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Structure maturation and cell entry mechanisms of ranavirus virions

The long-term goal of this proposal is to understand the molecular mechanisms of the replication cycle of nucleocytoplasmic large DNA viruses that attracted attention after the discovery of the giant Mimivirus a decade ago. Here,... ver más

31/08/2017

100K€

Presupuesto del proyecto: 100K€

Líder del proyecto

Masarykova univerzita No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

TRL 4-5

Fecha límite participación Sin fecha límite de participación.

Financiación concedida El organismo FP7 notifico la concesión del proyecto el día 2017-08-31 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

Masarykova univerzita No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

TRL 4-5

Presupuesto del proyecto 100K€

Fecha límite de participación Sin fecha límite de participación.

Descripción del proyecto The long-term goal of this proposal is to understand the molecular mechanisms of the replication cycle of nucleocytoplasmic large DNA viruses that attracted attention after the discovery of the giant Mimivirus a decade ago. Here, we focus on ranaviruses from the family Iridoviridae that have caused large economic losses in Europe and Asia and threaten wildlife biodiversity worldwide. The ranavirus disease has therefore been listed by the World Organization for Animal Health. Ranaviruses have a unique replication cycle that leads to two coexisting forms of infectious particles, naked capsids and enveloped virions, each with different mechanisms of cell egress and cell entry. Additionally, the proteinaceous capsid contains an internal membrane that presumably assists to assembly of a large DNA-free icosahedral shell. This shell is subsequently filled by the viral genome and transforms into the mature capsid by a headful packaging mechanism that is also used by some dsDNA bacteriophages. We aim to characterize the structural and mechanistic features of ranavirus assembly, maturation and cell entry by combination of cryo-electron microscopy and tomography with other complementary techniques. The novelty in our plan is application of cryo-FIB micromachining and cryo-electron tomography to visualize the intracellular steps of the ranavirus replication cycle in 3D at native conditions. The three objectives of this research project are to: (i) identify the structural basis of subunit recognition that guides assembly of large icosahedral capsids of type ranaviruses and elucidate the function of the internal membrane in this process, (ii) determine the conformational changes that accompany maturation of ranavirus capsids and regulate the headful packaging of the dsDNA genome, and (iii) ascertain the mechanisms of cell entry by the naked capsids and enveloped ranavirus virions.

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