A CABO UNA VEZ PUESTA A PUNTO PERMITE SU APLICACION SIN LA NECESIDAD DE CONTAR CON EQUIPAMIENTO SOFISTICADO, LO QUE LA CONVIERTE EN UN RECURSO ESPECIALMENTE INDICADO PARA SU IMPLANTACION EN PAISES EN VIAS DE DESARROLLO, EN SEGUNDO LUGAR, EN EL PROYECTO SE ENSAYARA LA UTILIDAD DE LA VIA INTRADERMICA (ID) PARA LA APLICACION DE LA VACUNA REV1, USADA EN PEQUEÑOS RUMIANTES, EN LA PRESENTE SITUACION ESTA VACUNA SE APLICA POR VIA CONJUNTIVAL CON EL FIN DE MINIMIZAR LA APARICION DE FALSOS REACTORES POSITIVOS EN LAS PRUEBAS SEROLOGICAS DE DIAGNOSTICO; ESA VIA DE APLICACION PLANTEA NO OBSTANTE PROBLEMAS A LA HORA DE LOGRAR UNA PERFECTA DOSIFICACION DE LA VACUNA (MEDIDA EN GOTAS QUE DEBEN CAER EN LA CONJUNTIVA DEL ANIMAL VACUNADO) Y AL RIESGO DE PRODUCIR INFECCIONES EN EL PERSONAL QUE REALIZA LA VACUNACION A TRAVES DE LA FORMACION DE AEROSOLES O POR CONTACTO DIRECTO, POR ELLO SE REALIZARA UNA EXPERIENCIA DESTINADA EN PRIMER LUGAR A VALORAR EL RIESGO DE APARICION DE FALSOS POSITIVOS EN ANIMALES VACUNADOS POR LA VIA ID, COMPARANDO LAS RESPUESTAS INMUNES DE VARIOS GRUPOS DE ANIMALES VACUNADOS POR VIA CONJUNTIVAL, SUBCUTANEA E ID, Y DE ANIMALES SIN VACUNAR, PARA LA VACUNACION POR VIA ID SE UTILIZARA UNA TECNOLOGIA ESPECIALMENTE DISEÑADA PARA GARANTIZAR LA CORRECTA APLICACION Y DOSIFICACION DE LA VACUNA, TAMBIEN SE VALORARA LA SEGURIDAD Y LA INOCUIDAD DE ESTA VIA, SI LOS RESULTADOS SON SATISFACTORIOS SE PROCEDERA AL DESAFIO DE ANIMALES VACUNADOS POR VIA ID CON UNA CEPA VIRULENTA DE B, MELITENSIS DE ACUERDO CON LA FARMACOPEA EUROPEA, COMPARANDO LA INMUNIZACION OBTENIDA CON LA LOGRADA MEDIANTE VACUNACION CONJUNTIVAL, LA DEMOSTRACION DE LA UTILIDAD DE ESTA NUEVA VIA DE APLICACION DE LA VACUNA REV1 SUPONDRIA LA OBTENCION DE UNA FORMA MAS COMODA, SEGURA Y FIABLE PARA LA APLICACION DE LA VACUNA, BRUCELOSIS\ZOONOSIS\DIAGNOSTICO\VACUNACION INTRADERMICA\DETECCION DIRECTA\AMPLIFICACION ISOTERMA