Descripción del proyecto
EN BASE A LOS ANALISIS ESTRUCTURAL, FISICO Y FUNCIONAL DE VIRUS DE DISTINTAS FAMILIAS SE ESTAN IDENTIFICADO LAS BASES MOLECULARES QUE RELACIONAN LA ESTRUCTURA CON LA FUNCION, ESTOS ESTUDIOS TAMBIEN SON IMPORTANTES PARA DISEÑAR NUEVAS TERAPIAS, E INDICAN COMO UTILIZAR ESTOS ENSAMBLADOS PROTEICOS COMO PLATAFORMAS PARA APLICACIONES EN NANOTECNOLOGIA, LAS CAPSIDAS VIRALES SON ENSAMBLADOS MACROMOLECULARES DINAMICOS QUE SE AUTO-ENSAMBLAN EFICIENTEMENTE PARA FORMAR NANOCONTENEDORES, ESTOS ENSAMBLADOS VIRALES TOLERAN MULTIPLES MANIPULACIONES GENETICAS O QUIMICAS QUE FACILITAN LA GENERACION DE NANOPARTICULAS COMO NANOREACTORES, VEHICULOS DE PRESENTACION DE ANTIGENOS O TRANSPORTE DE FARMACOS, O COMO COMPARTIMENTOS ARTIFICIALES PARA DIVERSAS APLICACIONES EN MEDICINA, CIENCIA DE LOS MATERIALES Y BIOLOGIA SINTETICA,NUESTRO GRUPO LLEVA ESTUDIANDO LA BIOLOGIA ESTRUCTURAL Y MOLECULAR DE CAPSIDAS VIRALES DE DIVERSA COMPLEJIDAD DESDE HACE MAS DE 15 AÑOS, EN ESTE PROYECTO, CONTINUANDO CON NUESTROS ESTUDIOS BASADOS EN LA CRIO-MICROSCOPIA ELECTRONICA A RESOLUCION CUASI-ATOMICA COMBINADOS CON LA MICROSCOPIA DE FUERZAS ATOMICAS, PRETENDEMOS ANALIZAR DIFERENTES CAPSIDAS VIRALES PARA EL DESARROLLO DE FUTURAS APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS, NUESTROS SISTEMAS ESTAN BASADOS EN EL VIRUS DE LA BURSITIS INFECCIOSA (IBDV), EL PICOBIRNAVIRUS HUMANO (HPBV), Y EL VIRUS DE LA FIEBRE HEMORRAGICA DEL CONEJO (RHDV), MIENTRAS QUE LOS ANALISIS BASADOS EN IBDV Y HPBV ESTAN ENFOCADOS PARA ENCAPSULAR PROTEINAS EXOGENAS Y MATERIALES QUIMICOS DE INTERES, RESPECTIVAMENTE, LAS NANOPARTICULAS BASADAS EN RHDV SERAN UTILES PARA CORRELACIONAR LAS PROPIEDADES MECANICAS DE LA CAPSIDA CON SU INMUNOGENICIDAD,LOS OBJETIVOS DE ESTE PROYECTO SON:1, CONSTRUCCION DE NANOPARTICULAS HIBRIDAS DE IBDV CON PROTEINAS HETEROLOGAS, EL POLIMORFISMO ESTRUCTURAL DE LA PROTEINA DE LA CAPSIDA (PVP2) DE IBDV SE DEBE A LA INTERACCION ENTRE UNA HELICE ANFIPATICA C-TERMINAL DE PVP2 Y LA REGION C-TERMINAL DE LA PROTEINA DE ANDAMIAJE VP3, EL ENSAMBLAJE ESPONTANEO DE CAPSIDAS VACIAS (VLPS) QUE INCORPORAN PROTEINAS EXOGENAS LO REALIZAREMOS A PARTIR DE LA EXPRESION SIMULTANEA EN ESCHERICHIA COLI DE PVP2 Y LA PROTEINA VP3 (TRUNCADA EN SU REGION N-TERMINAL) FUSIONADA A OTROS PRODUCTOS GENICOS,2, OBTENCION DE VLPS DE HPBV COMO VEHICULO DE TRANSPORTE Y LIBERACION DE SUSTANCIAS QUIMICAS, A PARTIR DE UN DNA SINTETICO Y UTILIZANDO UN SISTEMA DE EXPRESION EN E, COLI, HEMOS PREPARADO TRES VARIANTES DE LA PROTEINA DE LA CAPSIDA CAPACES DE FORMAR VLPS QUE DIFIEREN EN SUS SUPERFICIES INTERNAS, MEDIANTE UN SISTEMA DE DESENSAMBLAJE/REENSAMBLAJE DE VLPS ENCAPSULAREMOS FTAHALOCIANINAS (PC), QUIMICOS FOTOACTIVOS CON GRAN POTENCIAL EN TERAPIAS FOTODINAMICAS, 3, ANALISIS ESTRUCTURAL Y NANOSCOPICO DE VLP QUIMERICAS BASADAS EN RHDV, NUESTRO GRUPO HA GENERADO VLPS DE RHDV GENETICAMENTE MODIFICADAS COMO PLATAFORMAS PARA LA PRESENTACION MULTIPLE DE ANTIGENOS HETEROLOGOS, ADEMAS DE INDUCIR RESPUESTAS HUMORAL O CELULAR ESPECIFICAS RELACIONADAS CON LOS EPITOPOS B O T INSERTADOS, LA ESTABILIDAD Y EL RENDIMIENTO DE LAS PREPARACIONES SON MUY VARIABLES COMO CONSECUENCIA DE LOS EPITOPOS INTRODUCIDOS, PRETENDEMOS REALIZAR UN ESTUDIO NANOSCOPICO Y RESOLVER LA ESTRUCTURA ATOMICA DE ESTAS VLPS PARA CORRELACIONAR SUS PROPIEDADES INMUNOLOGICAS, MECANICAS Y ESTRUCTURALES, BIOPHYSICS\CAPSID\NANOTECHNOLOGY\NEAR-ATOMIC CRYO-EM\SELF-ASSEMBLY\VIRUS-LIKE PARTICLE\NANOPARTICLE