Descripción del proyecto
LA AUXINA ES UNA HORMONA VEGETAL QUE INTERVIENE EN EL CONTROL DE LA MAYORIA DE LOS PROCESOS DEL CRECIMIENTO Y DEL DESARROLLO DE LAS PLANTAS, DESDE LA GERMINACION HASTA LA EMBRIOGENESIS. ESTA HORMONA TAMBIEN ES CLAVE EN EL CONTROL DE LA DIVISION CELULAR. RECIENTEMENTE, NUESTRO GRUPO HA PUBLICADO QUE LAS AUXINAS SE UNEN A LA PROTEINA DE CICLO CELULAR SKP2A PARA PROMOVER LA DEGRADACION DE LOS REPRESORES E2FC Y DPB, ASI COMO SU PROPIA DEGRADACION. POR ELLO, EN ESTE PROYECTO PRETENDEMOS IDENTIFICAR LA E3 LIGASA RESPONSABLE DE LA DEGRADACION DE SKP2A A TRAVES DE LA RUTA DE LA UBIQUITINA. EL SITIO DE UNION A AUXINAS SE HA DEFINIDO EN SKP2A GRACIAS A ANALISIS BIOINFORMATICOS Y ESTUDIOS DE MUTAGENESIS. SIN EMBARGO, PARA ENTENDER CON DETALLE LAS BASES MOLECULARES DE LA UNION DE SKP2A A AUXINA, PODER DEFINIR CON EXACTITUD TODOS LOS RESIDUOS IMPLICADOS EN ESTA UNION Y ANALIZAR SI LAS AUXINAS PROMUEVEN CAMBIOS ESTRUCTURALES QUE MODULEN LA FUNCION DE SKP2A, SERIA NECESARIO LA OBTENCION DE LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL A ALTA RESOLUCION DE ESTA PROTEINA TANTO UNIDA A DICHA HORMONA COMO LIBRE DE ELLA. POR ELLO, SE PRETENDE ABORDAR SU ESTUDIO ESTRUCTURAL POR DIFRACCION DE RAYOS X. POR OTRO LADO, RESULTADOS PRELIMINARES INDICAN QUE LAS AUXINAS TAMBIEN PUEDEN REGULAR EL ENSAMBLAJE DE SKP2A EN EL COMPLEJO SCF. YA QUE HASTA LA FECHA NO SE HA DESCRITO NINGUN MECANISMO DE REGULACION A ESTE NIVEL QUEREMOS ANALIZAR ESTE CONTROL EN PROFUNDIDAD. PARA ELLO, SE PRETENDE ABORDAR UNA ESTRATEGIA MULTIDISCIPLICAR QUE ENGLOBARA ESTUDIOS IN VIVO Y ESTRUCTURALES MEDIANTE TECNICAS BIOFISICAS Y CRISTALOGRAFICAS. POR OTRO LADO PRETENDEMOS ANALIZAR LA CAPACIDAD DE UNIR AUXINAS DE DIFERENTES PROTEINAS HOMOLOGAS A SKP2A DE OTRAS ESPECIES VEGETALES. EN EL PROYECTO ANTERIOR HEMOS HECHO UN GRAN PROGRESO EN LA IDENTIFICACION NUEVOS GENES (MAS DE 200 GENES) IMPLICADOS EN LA FORMACION DE LAS RAICES LATERALES MEDIANTE UNA APROXIMACION DE SEPARACION CELULAR Y GENOMICA.GRACIAS A LOS RESULTADOS DEL ANTERIOR PROYECTO ASI COMO OTROS PRELIMINARES DE LOS QUE DISPONEMOS, LOS OBJETIVOS QUE PRETENDEMOS ALCANZAR CON ESTA PROPUESTA SERIAN:- OBTENCION DE LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL MEDIANTE TECNICAS CRISTALOGRAFICAS DE SKP2A Y DEL COMPLEJO ASK1-SKP2A UNIDOS A AUXINA.- ANALISIS ESTRUCTURAL MEDIANTE TECNICAS CRISTALOGRAFICAS Y BIOFISICAS DEL COMPLEJO ASK1-SKP2A Y LA DEPENDENCIA DE SU FORMACION CON AUXINA.- IDENTIFICACION DE LA E3 LIGASA DE UBIQUITINA QUE DEGRADA SKP2A EN RESPUESTA A LAS AUXINAS.- ANALISIS EVOLUTIVO-FUNCIONAL DE LA UNION DE SKP2A A LAS AUXINAS.- ESTUDIO FUNCIONAL DE NUEVOS GENES IDENTIFICADOS EN EL PROCESO DE FORMACION DE RAICES LATERALES MEDIANTE GENETICA REVERSA Y GANANCIA DE FUNCION. UXINA\RAICES LATERALES\ESTRUCTURA DE PROTEINAS\UBIQUITINA\DIVISION CELULAR\SKP2