Descripción del proyecto
LOS NUEVOS DESARROLLOS EN BIOLOGIA MOLECULAR TECNICA Y COMPUTACIONAL HAN DADO UN NUEVO IMPULSO A LA BIOTECNOLOGIA GENERANDO NUEVAS ENZIMAS MAS EFICACES Y EFECTIVAS QUE PUEDEN TRABAJAR BAJO CONDICIONES NO NATURALES (TEMPERATURAS ALTAS, SOLVENTES ORGANICAS, ETC,), EL DESARROLLO DE BIOCATALIZADORES ESTABLES, ROBUSTOS Y PREFERENTEMENTE INSOLUBLES REPRESENTAN UN GRAN DESAFIO EN LA INDUSTRIA DE LA BIOCATALISIS, ESTAS DIFICULTADES SE PUEDEN SUPERAR MEDIANTE LA INMOVILIZACION DE LA ENZIMA, DE LAS DIVERSAS METODOLOGIAS DISPONIBLES LAS ASI LLAMADAS CARRIER FREE (INMOVILIZACION LIBRE DE SOPORTE) QUE PRODUCEN ENZIMAS AUTO SOPORTADAS SON LAS PRESENTAN MAYORES VENTAJAS, DESDE EL PUNTO DE VISTA DE LA BIOCATALISIS LAS ENZIMAS INMOVILIZADAS AUTO SOPORTADAS, COMO LAS CLECS (DEL INGLES CROSS-LINKED ENZYME CRYSTAL) O LAS CLEAS (DEL INGLES CROSS-LINKED ENZYME AGGREATE) PRESENTAN NUMEROSAS VENTAJAS FRENTE A LAS ENZIMAS UNIDAS A SOPORTE O LIBRES: ACTIVIDADES VOLUMETRICAS DE ENTRE 10 A 1000 VECES MAS ALTOS (U/G), UNA MAYOR ESTABILIDAD FRENTE A CONDICIONES NO NATURALES (ALTA TEMPERATURA, SOLVENTES ORGANICOS, ETC,) Y EN CASOS PARTICULARES UNA SELECTIVIDAD MAS ELEVADA, AUNQUE TANTO LOS CLECS Y LOS CLEAS SE OBTIENEN MEDIANTE LA PRECIPITACION DE LA ENZIMA (EN FORMA CRISTALINA O AGREGADA), LAS DIFICULTADES INTRINSECAS, O LA FALTA DE CONOCIMIENTO, PARA CONTROLAR LA NUCLEACION Y EL CRECIMIENTO HAN MOTIVADO UNA MAYOR DEDICACION DE LA INVESTIGACION A LAS FORMAS AGREGADAS FRENTE A LA CRISTALINA, EN TRABAJOS ANTERIORES HEMOS DEMOSTRADO QUE LOS CRISTALES DE PROTEINA CRECIDOS EN MEDIOS GELIFICADOS INCORPORAN LA MATRIZ DE GEL DURANTE SU CRECIMIENTO SIN DETRIMENTO DEL EFECTO BENEFICIOSO DEL GEL, ESTO ES LA PRODUCCION DE CRISTALES DE ELEVADA CALIDAD, LA INCORPORACION DE FIBRAS DE GEL PRODUCE UN MATERIAL COMPUESTO QUE PARTICIPA DE LAS CARACTERISTICAS DE LOS ELEMENTOS QUE LO COMPONEN, GEL Y PROTEINA, LLAMADOS CRISTALES DE DE PROTEINA REFORZADOS, NUESTRO OBJETIVO ES DESARROLLAR METODOLOGIAS PARA EL ENTRECRUZAMIENTO DE ESTOS CRISTALES CON EL OBJETIVO DE PRODUCIR CRISTALES DE PROTEINA ENTRECRUZADOS REFORZADOS QUE MANTENGAN O AUMENTAN SU ACTIVIDAD ENZIMATICA, ASI MISMO SABEMOS QUE LOS GELES DE AGAROSA SON INDUCTORES DE LA NUCLEACION MIENTRAS QUE LOS GELES DE SILICE LA INHIBEN, PERO DESCONOCEMOS LAS CAUSAS FISICO-QUIMICO QUE PROVOCAN ESTOS EFECTOS, PARA ESTUDIAR ESTA INFLUENCIA DE LA NATURALEZA DEL GEL EN LA NUCLEACION Y CRECIMIENTO DE LOS CRISTALES DE PROTEINAS (ENZIMAS) SE DISEÑARAN HYDROGELES DE POROSIDAD Y DISTRIBUCION DE CARGAS CONTROLADAS SOBRE LOS QUE SE CRECERAN CRISTALES DE VARIOS SISTEMAS MODELOS,