Descripción del proyecto
LA ACTIVIDAD DISULFURO REDUCTASA DE LAS TIORREDOXINAS (TRXS) MEDIA LA REGULACION REDOX TIOL-DEPENDIENTE DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA, LAS TRXS DEL CLOROPLASTO UTILIZAN EQUIVALENTES DE REDUCCION DE FERREDOXINA (FDX) FOTO-REDUCIDA VIA UNA TRX REDUCTASA DEPENDIENTE DE FDX (FTR), ESTE MECANISMO REGULATORIO RAPIDO Y REVERSIBLE ES MUY RELEVANTE EN PLANTAS POR FACILITAR LA ADAPTACION DEL METABOLISMO PLASTIDICO A CAMBIOS DE INTENSIDAD LUMINICA, DE HECHO, CASI CUALQUIER PROCESO DE ESTE ORGANULO TIENE REGULACION REDOX, LO QUE EXPLICA EL HECHO DE QUE HAYA MAS DE 20 TRXS O PROTEINAS TIPO TRX EN EL CLOROPLASTO, NUESTRO GRUPO REPORTO LA PRESENCIA EN EL CLOROPLASTO DE UNA TRX REDUCTASA DEPENDIENTE DE NADPH, NTRC, CON UN DOMINIO TRX, NTRC DEPENDE DE NADPH INDICANDO QUE LA REGULACION REDOX DEL CLOROPLASTO NO ES ESTRICTAMENTE DEPENDIENTE DE LUZ, YA QUE EL NADPH SE PRODUCE EN OSCURIDAD A PARTIR DE AZUCARES, POR TANTO, NUESTRO OBJETIVO CENTRAL DURANTE LOS ULTIMOS AÑOS HA SIDO ENTENDER A NIVEL MOLECULAR LA RELACION FUNCIONAL ENTRE ESTAS VIAS REDOX, NUESTRA PRINCIPAL CONTRIBUCION HA SIDO ESTABLECER QUE LA HOMEOSTASIS REDOX DEL CLOROPLASTO DEPENDE DE LA ACCION CONCERTADA DE AMBOS SISTEMAS REDOX, INTEGRADOS POR LA ACTIVIDAD DE LA 2-CYS PEROXIRREDOXINA (PRX), UNA ENZIMA QUE ELIMINA H2O2, DE ACUERDO CON EL MODELO PROPUESTO, EL BALANCE REDOX DE LA 2-CYS PRX, MANTENIDO POR NTRC, MODULA LA CAPACIDAD REDUCTORA DE LAS TRXS Y, CONSECUENTEMENTE, LA ACTIVACION ENZIMATICA POR LUZ, ESTOS RESULTADOS NOS LLEVARON A PROPONER UN MECANISMO PARA RESOLVER LA CUESTION PENDIENTE DE LA OXIDACION DE LAS ENZIMAS DEL CLOROPLASTO EN LA OSCURIDAD, NUESTROS RESULTADOS MOSTRARON QUE LA 2-CYS PRX PARTICIPA EN LA OXIDACION ENZIMATICA CATALIZANDO LA TRANSFERENCIA DE EQUIVALENTES DE REDUCCION DE ENZIMAS REDUCIDAS, MEDIADA POR TRXS, AL H2O2, LOS COMPONENTES REDUCTOR Y OXIDANTE DE LA REGULACION REDOX DEL CLOROPLASTO PARECEN CRITICOS PARA LA BIOGENESIS Y ESTABILIDAD DEL ORGANULO, UN CONCEPTO QUE SE BASA EN LOS FENOTIPOS SEVEROS DE PLANTULAS CARENTES DE 2-CYS PRX O DE NTRC Y TRXS, SIN EMBARGO, DADO QUE LOS COMPONENTES OXIDATIVOS DE LA REGULACION DEL CLOROPLASTO HAN PERMANECIDO ESENCIALMENTE DESCONOCIDOS; P,E, LA CONTRIBUCION DE LOS SUBTIPOS DE TRX Y OTROS FACTORES AL MECANISMO DE OXIDACION, SURGEN PREGUNTAS FUNDAMENTALES, QUE SE ABORDARAN EN ESTE PROYECTO, ANALIZAREMOS LA FUNCION DE TIOL-PEROXIDASAS ADICIONALES, TRXS OXIDANTES, Y EL PEROXIDO DE HIDROGENO EN LA RUTA OXIDATIVA, FOCALIZANDO EL ESTUDIO EN LA BIOGENESIS Y ESTABILIDAD DEL CLOROPLASTO EN FASES TEMPRANAS DEL DESARROLLO DE LA PLANTA, TAMBIEN ANALIZAREMOS COMO LA OXIDACION DE TIOLES AFECTA A LA RESPUESTA A ESTRES LUMINICO EN FASE ADULTA, ADEMAS, ESTUDIAREMOS LA FUNCION DE LA SOBREOXIDACION DE LAS 2-CYS PRXS EN LA HOMEOSTASIS REDOX DEL CLOROPLASTO, POR ULTIMO, REALIZAREMOS EXPERIMENTOS DE PULL-DOWN SEGUIDOS DE ESPECTROMETRIA DE MASAS Y UN ESCRUTINIO DE MUTANTES SUPRESORES PARA IDENTIFICAR PROTEINAS QUE INTERACCIONAN CON 2-CYS PRXS EN ESTAS FASES TEMPRANAS DE DESARROLLO DE LA PLANTA, ESTOS OBJETIVOS SE ABORDARAN MEDIANTE UNA APROXIMACION INTERDISCIPLINAR COMBINANDO METODOLOGIAS GENETICAS, BIOQUIMICAS, FISIOLOGICAS, DE MICROSCOPIA Y PROTEOMICAS, CREEMOS QUE, COMO EN PROYECTOS PREVIOS, LOS RESULTADOS DE ESTE PROYECTO GENERARAN INFORMACION RELEVANTE PARA LA COMPRENSION DE LA BASE MOLECULAR DE LA REGULACION REDOX DEL CLOROPLASTO, POR TANTO, COMO LAS PLANTAS ADAPTAN SU METABOLISMO Y DESARROLLO A LOS CAMBIOS DE INTENSIDAD LUMINICA, ARABIDOPSIS\COTILEDON\CLOROPLASTO\REGULACION REDOX\TIORREDOXINA\PEROXIRREDOXINA\ESTRES LUMINICO