OLIGONUCLEOTIDOS EN NANOSISTEMAS HIBRIDOS PARA TERAPIAS DIRIGIDAS POR VIA LOCAL...
OLIGONUCLEOTIDOS EN NANOSISTEMAS HIBRIDOS PARA TERAPIAS DIRIGIDAS POR VIA LOCAL Y SISTEMICA
LA VERSATILIDAD DE LOS NANOSISTEMAS LOS CONVIERTE EN NANOPATAFORMAS POTENCIALMENTE UTILES PARA DIRIGIR AGENTES TERAPEUTICAS A PRACTICAMENTE CUALQUIER CELULA O TEJIDO DEL ORGANISMO, EL RETO EN ESTE PROYECTO ES DISEÑAR, ELABORAR Y...
LA VERSATILIDAD DE LOS NANOSISTEMAS LOS CONVIERTE EN NANOPATAFORMAS POTENCIALMENTE UTILES PARA DIRIGIR AGENTES TERAPEUTICAS A PRACTICAMENTE CUALQUIER CELULA O TEJIDO DEL ORGANISMO, EL RETO EN ESTE PROYECTO ES DISEÑAR, ELABORAR Y CARACTERIZAR (IN VITRO-IN VIVO) NANOSISTEMAS HIBRIDOS LIPIDO-POLIMERICOS PARA ADMINISTRACION SISTEMICA Y LOCAL COMO TRANSPORTADORES ESPECIFICOS DE OLIGONUCLEOTIDOS (GAPMERS), LOS MODELOS DE ENFERMEDAD ELEGIDOS SON OSTEOPOROSIS (OP) Y EL LEYOMIOMA UTERINO (LU), YA QUE LAS NANOPARTICULAS (NPS), DESPUES DE LA INYECCION INTRAVENOSA (IV), TRANSPORTAN EL OLIGONUCLEOTIDO A LAS CELULAS MADRE MESENQUIMALES (MSC) PARA AUMENTAR LA FORMACION OSEA Y POR ADMINISTRACION LOCAL A LAS CELULAS MADRE SOMATICAS (SSC) IMPLICADAS EN LA GENERACION DEL TUMOR UTERINO, SE PROPONE LA TECNICA DE MICROFLUIDICA COMO ALTERNATIVA A LOS METODOS CONVENCIONALES DE DOBLE EMULSION PARA LA PREPARACION DE NPS, PARA CONSEGUIR UN TRANSPORTE SELECTIVO, LA SUPERFICIE DE LAS NPS SE DECORA CON LIGADOS PARA EVITAR LA OPSONIZACION Y DIRIGIR EL GAPMER A SU LUGAR DE ACCION, POR TANTO, SE SELECCIONAN LOS LIGANDOS, SE OPTIMIZA EL PROCEDIMIENTO DE UNION Y SE DETERMINA LA CINETICA DE DESORCION, LAS NPS SON CARACTERIZADAS EN CUANTO A TAMAÑO, POLIDISPERSIDAD, POTENCIAL Z, COMPOSICION DE CADA CAPA Y DE SU SUPERFICIE, INTEGRIDAD, EFICACIA DE ENCAPSULACION DE LOS GAPMERS Y CONDICIONES DE LIOFILIZACION, LOS GAPMERS SE SELECCIONAN DE ACUERDO CON LA EFICACIA MOSTRADA EN CULTIVOS DE MSC DE RATON (RMSC) Y EN CULTIVOS DE CELULAS DERIVADAS DE LU, RESPECTIVAMENTE, SE COMPRUEBA LA EFICACIA IN VITRO Y LA CITOTOXICIDAD DE LAS GAPMER-NPS ASI COMO SU BIODISTRIBUCION INTRACELULAR, EL EFECTO OSTEOGENICO DE LAS MMSC TRANSFECTADAS Y LA CITOTOXICIDAD DE LAS NPS PARA OP SE TESTA EN CULTIVOS DE RMSC, EL EFECTO ANTITUMORAL EN UL, SE EVALUA EN CULTIVOS EX-VIVO DE CORTES DE TUMOR DE PACIENTES, LA EVALUACION DE GAPMER-NPS INVISIBLES FUNCIONALIZADAS CON UN APTAMERO ESPECIFICO PARA HUESO, SE LLEVA A CABO EN RATONES HEMBRA OSTEOPOROTICAS, EN PRIMER LUGAR, SE REALIZAN LOS ENSAYOS DE BIODISTRIBUCION MARCANDO LOS COMPONENETES DE LAS NPS CON DIFERENTES RADIOISOTOPOS PARA SU LOCALIZACION DESPUES DE SU ADMINISTRACION IV, EL EFECTO OSTEOGENICO DE LAS NP SE VALORA EN RATONAS VIVAS OSTEOPOROTICAS MEDIANTE DENSITOMETRIA ANTES Y DURANTE EL PERIODO DE TRATAMIENTO Y MEDIANTE ANALISIS HISTOLOGICOS AL FINALIZAR EL EXPERIMENTO UNA VEZ SACRIFICADO EL ANIMAL, SIMULTANEAMENTE, EL EFECTO IN VIVO DE LA INYECCION INTRATUMORAL DE LAS GAPMER-NPS DESARROLLADAS PARA UL SOLAS O EN COMBINACION CON NP ENCAPSULANDO FARMACOS CON POTENCIALES APLICACIONES EN LEIMOMAS POR VIA LOCAL, SE EVALUAN EN UN MODELO DE XENOINJERTO DESARROLLADO EN RATON, EL TIEMPO DE PERMANENCIA DE LAS NPS EN EL TUMOR SE MIDE EXTERNAMENTE DESPUES DE LA INYECCION INTRATUMORAL DE NPS MARCADAS CON UN RADIOISOTOPO EN RATONES VIVOS, LA EFICACIA DEL NANOSISTEMA SE VALORA CONTROLANDO EL TAMAÑO DEL TUMOR POR ECOGRAFIA MIENTRAS QUE UNA VEZ SACRIFICADO EL ANIMAL SE REALIZAN LOS ANALISIS HISTOPATOLOGICOS DE TUMOR Y ORGANOS PRINCIPALES COMO MEDIDA DE EFICACIA Y TOXICIDAD, LOS RESULTADOS IN VIVO PERMITEN ESTABLECER UN REGIMEN DE DOSIFICACION RACIONAL, SEGURO Y EFICAZ TANTO PARA LAS NPS POR VIA IV COMO INTRATUMORAL, POR ULTIMO, PARA DESARROLLAR UNA NANO-FORMULACION POTENCIALMENTE TRANSFERIBLE A LA INDUSTRIA O A LA CLINICA, PROPONEMOS EL DESARROLLO DE UN NANOSISTEMA PARA GAPMERS CON UN APTAMERO ESPECIFICO PARA EL TEJIDO OSEO HUMANO UTIL PARA LA OP, NANOPARTÍCULAS HÍBRIDAS\NANOPARTÍCULAS FUNCIONALIZADAS\MICROFLUÍDICA\LIBERACIÓN DIRIGIDA\GAPMERS\SILENCIAMIENTO GÉNICO\APTÁMEROS.ver más
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