Descripción del proyecto
EL CAMPO DE LA ARQUITECTURA NUCLEAR (NA) HA EXPERIMENTADO UN ENORME PROGRESO EN LOS ULTIMOS AÑOS, LA ENVOLTURA NUCLEAR (NE) SE HA CONVERTIDO EN UN ACTOR CLAVE EN LA ORGANIZACION Y FUNCION NUCLEAR, YA QUE ACTUA COMO PLATAFORMA FISICA A LA QUE SE UNEN LOS ENSAMBLES DE PROTEINAS Y LOS DOMINIOS DE LA CROMATINA, Y TAMBIEN COMO SOPORTE ESTRUCTURAL DEL NUCLEO, MIENTRAS QUE LOS MICROAMBIENTES SUB-NUCLEARES LOCALES SON NECESARIOS PARA LA CORRECTA EXPRESION GENICA Y EL MANTENIMIENTO DEL GENOMA, EL PAPEL BIOMECANICO DEL NE ES CRITICO PARA LA FORMA NUCLEAR, LA MECANICA NUCLEAR Y LA ADAPTACION A LOS CAMBIOS EN LA PRESION HIDROSTATICA O DE TURGENCIA, ESTE PROYECTO PRETENDE CUBRIR EL ESTUDIO DE LAS FUNCIONES ORGANIZATIVAS Y MECANICAS DEL NE, NUESTRO LABORATORIO HA CARACTERIZADO RECIENTEMENTE UNA FUNCION NOVEDOSA DE LA CESTA DEL COMPLEJO DE PORO NUCLEAR (NPC) EN LA LOCALIZACION ADECUADA DEL PROTEASOMA EN EL NE, UN TERRITORIO NUCLEAR DONDE EL PROTEASOMA ESTA ENRIQUECIDO, EN ESTE PROYECTO, NUESTRO OBJETIVO ES CONTINUAR Y EXPLORAR MAS A FONDO NUESTROS ESTUDIOS SOBRE COMO LA CESTA NUCLEAR CONTRIBUYE AL ENSAMBLAJE DEL PROTEASOMA NUCLEAR EN EL NE, LOS DATOS PRELIMINARES MUESTRAN QUE, EN AUSENCIA DE NB, AL MENOS DOS CHAPERONAS NECESARIAS PARA EL ENSAMBLAJE DEL PROTEASOMA SE ACUMULAN EN EL NUCLEO, COMO ESTOS CHAPERONAS SE DEGRADAN JUSTO DESPUES DE REALIZAR SU FUNCION, LA ACUMULACION NUCLEAR DE LAS MISMAS ES INDICATIVA DE UN ENSAMBLAJE DEL PROTEASOMA DEFECTUOSO, ESTE EXTREMO SE CONFIRMO PRELIMINARMENTE MEDIANTE EL USO DE ENSAYOS DE ACTIVIDAD DE PROTEASOMA IN VITRO, ADEMAS, NUESTRO LABORATORIO HA DESARROLLADO UN NUEVO METODO PARA INTERRUMPIR LA NA DE MANERA REVERSIBLE, ESTE NUEVO ENFOQUE PERMITIRA EL ESTUDIO DE LOS MECANISMOS MOLECULARES QUE CONTRIBUYEN A LA RECONSTRUCCION O REMODELACION DE NA Y A ESTUDIAR LAS IMPLICACIONES BIOLOGICAS DE TENER UNA NA DEFECTUOSA EN LA MECANICA NUCLEAR, USANDO ESTE METODO, HEMOS GENERADO EXPERIMENTALMENTE POR PRIMERA VEZ UNA DISTRIBUCION DE NPCS ANISOMETRICA DENTRO DE LA SUPERFICIE NE EN CELULAS DE TIPO SALVAJE, USANDO ESTE ENFOQUE, ESTUDIAREMOS LA CONTRIBUCION DE LA DIFUSION DE LOS NPCS, ASI COMO EL PAPEL DEL CITOESQUELETO, PROTEINAS DE LA MEMBRANA NUCLEAR INTERNA, LA CANASTA NUCLEAR Y LA CROMATINA EN EL REPOSICIONAMIENTO DE NPC A LA DISTRIBUCION ISOMETRICA NORMAL, A LO LARGO DEL PROYECTO UTILIZAREMOS UNA COMBINACION DE GENETICA, MICROSCOPIA DE ALTA RESOLUCION EN CELULAS VIVAS, BIOQUIMICA Y MANIPULACION FISICA DEL NUCLEO UTILIZANDO LA LEVADURA DE FISION COMO ORGANISMO MODELO DE CELULAS EUCARIOTAS, NUESTROS ESTUDIOS PODRIAN TENER UN GRAN IMPACTO CIENTIFICO EN EL CAMPO ACTUAL DE LA BIOLOGIA NUCLEAR Y CELULAR, ARQUITECTURA NUCLEAR\NE\NPC\PROTEASOMA\MECÁNICA NUCLEAR\S.POMBE