Descripción del proyecto
DURANTE LOS ULTIMOS DIECIOCHO AÑOS NUESTRO GRUPO HA ESTUDIADO DIVERSOS ASPECTOS DE LA CONTRIBUCION DE ESTRUCTURAS DEL MESENCEFALO (TECHO OPTICO, FORMACION RETICULAR Y NUCLEO MOTOR OCULAR COMUN) A LOS MOVIMIENTOS DE ORIENTACION VISUAL, ESTOS MOVIMIENTOS IMPLICAN EL DESPLAZAMIENTO COORDINADO Y SINERGICO DE LOS OJOS, CABEZA Y CUERPO HACIA LA ZONA DEL ESPACIO DONDE APARECE UN ESTIMULO SENSORIAL RELEVANTE, COMO OBJETIVO GENERAL, EL PRESENTE PROYECTO PRETENDE AVANZAR IDENTIFICANDO LOS NEUROTRANSMISORES EN LAS REDES NEURONALES DE ESTAS ESTRUCTURAS Y LOS RECEPTORES DE MEMBRANA PARA ESTOS NEUROTRANSMISORES, ADEMAS, SE CARACTERIZARAN ESTAS SINAPSIS EN TERMINOS ELECTROFISIOLOGICOS Y SE INDAGARA SU CONTRIBUCION EN LA MODULACION DE LA SALIDA FUNCIONAL DE LAS NEURONAS (LA FRECUENCIA DE DISPARO), ESTE OBJETIVO GENERAL SE ABORDARA DESDE UNA APROXIMACION MULTIDISCIPLINAR EMPLEANDO TECNICAS ELECTROFISIOLOGICAS (REGISTRO NEURONAL INTRACELULAR, ESTIMULACION ELECTRICA Y NEUROQUIMICA, ACTIVACION Y BLOQUEO FARMACOLOGICO DE RECEPTORES DE MEMBRANA) Y MORFOLOGICAS (INYECCION INTRACELULAR, COMBINACION DEL TRAZADO DE VIAS CON METODOS INMUNOHISTOQUIMICOS PARA LA DETERMINACION DE NEUROTRANSMISORES Y DE RECEPTORES DE MEMBRANA), POR OTRO LADO, ESTOS ESTUDIOS SE LLEVARAN A CABO DESDE UNA PERSPECTIVA COMPARADA (EMPLEANDO COMO SUJETO EXPERIMENTAL LA CARPA DORADA) Y OTRA DEL DESARROLLO (MADURACION POSTNATAL EN LA RATA), LOS OBJETIVOS ESPECIFICOS SERAN: 1) ESTUDIAR LA CONTRIBUCION DE LAS ENTRADAS SINAPTICAS GLUTAMATERGICAS Y COLINERGICAS AL UMBRAL DE RECLUTAMIENTO Y LA GANANCIA EN EL DISPARO REPETITIVO DE LAS MOTONEURONAS DEL NUCLEO MOTOR OCULAR COMUN; 2) DETERMINAR LA INFLUENCIA DE LOS FACTORES TROFICOS PROCEDENTES DE LAS ENTRADAS SINAPTICAS Y/O DEL MUSCULO SOBRE EL PATRON DE DESARROLLO DE LAS MOTONEURONAS DEL NUCLEO MOTOR OCULAR COMUN; 3) IDENTIFICAR LOS NEUROTRANSMISORES EN EL CIRCUITO TECTO-RETICULO-TECTAL; 4) ESTUDIAR LA CONTRIBUCION DE LA FORMACION RETICULAR DEL MESENCEFALO A LA GENERACION DE LOS MOVIMIENTOS DE ORIENTACION, PARA ALCANZAR LOS OBJETIVOS 1 Y 2, SE EMPLEARA LA TECNICA DE REGISTRO INTRACELULAR EN PREPARACIONES IN VITRO, SE ESTUDIARA EL EFECTO CONCURRENTE DEL GLUTAMATO Y ACETILCOLINA SOBRE DIFERENTES VARIABLES ELECTROFISIOLOGICAS: RESISTENCIA DE ENTRADA, REOBASE, UMBRAL DE CORRIENTE PARA GENERAR UNA RESPUESTA DE DISPARO TONICO Y LA PENDIENTE DE LAS RELACIONES F/I (OBJETIVO 1), SE DETERMINARAN LAS CARACTERISTICAS ELECTROFISIOLOGICAS (PROPIEDADES PASIVAS Y ACTIVAS) Y MORFOLOGICAS (MORFOMETRIA NEURONAL) DE LAS MOTONEURONAS EN TRES GRUPOS EXPERIMENTALES: LABERINTECTOMIZADOS, MANTENIDOS EN OSCURIDAD, Y POR ENUCLEACION (OBJETIVO 2), PARA LOS OBJETIVOS 3 Y 4, SE UTILIZARA LA CARPA DORADA Y SE COMBINARA EL EMPLEO DE TRAZADORES RETROGRADOS CON TECNICAS DE INMUNOHISTOQUIMICA PARA LA DETERMINACION DE NEUROTRANSMISORES (GABA/GLICINA/GLUTAMATO, OBJETIVO 3); SE LESIONARA EL HAZ TECTOBULBAR ELECTROLITICAMENTE, COMPARANDOSE LOS MOVIMIENTOS OCULARES Y DEL CUERPO INDUCIDOS DESDE TECHO Y FORMACION RETICULAR DEL MESENCEFALO, EN CONDICIONES DE INACTIVACION CON DIFERENTES ANTAGONISTAS PARA GABA Y/O GLUTAMATO (OBJETIVO 4), EN CONJUNTO LA FINALIDAD DE ESTE PROYECTO SERA CONOCER MEJOR COMO LAS ENTRADAS SINAPTICAS MODULAN LAS PROPIEDADES ELECTROFISIOLOGICAS EN LAS MOTONEURONAS ADULTAS Y COMO SE MODIFICAN CON EL DESARROLLO, ASI COMO DEFINIR LAS CARACTERISTICAS SINAPTOLOGICAS DEL CIRCUITO TECTO-RETICULO-TECTAL IMPLICADAS EN LA GENERACION DE LOS MOVIMIENTOS DE ORIENTACION, TECHO OPTICO\FORMACION RETICULAR DEL MESENCEFALO\NUCLEO MOTOR OCULAR COMUN\MOVIMIENTOS DE ORIENTACION\DESARROLLO\TECNICA DE RODAJA\MICROSCOPIA CONFOCAL\PECES\ROEDORES