SILENCIAMIENTO GENICO EN APLICACIONES DE BIOTECNOLOGIA VEGETAL
EN EL CAMPO DE LOS CULTIVOS GENETICAMENTE MODIFICADOS SON ESENCIALES LA INTEGRACION ESTABLE Y EXPRESION DE LOS TRANSGENES, POR LO QUE LAS CONSTRUCCIONES USADAS PARA LA TRANSFORMACION DEBEN DISEÑARSE PARA EVITAR LOS PROCESOS DE VIG...
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Descripción del proyecto
EN EL CAMPO DE LOS CULTIVOS GENETICAMENTE MODIFICADOS SON ESENCIALES LA INTEGRACION ESTABLE Y EXPRESION DE LOS TRANSGENES, POR LO QUE LAS CONSTRUCCIONES USADAS PARA LA TRANSFORMACION DEBEN DISEÑARSE PARA EVITAR LOS PROCESOS DE VIGILANCIA FRENTE A DNA EXOGENO DEL ORGANISMO HOSPEDADOR, EL SILENCIAMIENTO DE TRANSGENES APARECE COMO CONSECUENCIA DE LA ACTIVACION DE MECANISMOS DE DEFENSA DE LA PLANTA Y PUEDE OCURRIR A NIVEL TRANSCRIPCIONAL (SILENCIAMIENTO GENICO TRANSCRIPCIONAL, TGS), EVITANDO O REDUCIENDO LA TRANSCRIPCION DEL TRANSGEN MEDIANTE METILACION DEL DNA Y/O MODIFICACIONES DE LA CROMATINA, O A NIVEL POST-TRANSCRIPCIONAL (SILENCIAMIENTO GENICO POST-TRANSCRIPCIONAL, PTGS) MEDIANTE LA ESCISION DEL MRNA DEL TRANSGEN O SU REPRESION TRADUCCIONAL,DURANTE LOS ULTIMOS 20 AÑOS SE HA PUESTO GRAN ESFUERZO EN ENTENDER EL MECANISMO DE SILENCIAMIENTO GENICO EN PLANTAS Y OTROS ORGANISMOS, PERO AUN HOY CONOCEMOS POCO SOBRE EL ORIGEN DE LA RESPUESTA A DNA EXOGENO QUE PROVOCA EL SILENCIAMIENTO EPIGENETICO DE LOS TRANSGENES,NUESTRA PROPUESTA AQUI PRESENTADA CONSISTE EN GENERAR UN SISTEMA QUE PUEDA SER UTILIZADO COMO HERRAMIENTA PARA ANALIZAR LOS NIVELES DE SILENCIAMIENTO GENICO ESTABLECIDOS EN UNA LINEA TRANSGENICA MEDIANTE LA MEDICION DE ACTIVIDAD DE UNA PROTEINA REPORTERA, EL ENSAYO BASADO EN LUCIFERASA QUE AQUI PROPONEMOS CONSISTIRA EN UN METODO SENSIBLE PARA EL ENSAYO DE EXPRESION GENICA, Y PERMITIRA LA CUANTIFICACION PRECISA DE PEQUEÑOS CAMBIOS EN TRANSCRIPCION PRODUCIDOS COMO RESULTADO DE PEQUEÑOS CAMBIOS EN SILENCIAMIENTO GENICO TRANSCRIPCIONAL O POST-TRANSCRIPCIONAL, UNA VEZ SE HAYA DEMOSTRADO LA UTILIDAD DE ESTA HERRAMIENTA EN ESTUDIOS DE PRUEBA DE CONCEPTO, PROPONEMOS UTILIZARLA PARA EL ANALISIS DETALLADO DE LOS ELEMENTOS QUE SE HAN PROPUESTO COMO POSIBLES INICIADORES DE LA RESPUESTA DE SILENCIAMIENTO DE LA PLANTA A LOS TRANSGENES: EL CONTENIDO DE LA SECUENCIA DEL T-DNA, LA ESTRUCTURA DE LOS INTERMEDIARIOS DE INTEGRACION, LOS NIVELES DE EXPRESION DEL TRANSGEN Y LAS REPETICIONES DEL T-DNA, PONIENDO UN ESPECIAL INTERES EN ENTENDER LA ESPECIFICIDAD FRENTE SECUENCIAS EXOGENAS DE LOS MECANISMOS DE SILENCIAMIENTO,ESPERAMOS QUE TRAS ESTE ANALISIS SE HAYAN ESCLARECIDO LAS SEÑALES INVOLUCRADAS EN LA INICIACION DEL SILENCIAMIENTO, UNA INFORMACION MUY UTIL PARA EVITAR PROBLEMAS EN EL CASO DE APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS TALES COMO BIOLOGIA SINTETICA O PRODUCCION HETEROLOGA DE PROTEINAS EN SISTEMAS VEGETALES, SILENCIAMIENTO\TRANSGÉN\RDDM\CROMATINA\METILACIÓN
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