Descripción del proyecto
EL PROYECTO QUE SE PRESENTA, QUE ES CONTINUACION DE OTROS PREVIAMENTE DESARROLLADOS, SE ORIENTA AL DESARROLLO DE METODOS DE PURIFICACION, PRECONCENTRACION, SEPARACION Y CARACTERIZACION DE NEUROPEPTIDOS, HORMONAS PEPTIDICAS, PROTEINAS Y GLICOPROTEINAS EN FLUIDOS BIOLOGICOS, DE MANERA QUE SE PUEDA OBSERVAR LA ANORMAL EXPRESION DE ESTAS SUBSTANCIAS ASOCIADA A PROCESOS PATOLOGICOS Y EN CONSECUENCIA SE PUEDA DIAGNOSTICAR LA ENFERMEDAD CORRESPONDIENTE, ASIMISMO SE PROYECTA CONTINUAR LOS ESTUDIOS, COMPLEJOS PERO DE GRAN INTERES EN CAMPOS COMO EL FARMACOLOGICO Y BIOMEDICO, SOBRE LA PRECONCENTRACION, SEPARACION Y CARACTERIZACION DE LAS NUMEROSAS GLICOFORMAS QUE PUEDE PRESENTAR UNA DETERMINADA GLICOPROTEINA, LA DIFERENTE ABUNDANCIA DE UNAS U OTRAS GLICOFORMAS, CON LA CONSIGUIENTE VARIACION DEL PERFIL ELECTROFORETICO, PERMITE DISTINGUIR ENTRE GLICOFORMAS RECOMBINANTES Y ENDOGENAS, LO QUE ES DE GRAN INTERES EN EL CONTROL DEL DOPAJE (EPO Y NESP), PERO TAMBIEN ENTRE GLICOPROTEINAS NORMALES Y PATOLOGICAS, LO QUE SE PUEDE UTILIZAR PARA EL DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES GRAVES, COMO EL SINDROME DE GLICOSILACION DEFICIENTE CONGENITA (CDG) Y EL ALCOHOLISMO (GLICOFORMAS DE TRANSFERRINA) O LAS ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES TRANSMISIBLES SI SE ABORDA EL ESTUDIO DE LOS PRIONES (PRP), UNO DE LOS OBJETIVOS DE ESTE PROYECTO, SE UTILIZARAN PARA ELLO LAS TECNICAS QUE ACTUALMENTE OFRECEN LAS MEJORES PRESTACIONES, EN LA LINEA DE DIFERENTES TRABAJOS PREVIOS DEL GRUPO, ASI, SE UTILIZARA LA CROMATOGRAFIA DE INMUNOAFINIDAD (IALC) PARA LA SEPARACION Y PURIFICACION DE PEPTIDOS, PROTEINAS Y GLICOPROTEINAS DE MATERIALES BIOLOGICOS (PLASMA, ORINA, LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO, CEREBRO DE GANADO), PARA LA PRECONCENTRACION DE ANALITO, ¿ON LINE ¿ CON LA SEPARACION POR ELETROFORESIS CAPILAR (CE), SE UTILIZARAN PRECONCENTRADORES DE EXTRACCION EN FASE SOLIDA (SPE-CE) Y DE INMUNOAFINIDAD (IACE), LA DETECCION Y CARACTERIZACION DE PEPTIDOS, PROTEINAS Y GLICOFORMAS PROTEICAS SE REALIZARA POR ESPECTROMETRIA DE MASAS (MS), UTILIZANDO DIFERENTES ANALIZADORES (IT, Q, QQQ, TOF, QTOF) POR LC-ESI-MS O MS/MS Y CE-ESI-MS O MS/MS, ADEMAS DE PONER A PUNTO PROCEDIMIENTOS BIDIMENSIONALES SPE-CE-ESI-MS O IACE-ESI-MS E INCLUSO TRIDIMENSIONALES POR ALC-IACE-ESI-MS, SE COMPLETARAN ESTOS TRABAJOS REALIZANDO ESTUDIOS POR MS CON IONIZACION/DESORCION POR LASER ASISTIDA POR MATRIZ Y ANALIZADOR DE TIEMPO DE VUELO (MALDI-TOF), Neuropéptidos\hormonas peptídicas\proteínas\glicoproteínas\eritropoyetina\transferrina\priones\MS\inmunoafinidad\SPE-CE-MS