Descripción del proyecto
LA PRODUCCION DE ESTEROIDES OCUPA UN LUGAR MUY DESTACADO EN EL SECTOR FARMACEUTICO DEBIDO A SUS DIVERSAS APLICACIONES FARMACOLOGICAS. LA FABRICACION ACTUAL DE ESTOS COMPUESTOS SE BASA EN LA COMBINACION DE TECNOLOGIAS MICROBIOLOGICAS Y QUIMICAS, SIENDO SU PRODUCCION UNO DE LOS MEJORES EJEMPLOS DE LA APLICACION EXITOSA DE LA BIOTECNOLOGIA BLANCA A LOS PROCESOS DE FABRICACION DE PRODUCTOS QUIMICOS A GRAN ESCALA. SIN EMBARGO, RESULTA EXTREMADAMENTE SORPRENDENTE QUE LOS PROCESOS BIOTECNOLOGICOS QUE SE ESTAN UTILIZANDO ACTUALMENTE, ESTEN TODAVIA BASADOS EN EL USO DE MICROORGANISMOS SALVAJES, Y QUE LOS MICROORGANISMOS RECOMBINANTES NO HAYAN SIDO AUN EXPLOTADOS ADECUADAMENTE EN ESTE IMPORTANTE SECTOR.EN ESTE PROYECTO PRETENDEMOS APLICAR TODOS LOS CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS EN LOS DOS ANTERIORES PARA EL DISEÑO DE NUEVOS PROCESOS BIOTECNOLOGICOS QUE NOS PERMITAN OBTENER DIFERENTES SINTONAS (E.G., AD, ADD, 9OH-AD, 11OH-AD, 11OH-ADD, ETC.) A PARTIR DE MATERIAS PRIMAS DE DIFERENTES ORIGENES (VEGETAL COMO LOS FITOSTEROLES O ANIMAL COMO EL COLESTEROL) QUE SERAN UTILES PARA LA FABRICACION POSTERIOR, VIA QUIMICA, DE NUEVOS ESTEROIDES.NUESTRO ESFUERZO IRA ENCAMINADO A CONSEGUIR SEIS OBJETIVOS PRINCIPALES: I) BIOPRODUCCION DE AD, ADD Y OTROS INTERMEDIARIOS DE LAS RUTAS DE DEGRADACION DE ESTEROIDES MEDIANTE INGENIERIA METABOLICA A PARTIR DE ESTEROIDES NATURALES; II) APLICACION DE LA BIOLOGIA SINTETICA PARA LA PRODUCCION DE AD A PARTIR DE COLESTEROL U OTROS ESTEROLES; III) BIOPRODUCCION DE 11OH-AD Y 11OH-ADD; IV) BIOCONVERSION DE LA VITAMINA D3 EN SUS FORMAS ACTIVAS HIDROXILADAS; V) INGENIERIA METABOLICA PARA LA MEJORA DEL TRANSPORTE DE ESTEROIDES EN LOS PROCESOS DE BIOTRANSFORMACION Y VI) MODIFICACION DE ESTEROIDES POR ESPECIES DE GENERO ASPERGILLUS.MEDIANTE ESTOS OBJETIVOS DESARROLLAREMOS BACTERIAS RECOMBINANTES QUE PUEDAN SERVIR COMO PRUEBA DE CONCEPTO DE UNA NUEVA MANERA ORIGINAL Y ROMPEDORA DE ABORDAR LA PRODUCCION INDUSTRIAL DE ESTEROIDES A LA CARTA MEDIANTE PROCEDIMIENTOS BIOTECNOLOGICOS MODERNOS. PARA LOGRARLO, ADEMAS DE LAS HERRAMIENTAS MICROBIOLOGICAS Y BIOQUIMICAS CLASICAS, UTILIZAREMOS UN CONJUNTO DE TECNOLOGIAS GENOMICAS TALES COMO INGENIERIA METABOLICA, INGENIERIA GENETICA, BIOLOGIA DE SISTEMAS Y BIOLOGIA SINTETICA. COMO HOSPEDADORES APROVECHAREMOS, ESENCIALMENTE, LOS TRES MODELOS MICROBIANOS EXPLORADOS EN LOS PROYECTOS ANTERIORES, I.E., MYCOBACTERIUM, RHODOCOCCUS Y PSEUDOMONAS. ADEMAS, NO NOS OLVIDAREMOS DE ESCHERICHIA COLI QUE PUEDE CUMPLIR NO SOLO UN PAPEL IMPORTANTE COMO SISTEMA DE SOPORTE PARA EL DESARROLLO METODOLOGICO, SINO QUE TAMBIEN PUEDE CONVERTIRSE EN UN NUEVO SISTEMA DE REFERENCIA UTIL PARA LA PRODUCCION INDUSTRIAL DE ESTEROIDES. SIN EMBARGO, PARA ELLO SERA NECESARIO COMPRENDER MEJOR COMO SE TRANSPORTAN LOS ESTEROIDES EN LAS BACTERIAS, YA QUE ESTE ES UNO DE LOS CUELLOS DE BOTELLA MAS IMPORTANTES DEL PROCESO PRODUCTIVO. POR ULTIMO, SE ANALIZARA LA POSIBILIDAD DE UTILIZAR ASPERGILLUS COMO MODELO ALTERNATIVO A LAS BACTERIAS PARA LA BIOTRANSFORMACION INDUSTRIAL DE ESTEROIDES, DADO QUE, AL TRATARSE DE UN ORGANISMO EUCARIOTA, PUEDE FACILITAR LA EXPRESION DE ALGUNOS GENES HUMANOS O FUNGICOS IMPLICADOS EN EL METABOLISMO DE ESTEROIDES.