Descripción del proyecto
LAS ENZIMAS DESEMPEÑAN UN PAPEL CENTRAL EN LA NATURALEZA ESENCIALMENTE DEBIDO A SU CAPACIDAD PARA CATALIZAR UN GRAN NUMERO DE REACCIONES QUIMICAS ESTEREOESPECIFICAS EN TODOS LOS ORGANISMOS VIVOS, LA UNION Y ESTABILIZACION SELECTIVA DEL ESTADO DE TRANSICION, PARECE SER EL PRINCIPAL DETERMINANTE DE LA ETAPA DE REACCION QUIMICA, LA VISUALIZACION DE LOS ESTADOS DE TRANSICION ENZIMATICA Y LOS CAMBIOS CONFORMACIONALES QUE MODULAN LA CATALISIS REPRESENTAN UN RETO EXCEPCIONAL, EN ESTE PROYECTO NOS CENTRAMOS EN LA GLUCOSIL-3-FOSFOGLICERATO SINTETASA (GPGS), UNA GLUCOSILTRANSFERASA (GT) QUE INICIA LA RUTA BIOSINTETICA DE LOS LIPOPOLISACARIDOS DE METILGLUCOSA EN LAS MICOBACTERIAS, PROPONEMOS EXPLOTAR LA FUENTE DE RADIACION DE RAYOS X MAS INTENSA DISPONIBLE HASTA LA FECHA, CAPAZ DE PRODUCIR PULSOS ULTRARRAPIDOS MIL MILLONES DE VECES MAS BRILLANTES QUE LA RADIACION DE SINCROTRON ACTUALMENTE DISPONIBLE, PARA ESTUDIAR LA CATALISIS ENZIMATICA, SE TRATA DE LA FUENTE DE LUZ LINAC COHERENT LIGHT SOURCE (LCLS) INSTALADA EN EL SLAC NATIONAL ACCELERATOR LABORATORY, UN CENTRO OPERADO POR LA UNIVERSIDAD DE STANFORD, USA, EN COLABORACION CON CIENTIFICOS E INGENIEROS DE SLAC, PRETENDEMOS VISUALIZAR LA REACCION CATALIZADA POR GPGS EN SU TOTALIDAD, ES DECIR PODER 'REGISTRAR' LA REACCION A MEDIDA QUE SUCEDE, EL EXPERIMENTO CONSISTE EN LA PRODUCCION DE MILLONES DE NANOCRISTALES DE GPGS, LOS CUALES SON EXPUESTOS A LOS PULSOS DE RAYOS X DE FORMA SERIADA, OBTENIENDO UN PATRON DE DIFRACCION POR CRISTALES ANTES DE LA DESTRUCCION POR RADIACION, PREVIA EXPOSICION A LOS RAYOS X, LOS NANOCRISTALES SON MEZCLADOS MEDIANTE UN FLUJO CONSTANTE DE SUSTRATOS, INICIANDO ASI LA REACCION Y PUDIENDO CONTROLAR EL TIEMPO DE MEZCLADO, LO QUE PERMITE LA DETERMINACION DE LA ESTRUCTURA EN EL TIEMPO, REVELANDO LA CINETICA ENZIMATICA, ESTE ESTUDIO REPRESENTARA LA PRIMERA ENZIMA ANALIZADA EN ESTE NIVEL DE DETALLE MOLECULAR, ENZIMOLOGIA ESTRUCTURAL\CATALISIS ENZIMATICA\GLICOSILTRANSFERASAS\X-RAY FREE ELECTRON LASER