Descripción del proyecto
LOS ESTUDIOS SOBRE EL OXIDO NITRICO (NO) EN PLANTAS A NIVEL MOLECULAR SE HAN CENTRADO FUNDAMENTALMENTE EN LA IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION DE MODIFICACIONES POST-TRADUCCIONALES (PTMS) DE PROTEINAS MEDIADAS POR NO, TALES COMO LA NITRACION Y LA S-NITROSILACION Y EL EFECTO QUE EJERCEN SOBRE LA ACTIVIDAD BIOLOGICA, ESTUDIOS RECIENTES EN CELULAS ANIMALES HAN DEMOSTRADO QUE EL NO PUEDE AFECTAR TAMBIEN A LOS LIPIDOS GENERANDO MOLECULAS DENOMINADAS LIPIDOS NITRADOS, ESTOS DERIVADOS LIPIDICOS NITRADOS PUEDEN EJERCER PTMS SOBRE DIANAS PROTEICAS DENOMINADAS NITROALQUILACION QUE MEDIAN EFECTOS FISIOLOGICOS Y SEÑALIZADORES MAS POTENTES QUE LOS DEL PROPIO NO, SIN EMBARGO, EXCEPTUANDO TRABAJOS RECIENTES DE NUESTRO GRUPO DERIVADOS DEL PROYECTO ANTERIOR, NO EXISTE INFORMACION ACERCA DE LA PRESENCIA Y LA FUNCION DE LOS LIPIDOS NITRADOS EN ORGANISMOS VEGETALES, DE HECHO, ESTOS RESULTADOS HAN PUESTO DE MANIFIESTO LA PRESENCIA ENDOGENA DE ACIDO NITRO-LINOLENICO (NO2-LN) EN ARABIDOPSIS THALIANA, ORYZA SATIVA Y PISUM SATIVUM ASI COMO SU MODULACION A LO LARGO DEL DESARROLLO Y EN RESPUESTA A DIFERENTES SITUACIONES DE ESTRES ABIOTICO, ADEMAS, SE HA EVIDENCIADO QUE EL NO2-LN PARTICIPA ACTIVAMENTE EN EL METABOLISMO DEL NO MEDIANTE LA LIBERACION DE NO Y LA FORMACION IN VIVO DE S-NITROSOTIOLES (SNOS) PROTEICOS, IMPLICADOS EN PRACTICAMENTE TODOS LOS PROCESOS BIOLOGICOS QUE SOPORTAN LA ACTIVIDAD CELULAR, ADEMAS, LOS ESTUDIOS DE TRANSCRIPTOMICA FUNCIONAL MEDIANTE RNA-SEQ ESTABLECIERON EL PAPEL SEÑALIZADOR DE ESTAS MOLECULAS, EVIDENCIANDO QUE EL NO2-LN ESTA IMPLICADO FUNDAMENTALMENTE EN LA RESPUESTA DE DEFENSA FRENTE A DIFERENTES SITUACIONES DE ESTRES OXIDATIVO Y ESTRES ABIOTICO, A TRAVES DE LA MODULACION DE LOS NIVELES TRANSCRIPCIONALES DE PROTEINAS DE CHOQUE TERMICO (HSPS), TENIENDO EN CUENTA ESTOS ANTECEDENTES, LA PRESENTE PROPUESTA SE CENTRARA EN EL ESTUDIO DE LOS MECANISMOS DE SEÑALIZACION MEDIADOS POR LIPIDOS NITRADOS, CARACTERIZANDO LOS MECANISMOS POST-TRADUCCIONALES DE MODIFICACION DE PROTEINAS POR NITROALQUILACION, ASI COMO LAS INTERACCIONES DE LOS ACIDOS GRASOS NITRADOS CON LAS VIAS DE SEÑALIZACION TANTO EN CONDICIONES FISIOLOGICOS COMO DE ESTRES MEDIOAMBIENTAL, PARA ELLO, SE PROCEDERA A LA DETECCION E IDENTIFICACION IN VIVO DE DIANAS CELULARES DE NITROALQUILACION MEDIADAS POR LIPIDOS NITRADOS DURANTE EL DESARROLLO Y EN SITUACIONES DE ESTRES ABIOTICO EN ARABIDOPSIS THALIANA, PARALELAMENTE, SE ANALIZARAN LOS MECANISMOS DE SEÑALIZACION POR ACIDO NO2LN IMPLICADOS EN LA INDUCCION DE SNOS Y HSPS, ASI COMO LOS MECANISMOS DE CONTROL QUE MODULAN LOS NIVELES DE LIPIDOS NITRADOS, LOS DIFERENTES DISEÑOS EXPERIMENTALES QUE SUSTENTAN LOS OBJETIVOS PROPUESTOS SE REALIZARAN UTILIZANDO UNA COMBINACION MULTIDISCIPLINAR DE TECNICAS DE ESPECTROSCOPIA DE RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR (RMN), ESPECTROMETRIA DE MASAS DE TRIPLE CUADRUPOLO (HPLC-MS/MS), DE PROTEOMICA MEDIANTE MARCAJE ISOBARICO TMT Y ANALISIS POR ESPECTROMETRIA DE MASAS EN TANDEM (LC-MS/MS), MOLECULARES MEDIANTE INMUNOPRECIPITACION DE CROMATINA (CHIP) Y DE GENETICA MOLECULAR MEDIANTE LA UTILIZACION DE TRANSFORMANTES DE ARABIDOPSIS, TODOS ESTOS MECANISMOS SON DESCONOCIDOS EN PLANTAS, Y LOS RESULTADOS OBTENIDOS PODRIAN TENER RELEVANCIA BIOTECNOLOGICA Y AGRONOMICA COMO HERRAMIENTAS BIOTECNOLOGICAS DEL NO, DE HECHO, LA PROPUESTA ESTA EN CONCORDANCIA CON EL RETO NUMERO DOS DENTRO DEL PROGRAMA HORIZONTE 2020 SIENDO APOYADA POR DIFERENTES ENTIDADES Y EMPRESAS, XIDO NÍTRICO\ÁCIDOS GRASOS NITRADOS\S-NITROSILACIÓN\ESTRÉS ABIÓTICO\DESARROLLO\NITROALQUILACIÓN\SEÑALIZACIÓN\ARABIDOPSIS