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Single molecule imaging of twin arginine transporter assembly

The export of proteins across the cytoplasmic membrane is an essential function for all cells. In bacteria, two distinct transport mechanisms are used: The well-studied Sec pathway transports unfolded proteins via extrusion throug... ver más

14/07/2016

UOXF

222K€

Presupuesto del proyecto: 222K€

Líder del proyecto

THE CHANCELLOR MASTERS AND SCHOLARS OF THE UN... No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

TRL 4-5

Fecha límite participación Sin fecha límite de participación.

Financiación concedida El organismo FP7 notifico la concesión del proyecto el día 2016-07-14 No tenemos la información de la convocatoria

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TRL 4-5

Presupuesto del proyecto 222K€

Fecha límite de participación Sin fecha límite de participación.

Descripción del proyecto The export of proteins across the cytoplasmic membrane is an essential function for all cells. In bacteria, two distinct transport mechanisms are used: The well-studied Sec pathway transports unfolded proteins via extrusion through a membrane-bound channel. In contrast, much less is known regarding the Twin Arginine Translocation (Tat) pathway responsible for the transport of folded proteins. The complexity required for this function is beyond that of a simple conformational change, and requires the orchestration of multiple copies of multiple proteins assembled into a large protein complex. We recently developed a new form of artificial lipid bilayer that in addition to exceptional stability, and simple reconstitution of membrane proteins, is capable of single-molecule fluorescence imaging and single-channel electrical recording with gigaohm seals. Droplet Interface Bilayers (DIBs) are created by contacting aqueous droplets in a lipid/oil solution. We propose to reconstitute the minimal components of the Tat system in Droplet Interface Bilayers to create a working in vitro model of this important biological pathway. Using this method we will exploit single-molecule imaging to dissect the individual steps of Tat-driven transport, and in particular quantify the changes in stoichiometry of the assembled complex that occur during transport.

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