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BIOLOGIA MOLECULAR DEL CLOROPLASTO: CAMBIOS EN LA EXPRESION GENICA Y LA FIJACION DE CARBONO REGULADOS POR EL POTENCIAL REDOX
LA SENSIBILIDAD AL POTENCIAL REDOX ES UNA CARACTERISTICA FUNDAMENTAL DE LA RED DE REGULACION DEL CLOROPLASTO QUE AFECTA, ENTRE OTROS PROCESOS, A LA SINTESIS Y DEGRADACION DE MENSAJEROS Y A LA ACTIVIDAD DE ENZIMAS COMO LA PROTEINA...
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Descripción del proyecto
LA SENSIBILIDAD AL POTENCIAL REDOX ES UNA CARACTERISTICA FUNDAMENTAL DE LA RED DE REGULACION DEL CLOROPLASTO QUE AFECTA, ENTRE OTROS PROCESOS, A LA SINTESIS Y DEGRADACION DE MENSAJEROS Y A LA ACTIVIDAD DE ENZIMAS COMO LA PROTEINA FIJADORA DE CARBONO, LA RIBULOSA 1,5-BISFOSFATO CARBOXILASA/OXIGENASA (RUBISCO), EN ESTE PROYECTO SE ABORDAN TANTO ASPECTOS GENERALES COMO PARTICULARES DE LA REGULACION REDOX EN EL CLOROPLASTO, SE PRETENDE LLEVAR A CABO UN ANALIS CINETICO A NIVEL DE PLASTOMA DE LOS CAMBIOS DE EXPRESION GENICA INDUCIDOS POR LA TRANSICION LUZ/OSCURIDAD EN CHLAMYDOMONAS REINHARDTII, DETERMINANDO SIMULTANEAMENTE LA EVOLUCION TEMPORAL DE LAS TASA DE TRANSCRIPCION, NIVEL DE MRNA Y VELOCIDAD DE DEGRADACION DE LOS MENSAJEROS DE CADA UNO DE LOS GENES CLOROPLASTICOS, ESTO PERMITIRA UNA CLASIFICACION DE LOS GENES DE ACUERDO CON SU ESTRATEGIA DE EXPRESION EN RESPUESTA A LA LUZ, REPITIENDO ESTE ANALISIS EN PRESENCIA DE BLOQUEANTES DE LA CADENA DE TRANSPORTE FOTOELECTONICA O DE AGENTES QUE PERTURBAN LA RELACION DISULFURO/TIOL, SERA POSIBLE RECONOCER AQUELLOS GENES CUYA EXPRESION ESTA GOBERNADA POR SEÑALES REDOX Y EL ORIGEN DE DICHAS SEÑALES, ADEMAS, NOS PROPONEMOS IDENTIFICAR LOS FACTORES PROTEICOS DEPENDIENTES DE REDOX IMPLICADOS EN LA ESTABILIZACION/DESESTABILIZACION DE LOS TRANSCRITOS MEDIANTE TECNICAS DE ENTRECRUZAMIENTO E INMUNOPRECIPITACION UTILIZANDO BIEN FRAGMENTOS RELEVANTES DE LA 5¿ UTR DEL GEN RBCL (QUE CODIFICA PARA LA SUBUNIDAD GRANDE DE LA RUBISCO) O BIEN DOS PROTEINAS (RB 38 Y RB60) QUE SE SABE QUE SE UNEN A ESTA ZONA, COMO CEBO, TAMBIEN SE DETERMINARA LA NATURALEZA (ENDO O EXO) DE LA RIBONUCLEASA QUE LIMITA LA VELOCIDAD DE DEGRADACION DE LOS MRNAS, POR OTRO LADO, SE ESTUDIARA LA REGULACION REDOX DEPENDIENTE DE CISTEINAS DE LA ACTIVIDAD DE LA RUBISCO DETERMINANDO EL ORDEN SECUENCIAL DE OXIDACION DE LOS DIFERENTES RESIDUOS DE CISTEINA Y LA CONEXION CON EL GLUTATION, COMO APLICACION BIOTECNOLOGICA, SE INTENTARA OBTENER UN MUTANTE DE RUBISCO EN C, REINHARDTII CON SENSIBILIDAD INCREMENTADA A LA OXIDACION, CLOROPLASTO\REGULACION REDOX\TRANSCRIPTOMICA\ESTABILIDAD DE MENSAJEROS\RUBISCO\CHLAMYDOMONAS REINHARDTII
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