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AGL2011-28542

Financiado
CENTROMEROS Y CROMOSOMAS ARTIFICIALES DE CEREALES
EL CENTROMERO ES RESPONSABLE DE LA SEGREGACION PRECISA DE LOS CROMOSOMAS DURANTE LA DIVISION CELULAR. EN LOS EUCARIOTAS SUPERIORES, EL CENTROMERO ESTA FORMADO POR MEGABASES DE SECUENCIAS DE ADN ALTAMENTE REPETIDAS, LO QUE HACE DIF... EL CENTROMERO ES RESPONSABLE DE LA SEGREGACION PRECISA DE LOS CROMOSOMAS DURANTE LA DIVISION CELULAR. EN LOS EUCARIOTAS SUPERIORES, EL CENTROMERO ESTA FORMADO POR MEGABASES DE SECUENCIAS DE ADN ALTAMENTE REPETIDAS, LO QUE HACE DIFICIL DETERMINAR LOS ELEMENTOS QUE SON ESENCIALES PARA LA FUNCION CENTROMERICA. LA INVESTIGACION QUE AQUI SE PROPONE ESTA DISEÑADA PARA CARACTERIZAR LAS SECUENCIAS CENTROMERICAS FUNCIONALES EN TRIGO Y CENTENO UTILIZANDO NUEVAS TECNICAS Y LAS LINEAS CROMOSOMICAS DESARROLLADAS EN ESTAS ESPECIES. 1. CARACTERIZAR LAS SECUENCIAS CENTROMERICAS FUNCIONALES MEDIANTE LA TECNICA DE INMUNOPRECIPITACION DE CROMATINA (CHIP) AISLANDO AQUELLAS SECUENCIAS QUE INTERACCIONAN CON LA HISTONA CENTROMERICA CENH3. ESTA MARCA EPIGENETICA DE LA FUNCION CENTROMERICA, CONFIERE UNA ESTRUCTURA PARTICULAR A LA CROMATINA CENTROMERICA Y PERMITE LA FORMACION DEL CINETOCORO Y LA SEGREGACION CROMOSOMICA. LAS SECUENCIAS PRECIPITADAS CON CENH3 SERAN CLONADAS, SE OBTENDRA UNA BIBLIOTECA DE PLASMIDOS DE TRIGO Y OTRA DE CENTENO. LA SECUENCIACION Y ANALISIS DE ESTAS BIBLIOTECAS PERMITIRA DETERMINAR LA COMPOSICION DE LA REGION CENTROMERICA FUNCIONAL DE ESTAS ESPECIES, Y ESTIMAR LOS CAMBIOS EVOLUTIVOS OCURRIDOS EN LOS CENTROMEROS DE ESPECIES RELACIONADAS.2. IDENTIFICAR LAS SECUENCIAS CENTROMERICAS FUNCIONALES EN LA MEIOSIS DE TRIGO Y CENTENO. SE DETERMINARA MEDIANTE HIBRIDACION IN SITU FLUORESCENTE (FISH) LA POSICION DE LAS SECUENCIAS EN CENTROMEROS ESTIRADOS HACIA LOS POLOS DEBIDO A SU INTERACCION CON MICROTUBULOS EN METAFASE Y ANAFASE MEIOTICAS. LAS SECUENCIAS CENTROMERICAS QUE SE SITUEN MAS CERCANAS A LOS POLOS FORMARAN PARTE DE LA REGION CENTROMERICA FUNCIONAL. POR OTRO LADO, SE DISPONE DE LINEAS DE TRIGO Y CENTENO DONDE EL CENTROMERO SE ROMPE TRANSVERSALMENTE (MISDIVISION) ORIGINANDO CROMOSOMAS TELOCENTRICOS FUNCIONALES CON DELECIONES CENTROMERICAS. SE REALIZARA FISH CON LAS SONDAS CENTROMERICAS EN LOS ESTADIOS MEIOTICOS DONDE SE PRODUCE MISDIVISION, Y EN LOS PRODUCTOS DE MISDIVISION PARA IDENTIFICAR LAS SECUENCIAS QUE SE RETIENEN EN EL CENTROMERO MISDIVIDIDO POR SER ESENCIALES PARA LA FUNCION CENTROMERICA.3. LAS SECUENCIAS CENTROMERICAS SELECCIONADAS COMO FUNCIONALES EN LOS DOS APARTADOS ANTERIORES SERAN UTILIZADAS COMO SONDAS PARA AISLAR CLONES CENTROMERICOS DE EN TORNO A 50 KB A PARTIR DE BIBLIOTECAS GENOMICAS DE COSMICOS. LOS CLONES SE SECUENCIARAN CON UN NUEVO SISTEMA DE DELECIONES UNIDIRECCIONALES PRODUCIDAS POR UN TRANSPOSON QUE PERMITE ENSAMBLAR CORRECTAMENTE REGIONES CON ADN REPETIDO. ESTOS CLONES SERAN SOMETIDOS A UN ENSAYO DE FUNCIONALIDAD CENTROMERICA MEDIANTE LA TECNOLOGIA DE CROMOSOMAS ARTIFICIALES. SI LOS FRAGMENTOS CENTROMERICOS CLONADOS CONTIENEN LOS ELEMENTOS SUFICIENTES PARA DIRIGIR LA FORMACION DE UN CINETOCORO, ENTONCES SERAN TRANSMITIDOS COMO CROMOSOMAS AUTONOMOS AL SER TRANSFORMADOS EN TRIGO MEDIANTE AGROBACTERIUM, O MEDIANTE BIOBALISTICA. LOS CROMOSOMAS ARTIFICIALES PERMITIRAN EL DESARROLLO DE PLATAFORMAS DE TRANSFORMACION YA QUE LLEVARAN EL SISTEMA CRE-LOXP DE RECOMBINACION ESPECIFICA PARA AÑADIR NUEVOS GENES EN RONDAS SUCESIVAS DE TRANSFORMACION.MEJORAR EL CONOCIMIENTO DEL ADN CENTROMERICO NO SOLO SE REQUIERE PARA COMPLETAR NUESTRA COMPRENSION DEL GENOMA DE CEREALES, SINO QUE ES UN PASO DE IMPORTANCIA CRITICA PARA EL DESARROLLO DE LA PROXIMA GENERACION DE VECTORES EN BIOTECNOLOGIA: CROMOSOMAS ARTIFICIALES DE PLANTAS QUE PUEDAN LLEVAR GRAN CANTIDAD DE INFORMACION EN UNIDADES SIMPLES Y DE FACIL MANIPULACION. RIGO\BIOBALISTICA\AGROBACTERIUM\SISTEMA CRE-LOXP\CHIP\FISH\CENH3\CROMOSOMAS ARTIFICIALES\CENTROMEROS\CENTENO ver más
01/01/2011
UCM
103K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2011-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 103K€
Líder del proyecto
Universidad Complutense de Madrid No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.
Total investigadores 3274